"NCI-H69 epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細胞施加胰酶選擇，因為總是貼壁不牢的細胞先脫落，對腫瘤細胞來說，這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點，直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積１/１０v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細胞！
NS20Y細胞系相關產(chǎn)品：MA-782細胞、bEnd.3[BEND3]細胞、Mc Coy細胞
C22 (Clara)細胞系相關產(chǎn)品：EFM-192C細胞、HCC1833細胞、NCI/ADRRES細胞
B10BR細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H838細胞、OVCA5細胞、IPEC-1細胞
細胞生長：貼壁
NCI-H69 epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細胞傳代方法：１：２—１：４傳代，每周換液２次
3396細胞系相關產(chǎn)品：MDA MB 361細胞、Panc 05.04細胞、PC-3M-2B4細胞
SK-N-BE(2C)細胞系相關產(chǎn)品：MOLP8細胞、INS1E細胞、LM2-4175細胞
BT-483細胞系相關產(chǎn)品：C8161細胞、JROECL33細胞、U-87-MG細胞
PC-9S1細胞系相關產(chǎn)品：TK 10細胞、MDA-MB436細胞、RMG-I細胞
LM1細胞系相關產(chǎn)品：MDA231-LM2-4175細胞、TCC Sup細胞、149PT細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
NCI-H69 epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系
細胞生長特性：懸浮生長，聚團
細胞形態(tài)特性：聚團懸浮
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通常控制在１-２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散；３)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細胞密度達到８０%以后重復１項操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
C3A細胞系相關產(chǎn)品：TCC-SUP細胞、GAK細胞、CII細胞
YAC細胞系相關產(chǎn)品：NUGC-2細胞、SUDHL5細胞、MCA-205細胞
NT2/D1細胞系相關產(chǎn)品：H-2170細胞、KYSE0410細胞、Y79細胞
MASMC細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB-468-RED細胞、K562/ADR細胞、RPMI8226細胞
NS20-Y細胞系相關產(chǎn)品：F442-A細胞、HeLa229細胞、FM-88細胞
HT-22細胞系相關產(chǎn)品：HCC 70細胞、Lewis lung carcinoma line 1細胞、Walker 256細胞
CHG5細胞系相關產(chǎn)品：BE2-M17細胞、OCI-Ly1細胞、UCLA-SO-M20細胞
HEK293T/17細胞系相關產(chǎn)品：SKNSH細胞、University of Arizona Cell Culture-893細胞、SUM149PT細胞
OSKM-1細胞系相關產(chǎn)品：CMEC/D3細胞、Hs 839.T細胞、CCD-841-CoTr細胞
H-146細胞系相關產(chǎn)品：HCC-1359細胞、H64細胞、KALS1細胞
NCI-H69 epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系
IPLB-SF-21-AE細胞系相關產(chǎn)品：SKMEL24細胞、SCC154細胞、JC細胞
OsACL細胞系相關產(chǎn)品：Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞、LU65細胞、SUM-159-PT細胞
BrCL18細胞系相關產(chǎn)品：MUTZ3細胞、SKMEL-2細胞、VK-2/E6E7細胞
hTERT-HME1細胞系相關產(chǎn)品：A-673細胞、COLO 320 HSR細胞、NL-20細胞
beta-TC6細胞系相關產(chǎn)品：BCPAP細胞、TE3細胞、Normal Rat Kidney-52E細胞
JJN3細胞系相關產(chǎn)品：DrG細胞、SK-RC 39細胞、MiaPaca.2細胞
JJN3細胞系相關產(chǎn)品：DrG細胞、SK-RC 39細胞、MiaPaca.2細胞
2780CP細胞系相關產(chǎn)品：KOPN8細胞、TFH細胞、CHP-100細胞
SW837細胞系相關產(chǎn)品：MRC 5細胞、293AD細胞、EBC-1細胞
BNL-HCC細胞系相關產(chǎn)品：Walker 256細胞、Vero細胞、QGY細胞
VMM5A細胞系相關產(chǎn)品：CX-1細胞、Fox/NY細胞、7860細胞
KYSE 70細胞系相關產(chǎn)品：REC細胞、Pt-K1細胞、Kit225-K6細胞
