"NCI-H196 epithelioid cells人肺癌細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 正確的細胞復(fù)蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。 PK15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 2664細胞、HEC151細胞、Mel RM細胞 QSG-7701細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 626細胞、Y3-Ag1.2.3細胞、RPTC細胞 A-375.S2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN-229細胞、H35細胞、HCT 15細胞 細胞生長:貼壁 NCI-H196 epithelioid cells人肺癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代的一般方法:開始細胞傳代前,仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細胞(單層細胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細胞,挑選生長狀態(tài)良好,細胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細胞;先用PBS洗液沖洗細胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細胞瓶內(nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。 細胞傳代方法:1:4-1:6傳代;每周換液2-3次。 OCI-Ly18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC9724細胞、C-643細胞、LoVo細胞 ZR75-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSB-1細胞、SF126細胞、Large Cell Lung Cancer-103H細胞 U-2932細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 839.T細胞、P3HR1細胞、NRK52E細胞 MyLa 2059細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 melanoma細胞、KYSE 520細胞、mRTEC細胞 GOS-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-837細胞、8305C_1細胞、OV-90細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 NCI-H196 epithelioid cells人肺癌細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導(dǎo)致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復(fù)蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。 SW-1783細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRhK4細胞、CHOK1細胞、U14細胞 2BS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:alphaTC1 Clone 6細胞、NCI-H2030細胞、H69細胞 RT 112細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC/PRF5細胞、H-2291細胞、KYSE0520細胞 SW-480細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H78細胞、MSB-1細胞、BALL-1細胞 BE2M17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC-PK-1細胞、KU 19-19細胞、Ketr-3細胞 AtT-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1436細胞、HConEpic細胞、A-253細胞 RH30SJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:End1/E6E7細胞、TCC-SUP細胞、HT22細胞 McArdle RH-7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WB F344細胞、786.O細胞、OVCAR-420細胞 H-510細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-2 ad細胞、FHL124細胞、SK-BR3細胞 UMR-106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK 10a細胞、T8細胞、HOS-TE85細胞 NCI-H196 epithelioid cells人肺癌細胞系 MDAMB175VII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCV-29細胞、CT-26細胞、WM451細胞 BC-024細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGH-UI細胞、SUM 159細胞、MV-1-Lu細胞 B16/F0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/ag細胞、SW-839細胞、ATN1細胞 95D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCUM-1細胞、C4-2細胞、NTHY-ORI3.1細胞 MADB 106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT FET細胞、KMS18細胞、KMS18細胞 Mel-MeWo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UK Pan-1細胞、K562細胞、P3HR1-BL細胞 Mel-MeWo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UK Pan-1細胞、K562細胞、P3HR1-BL細胞 NOZC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:F442A細胞、MFE-280細胞、Hs 636.T細胞 MLO-Y4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HELF細胞、Hs 832(C).T細胞、Jiyoye (P-2003)細胞 H-220細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cor L51細胞、SV-HUC-1細胞、PK 15細胞 EA.Hy926細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1770細胞、SCCVII細胞、P36細胞 Madison 109細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-BL2141細胞、SK RC 52細胞、H510細胞 RPMI #1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KE37細胞、HSC4細胞、HS578T細胞 MDA-MB-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A 172細胞、KGN細胞、LOUNH91細胞 P-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF/CD18細胞、184A1細胞、Spodoptera frugiperda clone 9細胞 NK-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WPMY1細胞、CAL-62細胞、MDA-MB-361細胞 Tb 1 Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF.10A細胞、BEL 7402細胞、NHRF細胞 H1869細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA12細胞、SW900細胞、H283細胞 COLO 829細胞系相關(guān)產(chǎn)品:F81細胞、Swiss3T3細胞、SK-UT-1細胞 RASMCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U2932細胞、JIMT1細胞、SKNBE2C細胞 L M (TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UT-7細胞、FRTL-5細胞、58F細胞 H1105細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP 126細胞、SW579細胞、D-324MED細胞 SK.MEL.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Co 115細胞、HCT.116細胞、PLA801C細胞 Ls-174-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H87細胞、MC-CAR細胞、RMS13細胞 Hela-Ap-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-2/ad細胞、HSKMC細胞、MKN1細胞 JJN3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DrG細胞、SK-RC 39細胞、MiaPaca.2細胞 NCIH2073細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCECs細胞、L23/P細胞、ECC1細胞 NCI-H1355細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1618細胞、COLO-1細胞、T 24細胞 MPC-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-886細胞、NCIH1703細胞、MOLM-14細胞 H1623細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY7細胞、HO-8910PM細胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞 NCI-HUT-596細胞系相關(guān)產(chǎn)品:675T細胞、A 253細胞、CWR22Rv1細胞 HCC1806細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA420細胞、GM03569細胞、COV-434細胞 HCC1419細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞、LC-1Sq細胞、SK-RC 52細胞 HCT 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KNS42細胞、P-388D1細胞、WEHI 231細胞 RH30SJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:End1/E6E7細胞、TCC-SUP細胞、HT22細胞 H2405細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALL-1細胞、C3H/10T1/2 CL8細胞、P3 NS1 Ag4細胞 H748細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MJ細胞、H-2009細胞、CAL 27細胞 H711細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMCD-3細胞、SW 982細胞、MGHU3細胞 UPCI:SCC090細胞系相關(guān)產(chǎn)品:alpha-TC1.6細胞、HP615細胞、EFM-19細胞 H2087細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIN6細胞、HCC0827細胞、CCD-33Co細胞 RAW264細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TYK-nu細胞、CD18細胞、HIEC6細胞 T98G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS4:11細胞、130T細胞、NSI/1-Ag4-1細胞 CHL/IU細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-747細胞、DoTc2細胞、MOLP8細胞 MV-1-Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIU-87/Adr細胞、NOZC-1細胞、T 98 G細胞 BIC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB/c 3T3 clone A31細胞、SW-756細胞、ONS76細胞 MT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-294-T細胞、BIU87細胞、DMS273細胞 Tu-212細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-475細胞、NCI-H526細胞、V79-4細胞 LX-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-435S細胞、OVCA433_Bast細胞、GM04678細胞 HPAF-II細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Reh細胞、DMS114細胞、A375-SM細胞 WERI-Rb1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GCT細胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞、CAOV3細胞 Mouse podocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC 813細胞、MEC-1細胞、L5178Y-R細胞 NCI-H196 epithelioid cells人肺癌細胞系 HCC-2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Embryonic Skin細胞、N-9細胞、KYSE-520細胞 HCC1419細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞、SUM-149PT細胞、NCI-A549細胞 MCCAR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGHAVSMC細胞、SK.OV.3細胞、FCCH1018細胞 RT 112細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC/PRF5細胞、Fetal Human Lens-124細胞、BTI-Tn5B14細胞 "
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