"NCI-H2171 epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
SNU878細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L cell細胞、CMECs細胞、A-875細胞
HT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM35細胞、MIHA細胞、SNU1細胞
Panc 04.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mono-Mac-1細胞、T2(174 x CEM.T2)細胞、L428細胞
細胞生長：貼壁
NCI-H2171 epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存：使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細胞傳代方法：３-４天換液１次。
RASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly8細胞、TPC-1細胞、WSU-DLCL-2細胞
Hs-688A-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP.FGC細胞、ANA1細胞、HTR-8/SV-neo細胞
HCC0070細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1395細胞、TO 175.T細胞、DHL-16細胞
Colon 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL-31細胞、Ls-174-T細胞、SkMel31細胞
H6c7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y-1細胞、253JB-V細胞、LL/2細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NCI-H2171 epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系
細胞生長特性：懸浮生長
細胞形態(tài)特性：聚團懸浮
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
P-815細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag8細胞、Human fetal lung fibroblast 1細胞、Panc-327細胞
Ca-Ski細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIM1215細胞、KPNRTBM1細胞、L-1210細胞
Sp2/0-Ag14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL5細胞、OCI-Ly 8細胞、CEMO-1細胞
MDA-MB-361細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LICR-LON-HN6細胞、FU-MMT-1細胞、Walker256-TC細胞
CAKI 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI Ly10細胞、MILE SVEN1細胞、RC-4B/C細胞
LC-2-Ad細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC 39細胞、HLFa細胞、WB-F344細胞
RINm-5F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan-2細胞、NCIH1781細胞、hs 68細胞
HPB-ALL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Eca 109細胞、H3396細胞、PCI-4.2細胞
LTEP a2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63 AG 8.653細胞、870細胞、Malme-3 M細胞
C4I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：V 79-4細胞、SL-1細胞、MUM2B細胞
NCI-H2171 epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系
HepG2/C3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-102PT細胞、HUCCT1細胞、LS411細胞
Tb 1-Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL-HCC細胞、NCIH1688細胞、GM07404D細胞
SCL-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-266-4細胞、UCLA-SO-M20細胞、NCI-H647細胞
Hs343T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon 26細胞、HPDLF細胞、FAO-1細胞
RCC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549細胞、KPL1細胞、COLO 320 HSR細胞
COLO 680N細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVG(P12)細胞、J45.01細胞、5637細胞
COLO 320細胞系相關(guān)產(chǎn)品：THLE-2細胞、UM-UC-3細胞、NCI-H1876細胞
SKNSH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR 432細胞、Pfeiffer細胞、AR41P細胞
L-6TG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-2003細胞、A875細胞、GS-9L細胞
ME-1 [Human leukemia]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞、U373MG細胞、NCIH2591細胞
P36細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGSMC細胞、NCIH2227細胞、NHDF細胞
H3396細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1693細胞、KYSE 410細胞、WSU-DLCL(2)細胞
NRK 49F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA205細胞、YAC-1細胞、T-CAM2細胞
beta TC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI1788細胞、HUVEC-C[HUVEC]細胞、STTG1細胞
HEK/293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMM5A細胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞、L-M[TK-]細胞
NCIH650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K7M2 wt細胞、T 24細胞、MDA-361細胞
NCIH2009細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FD-LSC-1細胞、CCD1095Sk細胞、CT26.WT細胞
COLO684細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GP5d細胞、MDA134細胞、SNUC1細胞
CMT 64細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGBC11T細胞、M20 [Human melanoma]細胞、NEC8細胞
OCM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BV-173細胞、GM03320D細胞、Mv1.Lu細胞
CA-46細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-95-8細胞、Daoy細胞、9L細胞
RPMI no. 8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHT-101細胞、G292細胞、Rat Basophilic Leukemia-1細胞
KHYG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3細胞、GM00346細胞、BALB 3T3 clone A31細胞
Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SSP-25細胞、H6c7細胞、HANK細胞
P3-NS1/1Ag 4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SIRC細胞、VERO C 1008細胞、H-2122細胞
SK-MEL-2-LUC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VE細胞、CORL105細胞、B16-F10細胞
NCIH2141細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Large Cell Lung Cancer-103H細胞、BJAB-1細胞、MESSA-DX5細胞
Tn-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC97H細胞、AG06814-M細胞、16-HBE細胞
U266 B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH727細胞、NHA細胞、H920細胞
M619細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H498細胞、PC-10細胞、UM-RC-2細胞
GM05384細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RWPE1細胞、MCF10-A細胞、SW403細胞
Melan-a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC15細胞、HNE1細胞、HPAF-2細胞
Daudi細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 837細胞、SK-Mel 1細胞、NKM1細胞
SU86-86細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-4細胞、S3 HeLa細胞、UPCI:SCC090細胞
MM1.S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TKB1細胞、LM8細胞、V-79細胞
TFK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ID8細胞、H520細胞、HCC1143細胞
H-1092細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 863.T細胞、MCF 10A細胞、H-1238細胞
HPAF-II細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Reh細胞、DMS114細胞、A375-SM細胞
MCF 7B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J-111細胞、CCD 1112SK細胞、Hep 2細胞
NE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：159 PT細胞、MGC803細胞、HSC-6細胞
DR2R1610細胞系相關(guān)產(chǎn)品：253J細胞、50.B1細胞、Tregs細胞
NCI-747細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos-2G6-4C10細胞、CHG5細胞、FRO81-2細胞
U-343MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-601細胞、SW480E細胞、DB細胞
DAN-G細胞系相關(guān)產(chǎn)品：aNK細胞、MC 3T3-E1細胞、Ramos-2G6-4C10細胞
PCI-4.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR22-R1細胞、D-283細胞、DMS114細胞
HS5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：huH 1細胞、PLB985細胞、COLO829細胞
MDA-MB157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hUC-MSC細胞、CZ-1細胞、SUM-102細胞
SK-N-AS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FDCP-1細胞、NCI N87細胞、CCRF細胞
HLMVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN 7細胞、ML-2細胞、HPaSteC(HPSC)細胞
M-G63細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMel-5細胞、SUIT-2細胞、HLE-B3細胞
RPMI2650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H747細胞、HEC-1-A細胞、HS688AT細胞
NCI-H2171 epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系
Human Corneal Endothelial Cells-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC-7901/DDP細胞、BAEC細胞、UPCI-SCC-154細胞
CCD841CoTr細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-72細胞、LC2/Ad細胞、SGC-7901細胞
AZ-521細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MADISON LUNG TA-109細胞、RL952細胞、CG-4細胞
Sp2/0-Ag14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL5細胞、BEAS 2B細胞、Lung cancer-1/squamous細胞
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