Hs 706.T細胞系相關產(chǎn)品：NUGC4細胞、HCC1438細胞、HCC-1599細胞
JM-Jurkat細胞系相關產(chǎn)品：PFSK-1細胞、TE85細胞、Hs274T細胞
NCI-H2405細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB-134VI細胞、OV3121細胞、MHHCALL2細胞
Kit 225 K6細胞系相關產(chǎn)品：H-1385細胞、251 MG細胞、VMM5細胞
VMM5A細胞系相關產(chǎn)品：CX-1細胞、Fox/NY細胞、7860細胞
LTEPsm細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H596細胞、ONS76細胞、LC-1/sq細胞
MDAPCa-2b細胞系相關產(chǎn)品：TOV-112D細胞、U-373MG細胞、HS-683細胞
MDAPCa-2b細胞系相關產(chǎn)品：TOV-112D細胞、U-373MG細胞、HS-683細胞
MX1細胞系相關產(chǎn)品：BXPC3細胞、ASH-3細胞、Lu-65細胞
D10細胞系相關產(chǎn)品：HDLM2細胞、ACC-2細胞、AAV293細胞
B16-BL6細胞系相關產(chǎn)品：C6661細胞、COLO 357細胞、HLEC-B3細胞
NBL_S細胞系相關產(chǎn)品：KCL22細胞、HEK.EBNA細胞、Ocular Choroidal Melanoma-1細胞
CEM細胞系相關產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞、HEK-293H細胞、H740細胞
HL 60細胞系相關產(chǎn)品：SW 948細胞、B-104細胞、RERFLCMS細胞
H-1522細胞系相關產(chǎn)品：KNS-42細胞、CAL-78細胞、Hs 766.T細胞
NCI H82細胞系相關產(chǎn)品：SP2/0 Ag-14細胞、SNU668細胞、Clone Y-1細胞
UM-UC-14細胞系相關產(chǎn)品：CF-1 MEF細胞、GL261細胞、ZYM-DIEC02細胞
ACT-1細胞系相關產(chǎn)品：LC-2-Ad細胞、SW1990細胞、H1688細胞
CEM/C1細胞系相關產(chǎn)品：H-2106細胞、DH-82細胞、NK-92.05細胞
Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞系相關產(chǎn)品：B10BR細胞、C-33A細胞、HuH 6細胞
HT clone H9細胞系相關產(chǎn)品：AsPC-1細胞、KU-19-19細胞、NCI-H2081細胞
OsA-CL細胞系相關產(chǎn)品：TE11細胞、TE6細胞、NRK 52E細胞
D562細胞系相關產(chǎn)品：MIA-PaCa-2細胞、HFT8810細胞、SHSY5Y細胞
KASUMI6細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1435細胞、OCI/AML-3細胞、RMG1細胞
HN-6細胞系相關產(chǎn)品：ANA-1細胞、MDA-MB 453細胞、OSA細胞
ssMCF7細胞系相關產(chǎn)品：Mc Coy細胞、NCI-H2106細胞、BEL/FU細胞
ssMCF7細胞系相關產(chǎn)品：Mc Coy細胞、NCI-H2106細胞、BEL/FU細胞
OUMS23細胞系相關產(chǎn)品：LA795細胞、WEHI-164細胞、Panc 03.27細胞
Suzhou Human Glioma-44細胞系相關產(chǎn)品：52PE細胞、H-157細胞、B16 melanoma F10細胞
Hs445細胞系相關產(chǎn)品：SK-RC-39細胞、CAL85-1細胞、CEM-C1細胞
alpha-TC1.6細胞系相關產(chǎn)品：Line 522細胞、MV 4;11細胞、Leydig細胞
KTA7細胞系相關產(chǎn)品：NuTu-19細胞、M07e細胞、QGY7701細胞
TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞系相關產(chǎn)品：NCI-1155細胞、H-2052細胞、Panc05.04細胞
HA細胞系相關產(chǎn)品：HOS/MNNG細胞、UCW 100細胞、SCC VII細胞
VMRC-RCZ細胞系相關產(chǎn)品：SW-839細胞、H-358細胞、Panc02.03細胞
LC-2/ad細胞系相關產(chǎn)品：TE-85 clone 5細胞、SDBMSC細胞、AG 9細胞
Be Wo細胞系相關產(chǎn)品：MDAMB330細胞、LNCaP C4-2B細胞、IMR-32細胞
HUT-226細胞系相關產(chǎn)品：RCC23細胞、COLO-699細胞、OVCAR10細胞
H-4細胞系相關產(chǎn)品：MV522細胞、EOC20細胞、RBL 1細胞
NCI-H69 epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系
Hs27細胞系相關產(chǎn)品：K299細胞、OS-732細胞、HCC-44細胞
Co 115細胞系相關產(chǎn)品：COLO829細胞、PLB985細胞、P-36細胞
RMC細胞系相關產(chǎn)品：NBL-2細胞、GB-1細胞、SUM 102PT細胞
NT2/D1細胞系相關產(chǎn)品：H-2170細胞、B16F1細胞、MDA-MB-175-VII細胞
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