"YTMLC-90 epithelioid cells人肺鱗癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:肺鱗癌;男性
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn):(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-196℃,使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開(kāi)。(3)在裝入液氮時(shí),要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo),使液氮直達(dá)瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時(shí)更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無(wú)色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無(wú)勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過(guò)夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時(shí),再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時(shí),再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時(shí),最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見(jiàn),凍存半年后,取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。
CAL-62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:mRMEC細(xì)胞、KYSE180細(xì)胞、HS766T細(xì)胞
HFL-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tregs細(xì)胞、HT1376細(xì)胞、H-295細(xì)胞
H735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 934.T細(xì)胞、IPLB-Sf21AE細(xì)胞、CAL 12細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
YTMLC-90 epithelioid cells人肺鱗癌細(xì)胞系
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化,需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前,細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來(lái)凍存細(xì)胞。對(duì)于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對(duì)于無(wú)血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細(xì)胞條件無(wú)血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無(wú)血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)BSA的新鮮無(wú)血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存:計(jì)數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細(xì)胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以1×10(7)到5×10(7)細(xì)胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無(wú)血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開(kāi)始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過(guò)可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存:使用分離試劑從基層分離細(xì)胞,分離時(shí)盡可能溫和,使對(duì)細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細(xì)胞,確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以5×10(6)到1×10(6)細(xì)胞/ml密度,在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開(kāi)始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過(guò)可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
A-204細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 205細(xì)胞、P31/FUJ細(xì)胞、NCI H345細(xì)胞
KYSE270細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:2780CP細(xì)胞、P3JHR1細(xì)胞、BALB/3T3細(xì)胞
UMUC14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mono Mac 1細(xì)胞、CT26-clone 25細(xì)胞、MNNG-HOS細(xì)胞
BNL.1ME A.7R.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H740細(xì)胞、NCI-SNU-C1細(xì)胞、3T3-Swiss albino細(xì)胞
WERI-Rb1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GCT細(xì)胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細(xì)胞、CAOV3細(xì)胞
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
YTMLC-90 epithelioid cells人肺鱗癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代?體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長(zhǎng)接觸抑制的特性,也就是說(shuō)當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候,它就會(huì)停止生長(zhǎng),及時(shí)傳代后,細(xì)胞的生長(zhǎng)得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如谷眈肢或生長(zhǎng)因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染;試劑保存不當(dāng);比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度;讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補(bǔ)加谷酷肢或生長(zhǎng)因子等;用無(wú)抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測(cè)支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺(tái)操作細(xì)胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí),必須注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。
SHSY5Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1666細(xì)胞、MEF細(xì)胞、FL-83B細(xì)胞
GTL-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H35 Reuber細(xì)胞、SNG-M細(xì)胞、Colo205細(xì)胞
SKRC20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C32 mel細(xì)胞、SV40-HCEC細(xì)胞、CCD-112CoN細(xì)胞
Capan 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAOV3細(xì)胞、BHP 10-3細(xì)胞、NCI-SNU-5細(xì)胞
SUM 52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA415細(xì)胞、SU86-86細(xì)胞、SKRC-20細(xì)胞
CCD-841CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPF細(xì)胞、Tsup-1細(xì)胞、hTERT-RPE細(xì)胞
SKRC-52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VA-ES-BJ細(xì)胞、Ly19細(xì)胞、Sci-1細(xì)胞
SW 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD18Co細(xì)胞、UMUC-14細(xì)胞、CAOV4細(xì)胞
NCI-H520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs888T細(xì)胞、DC2.4細(xì)胞、HIEC-6細(xì)胞
HT 144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE1-LUC細(xì)胞、UMC-11細(xì)胞、PC-9細(xì)胞
YTMLC-90 epithelioid cells人肺鱗癌細(xì)胞系
SY5Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DBTRG-05MG細(xì)胞、BHT-101細(xì)胞、TE11細(xì)胞
HN6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPB-ALL細(xì)胞、NOZ細(xì)胞、MOPC細(xì)胞
Bovine ENDometrial cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:N9細(xì)胞、MDA-MB-134-VI細(xì)胞、CF Pac1細(xì)胞
