"NCI-H1836 epithelioid cells人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng):細(xì)胞凍存好了,接下來(lái)要注意什么問(wèn)題呢?沒(méi)錯(cuò),就是記得到時(shí)間了,拿出來(lái)復(fù)蘇。那么,細(xì)胞復(fù)蘇的過(guò)程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢?細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬(wàn)不要使用不健康的細(xì)胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長(zhǎng)行為。凍存細(xì)胞:補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開(kāi)始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長(zhǎng)至70%單層時(shí)收獲細(xì)胞,計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù),用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng),應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)24小時(shí))內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每?jī)龃婀懿怀^(guò)1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒(méi)有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個(gè)最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞,以免其中的一個(gè)液氮罐出現(xiàn)問(wèn)題!細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點(diǎn):當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時(shí),有可能會(huì)出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要;其實(shí),細(xì)胞復(fù)蘇只是一個(gè)簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn),不過(guò)這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié),不然,也不一定會(huì)盡如人意。例如說(shuō),人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護(hù)目鏡;盡量降低DMSO對(duì)細(xì)胞的損傷等等。 CBRH7919細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP100細(xì)胞、MDA-PCa-2b細(xì)胞、BT 325細(xì)胞 H2073細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:253J B-V細(xì)胞、CSQT-2細(xì)胞、McA-RH8994細(xì)胞 P3X63 AG 8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C33細(xì)胞、P-2003細(xì)胞、PANC-10-05細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 NCI-H1836 epithelioid cells人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 冷凍細(xì)胞解凍程序:依據(jù)細(xì)胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細(xì)胞均無(wú)法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同時(shí),務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行所需之實(shí)驗(yàn)。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對(duì)細(xì)胞而言差異極大,請(qǐng)務(wù)必依據(jù)細(xì)胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過(guò)冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。依據(jù)細(xì)胞種類和濃度,于無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細(xì)胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內(nèi)之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對(duì)絕大多數(shù)細(xì)胞而言,1%以下之冷凍保護(hù)劑DMSO,不會(huì)對(duì)細(xì)胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細(xì)胞中去除,待第二天確定細(xì)胞生長(zhǎng)或貼附良好后再去除即可。惟對(duì)極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會(huì)造成細(xì)胞分化之細(xì)胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細(xì)胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細(xì)胞均勻混合后,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 細(xì)胞傳代方法:每周換液2-3次。 Duke University 145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M619細(xì)胞、D-283 Med細(xì)胞、Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞 WSU-DLCL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UWB1.289+BRCA1細(xì)胞、MuM-2C細(xì)胞、H.Ep.-2細(xì)胞 SUM102PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-920細(xì)胞、TE 354.T細(xì)胞、Chang liver細(xì)胞 4T1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BSC40細(xì)胞、T173細(xì)胞、SK_HEP1細(xì)胞 DV90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SRA01/04 (HLE)細(xì)胞、RenCa細(xì)胞、373 MG細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 NCI-H1836 epithelioid cells人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:懸浮生長(zhǎng) 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū) 常見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)中一些問(wèn)題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源,所以血清的含量多少會(huì)對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過(guò)20%,因?yàn)楹窟^(guò)低會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)不足,過(guò)高則會(huì)破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時(shí)須更換培養(yǎng)基?視細(xì)胞生長(zhǎng)密度而定,或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時(shí)間,按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換;3)購(gòu)買的復(fù)蘇細(xì)胞,為何會(huì)有脫落?因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^(guò)程中不可避免的會(huì)有震蕩,收到后可以離心收集;4)購(gòu)買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少,大都是因?yàn)殡x心過(guò)程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性損傷,以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長(zhǎng)隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購(gòu)買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,常見(jiàn)原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過(guò)程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí),均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。 C8-D1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN9D細(xì)胞、CCRF CEM細(xì)胞、CSQT-2細(xì)胞 SUM149-PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC-LM3細(xì)胞、Vero E-6細(xì)胞、NOMO-1細(xì)胞 LS174T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Lung-65細(xì)胞、Ra #1細(xì)胞、P3/X63/Ag8細(xì)胞 HFL 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIA Paca2細(xì)胞、Panc 04.03細(xì)胞、HCC-1937細(xì)胞 SF 539細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU739細(xì)胞、HTR-8/SV-neo細(xì)胞、NH6細(xì)胞 KU 812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A9 (Hamprecht)細(xì)胞、SK-MEL-28細(xì)胞、SKUT-1細(xì)胞 QGP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H220細(xì)胞、MT-2J細(xì)胞、LS-180細(xì)胞 HRA-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H441細(xì)胞、aTC1-6細(xì)胞、HL 60細(xì)胞 KASUMI1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:9L細(xì)胞、Tca-8113細(xì)胞、NCI-H295R細(xì)胞 IR 983F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-231 #4175細(xì)胞、Detroit-562細(xì)胞、HCT GEO細(xì)胞 NCI-H1836 epithelioid