GP5d細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKES-1細(xì)胞、OCI-AML2細(xì)胞、Vero細(xì)胞
HUC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H187細(xì)胞、Astrocyte type I clone細(xì)胞、TE-12細(xì)胞
IEC-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AdHek細(xì)胞、OCI-LY-7細(xì)胞、Hs 839.T細(xì)胞
IEC-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AdHek細(xì)胞、OCI-LY-7細(xì)胞、Hs 839.T細(xì)胞
Cates 1B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP2細(xì)胞、67NR細(xì)胞、A549細(xì)胞
MLM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1581細(xì)胞、NPA-87細(xì)胞、GM03320D細(xì)胞
Hs 739.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U138-MG細(xì)胞、HUVSMC細(xì)胞、OVCA 432細(xì)胞
293AD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AHH-1細(xì)胞、GC-1spg細(xì)胞、UCLA-SO-14細(xì)胞
NCI-SNU-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IHH細(xì)胞、NTERA-2細(xì)胞、T98細(xì)胞
H1781細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAC1細(xì)胞、mREC細(xì)胞、HEC151細(xì)胞
NCIH1693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4-2 B細(xì)胞、Metastatic Variant-522細(xì)胞、COLO-320DM細(xì)胞
OV1-P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H740細(xì)胞、SK-ChA-1細(xì)胞、UPCI:SCC154細(xì)胞
UPCI:SCC154細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PTK1細(xì)胞、Lu99A細(xì)胞、HSC3細(xì)胞
Huh7.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs819.T細(xì)胞、L-WRN細(xì)胞、Mono Mac6細(xì)胞
H1703細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DAKIKI Clone 1細(xì)胞、MDA1386細(xì)胞、CACO2細(xì)胞
GM02219D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMa-bm細(xì)胞、WSU-DLCL2細(xì)胞、HFT8810細(xì)胞
GM03190細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1092細(xì)胞、H69細(xì)胞、WiDr/S細(xì)胞
Tu-177細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUG-Chor1細(xì)胞、NIH:OVCAR-10細(xì)胞、WM2664細(xì)胞
C-4-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan2細(xì)胞、beta-TC6細(xì)胞、Jijoye細(xì)胞
PNT1/A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1599細(xì)胞、Hs729T細(xì)胞、NRK-49F細(xì)胞
CAL51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB231細(xì)胞、HEK/293細(xì)胞、HSC細(xì)胞
Ramos細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL51細(xì)胞、PC-9細(xì)胞、C32 mel細(xì)胞
VAESBJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ELD-1細(xì)胞、NCI-H322T細(xì)胞、MyLa2059細(xì)胞
Hs281T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBdSMC細(xì)胞、T9細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 4細(xì)胞
MESSA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M109細(xì)胞、KYSE-70細(xì)胞、L1210細(xì)胞
NCI H747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NKL細(xì)胞、HeLa-S3細(xì)胞、Colon 26細(xì)胞
COS7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB/3T3 cl. A31細(xì)胞、HR1K細(xì)胞、Vx2細(xì)胞
NCI-H2085細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-6細(xì)胞、H-7721細(xì)胞、HT55細(xì)胞
MA-104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rin-M-5F細(xì)胞、RT4-D6P2T細(xì)胞、UMR106細(xì)胞
MARC145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRH-0201細(xì)胞、IPLB-SF-21-AE細(xì)胞、HCC2157細(xì)胞
SK-N-DZ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-1847細(xì)胞、EC109細(xì)胞、BEL 7405細(xì)胞
MDAMB415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293F細(xì)胞、SCL-I細(xì)胞、MDA436細(xì)胞
U373-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞、HCC1954細(xì)胞、Me-Wo細(xì)胞
2E8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT 8細(xì)胞、U-87細(xì)胞、SKUT1細(xì)胞
KYSE 520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2122細(xì)胞、RC-4B/C細(xì)胞、NCIH889細(xì)胞
KU812-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:639V細(xì)胞、B35細(xì)胞、Pro-5 Lec1.3c細(xì)胞
CAL39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-UT-1細(xì)胞、RBE細(xì)胞、BT-20細(xì)胞
H2106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIMEC細(xì)胞、SW 403細(xì)胞、RCC-10RGB細(xì)胞
KM12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Farage Original Line細(xì)胞、NCI-H165細(xì)胞、SW-839細(xì)胞
HEI193細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DLD1細(xì)胞、138MG細(xì)胞、UMNSAH/DF-1細(xì)胞
THP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBVP細(xì)胞、WM115-mel細(xì)胞、MUTZ3細(xì)胞
MEF (CF-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPDE6c7細(xì)胞、RMG-I細(xì)胞、1301細(xì)胞
A427細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD 841 CoN細(xì)胞、SW 954細(xì)胞、RH-35細(xì)胞
RC92A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1648細(xì)胞、CCC-HEH-2細(xì)胞、HUT 125細(xì)胞
Evsa T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-539細(xì)胞、U138細(xì)胞、IOSE 80細(xì)胞
PK15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 2664細(xì)胞、HEC151細(xì)胞、Mel RM細(xì)胞
SCH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUP T1細(xì)胞、Metastatic Variant 522細(xì)胞、DoHH-2細(xì)胞
PC-3M-2B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GBC-SD細(xì)胞、HUT125細(xì)胞、Jurkat77細(xì)胞
YTMLC-90 epithelioid cells人肺鱗癌細(xì)胞系
He La細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C81-61細(xì)胞、EST50細(xì)胞、M210B4細(xì)胞
HEK-AD293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KASUMI1細(xì)胞、526細(xì)胞、624mel細(xì)胞
JVM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:YES-2細(xì)胞、H2198細(xì)胞、SK-MES細(xì)胞
SKRC20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C32 mel細(xì)胞、PC-9細(xì)胞、IM95細(xì)胞
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