cells人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系 SKO3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:143 B細(xì)胞、NCIH460細(xì)胞、CV-1 in Origin Simian-7細(xì)胞 3AO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TH1細(xì)胞、H711細(xì)胞、RN細(xì)胞 SNU-182細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-104細(xì)胞、Hep 3B細(xì)胞、MDA-MB-175細(xì)胞 MNNG/HOS Clone F-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJSA1細(xì)胞、DHL-16細(xì)胞、GM02131A細(xì)胞 A 72細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AC29細(xì)胞、SW-579細(xì)胞、UPCISCC154細(xì)胞 H1435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc5.04細(xì)胞、NCIH1395細(xì)胞、190PT細(xì)胞 NCI-H660細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL5細(xì)胞、GM03573細(xì)胞、LS 1034細(xì)胞 HIBEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-BL1339細(xì)胞、DOK細(xì)胞、NG-108-15細(xì)胞 UCD-MLA-144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-900細(xì)胞、L132細(xì)胞、SK MEL 5細(xì)胞 Hca-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARO81細(xì)胞、RASMCs細(xì)胞、SK Mel 2細(xì)胞 EBC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCMEC細(xì)胞、Institute for Medical Research-32細(xì)胞、NCI-H650細(xì)胞 HCT-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H-295細(xì)胞、CNE1細(xì)胞、SK.MEL.28細(xì)胞 Ramos 2G6.4C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NSI/1-Ag4-1細(xì)胞、Hx147細(xì)胞、no.11細(xì)胞 NCI-H28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nittby-Salford 1細(xì)胞、L929(NCTC)細(xì)胞、H774細(xì)胞 M210B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-20細(xì)胞、NCIH358細(xì)胞、H-920細(xì)胞 SK LU 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EMT6細(xì)胞、LA-N-6(OAN)細(xì)胞、NCIH1836細(xì)胞 SW839細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC-2細(xì)胞、Kit 225 K6細(xì)胞、SNU182細(xì)胞 BC-025細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos G6.C10細(xì)胞、Human Microglia Clone 3細(xì)胞、NCI-H748細(xì)胞 253J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM3569細(xì)胞、Mouse Podocyte Clone-5細(xì)胞、RT4P細(xì)胞 FU-MMT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KG-1a細(xì)胞、H-522細(xì)胞、SK-Mel 2細(xì)胞 NCIH2141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Large Cell Lung Cancer-103H細(xì)胞、BJAB-1細(xì)胞、MESSA-DX5細(xì)胞 Jurkat-E6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Baby Hamster Kidney-21細(xì)胞、WM-451Lu細(xì)胞、NIH 3T6細(xì)胞 NCIH2171細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-148細(xì)胞、NCI-H2073細(xì)胞、LICR-LON-HN6細(xì)胞 HO-8910PM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T6細(xì)胞、TYKnu細(xì)胞、T98G細(xì)胞 HCC-366細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2591細(xì)胞、A 549細(xì)胞、LC-1細(xì)胞 ESC-410細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS-143B細(xì)胞、FOXNY細(xì)胞、HANK-1細(xì)胞 HOS-TE85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SkMel31細(xì)胞、MS1細(xì)胞、OCI/AML-4細(xì)胞 TCam-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMES-1細(xì)胞、NB-9細(xì)胞、HFF細(xì)胞 B16-F0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs737T細(xì)胞、AK細(xì)胞、HOEC細(xì)胞 PLA 802細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-7ADR細(xì)胞、Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細(xì)胞、MGH-UI細(xì)胞 LU451細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J82 COT細(xì)胞、NCI-H1238細(xì)胞、MRC 5細(xì)胞 COV434細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SRS-82細(xì)胞、NWA細(xì)胞、FL83B細(xì)胞 F9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 8402細(xì)胞、NCI-H2052細(xì)胞、A-1847細(xì)胞 NCI-H508細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-H細(xì)胞、NCI660細(xì)胞、JVM3細(xì)胞 S16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MS751細(xì)胞、Hep 3B2細(xì)胞、BEL-7404細(xì)胞 WRL-68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS411細(xì)胞、MeT-5A細(xì)胞、SUDHL-5細(xì)胞 VeroC1008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細(xì)胞、CEMO-1細(xì)胞、EST81細(xì)胞 HEL9217細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kato-III細(xì)胞、H1836細(xì)胞、TE 85.T細(xì)胞 Vero 76 clone E6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFO 27細(xì)胞、HMCB細(xì)胞、PaTu-8988s細(xì)胞 COLO 824細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KY-270細(xì)胞、NP-69細(xì)胞、HEK293-EBNA細(xì)胞 SK-MEL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H28細(xì)胞、Mel624細(xì)胞、NCI-SNU-C1細(xì)胞 ZYM-DIEC02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPaSteC(HPSC)細(xì)胞、RPPVEC細(xì)胞、NL20SV細(xì)胞 HCC1419細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lymph Node Carcinoma of the prostate細(xì)胞、LC-1Sq細(xì)胞、SK-RC 52細(xì)胞 T98細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUPB-15細(xì)胞、CF PAC-1細(xì)胞、MV-4-11細(xì)胞 NS20Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MA-782細(xì)胞、bEnd.3[BEND3]細(xì)胞、Mc Coy細(xì)胞 RA 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC 1469細(xì)胞、A549 ATCC細(xì)胞、A-704細(xì)胞 CAL 12T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS-TE85細(xì)胞、SW-1990細(xì)胞、MES-SA/Dx-5細(xì)胞 AHH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GOTO細(xì)胞、DKMG細(xì)胞、NCI-HUT-596細(xì)胞 NCIH209細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-N-5細(xì)胞、Capan 1細(xì)胞、VE細(xì)胞 NCI-SNU-216細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPL4細(xì)胞、ANA-1細(xì)胞、H4-II-EC3細(xì)胞 ABC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-852-T細(xì)胞、Sci-1細(xì)胞、R1800[RA]細(xì)胞 NCI-H1836 epithelioid cells人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系 NCl-H157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-027細(xì)胞、HITT15細(xì)胞、MDA-134細(xì)胞 M619細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H498細(xì)胞、Psi2-DAP細(xì)胞、NCI-H1568細(xì)胞 Michigan Cancer Foundation-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-239細(xì)胞、LC-1 sq細(xì)胞、rRTEC細(xì)胞 LS174T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Lung-65細(xì)胞、SHIN-3細(xì)胞、MeWo細(xì)胞 "
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