"ARH-77 Cell:人漿細(xì)胞白血病細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)：淋巴母細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：懸浮
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
KP 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Saos2細(xì)胞、D341Med細(xì)胞、CCD 19Lu細(xì)胞
EPC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M059J細(xì)胞、SPCA1細(xì)胞、HCC1419細(xì)胞
C26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS123細(xì)胞、TNC-1B12B4細(xì)胞、H9c2細(xì)胞
SW 1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OB2細(xì)胞、SKMEL1細(xì)胞、U-2 OS細(xì)胞
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
ARH-77 Cell:人漿細(xì)胞白血病細(xì)胞系
細(xì)胞傳代時(shí)消化的問題：可以這樣說，對(duì)于需要消化傳代的細(xì)胞，每一次的消化都是對(duì)這個(gè)細(xì)胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過這個(gè)問題，自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長(zhǎng)的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞，狀態(tài)越來越差勁了。對(duì)于這個(gè)問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以，越長(zhǎng)越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細(xì)胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個(gè)問題就是，細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)是不一樣的，每一個(gè)細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細(xì)胞消化同樣的時(shí)間對(duì)細(xì)胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會(huì)有脾氣啊。我后來對(duì)消化的方法進(jìn)行了改良。爭(zhēng)取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細(xì)胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對(duì)比觀察看誰長(zhǎng)的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對(duì)胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶?jī)?nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤(rùn)洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時(shí)置于顯微鏡下觀察，待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時(shí)候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對(duì)比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細(xì)胞間隙明顯，細(xì)胞獨(dú)立開來的時(shí)候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實(shí)際情況你自己把握）。這是第四步。其實(shí)還可以有第五步，對(duì)于特別難消化的細(xì)胞和對(duì)胰酶特別敏感的細(xì)胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷降到最低，保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了，如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個(gè)是需要你在實(shí)驗(yàn)中能夠自己用心去體會(huì)的。建議你接受一個(gè)新細(xì)胞時(shí)把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細(xì)胞對(duì)胰酶的要求。便于你后續(xù)實(shí)驗(yàn)的開展。將細(xì)胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷之外，還有一個(gè)更重要的作用就是，可以程度地把細(xì)胞吹打成單個(gè)單個(gè)的狀態(tài)，不成片不連體。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請(qǐng)嚴(yán)格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散；３)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細(xì)胞密度達(dá)到８０%以后重復(fù)１項(xiàng)操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長(zhǎng)不宜超過７２小時(shí))；２)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化，請(qǐng)將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請(qǐng)優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請(qǐng)及時(shí)做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
WB-F344細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H211細(xì)胞、Kit225/K6細(xì)胞、WM239A細(xì)胞
SMA-560細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞、801-D細(xì)胞、Tu-686細(xì)胞
BNL.1ME A.7R.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H740細(xì)胞、NCI-SNU-C1細(xì)胞、3T3-Swiss albino細(xì)胞
SupT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HB611細(xì)胞、HCC1171細(xì)胞、H4-IIE-C3細(xì)胞
J82COT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK MES 1細(xì)胞、P3-X63-Ag 8.653細(xì)胞、SJCRH30細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：懸浮生長(zhǎng)
ARH-77 Cell:人漿細(xì)胞白血病細(xì)胞系
貼壁細(xì)胞消化傳代時(shí)通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時(shí)，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對(duì)細(xì)胞施加胰酶選擇，因?yàn)榭偸琴N壁不牢的細(xì)胞先脫落，對(duì)腫瘤細(xì)胞來說，這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡(jiǎn)單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對(duì)于較難消化的細(xì)胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對(duì)細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點(diǎn)，直接加酶消化應(yīng)該不會(huì)有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積１/１０v。消化到有細(xì)胞脫落。不過有人說EDTA對(duì)細(xì)胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡(jiǎn)單、省事；效果很好并且不損失細(xì)胞！
細(xì)胞形態(tài)特性：淋巴母細(xì)胞樣
MS-751細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1184細(xì)胞、COLO.205細(xì)胞、H847細(xì)胞
CAL120細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR90細(xì)胞、OCILY-19細(xì)胞、RK-13細(xì)胞
BRL3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-164細(xì)胞、NTera-2D1細(xì)胞、COLO-205細(xì)胞
GM02132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-620細(xì)胞、VMM5A細(xì)胞、A549ATCC細(xì)胞
B16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-08.13細(xì)胞、CCD33Co細(xì)胞、Panc-8_13細(xì)胞
NCIH1373細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H774細(xì)胞、BAR-T細(xì)胞、OVTOKO細(xì)胞
UACC812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-719細(xì)胞、HAEC細(xì)胞、SW1990細(xì)胞
ARH-77 Cell:人漿細(xì)胞白血病細(xì)胞系
22Rv-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC7901細(xì)胞、HCC-70細(xì)胞、Monomac-1細(xì)胞
AU-565細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LCLC-103H細(xì)胞、Clone 166細(xì)胞、Panc04.03細(xì)胞
NP69SV40T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3E1細(xì)胞、HOEC細(xì)胞、MGHU1細(xì)胞
SP2/0 Ag-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cloudman S91 melanoma細(xì)胞、KTA7細(xì)胞、Psi-2-DAP細(xì)胞
NCI-H69C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK.MEL.28細(xì)胞、KNS42細(xì)胞、HEK;293細(xì)胞
Leydig細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTSC-3細(xì)胞、BPH-1細(xì)胞、MC3T3-L1細(xì)胞
Hs-600-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1781細(xì)胞、TMK1細(xì)胞、FM88細(xì)胞
H-520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGP-1細(xì)胞、UPCI-SCC090細(xì)胞、CPAE細(xì)胞
WM 266-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT 167細(xì)胞、SNU484細(xì)胞、CTLL-2細(xì)胞
HCC 2185細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1930細(xì)胞、P3X63Ag8-6-5-3細(xì)胞、N2a細(xì)胞
COLO320/DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pro-Lec1.3C細(xì)胞、Jurkat-FHCRC細(xì)胞、GOTO細(xì)胞
LLC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JHH-7細(xì)胞、MDA-MB435細(xì)胞、JROECL33細(xì)胞
Nakata-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2172細(xì)胞、JVM-2細(xì)胞、NCIADRRES細(xì)胞
RSC 96細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ej138細(xì)胞、SKMEL-31細(xì)胞、IEC 18細(xì)胞
PGBE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Simpson細(xì)胞、Clone 15 HL-60細(xì)胞、C6661細(xì)胞
EU-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FUOV1細(xì)胞、ZYM-DIEC02細(xì)胞、HEK-293F細(xì)胞
PTK 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 699細(xì)胞、NS1-Ag4/1細(xì)胞、hCMEC/D3細(xì)胞
HR8348細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL10細(xì)胞、LS174T細(xì)胞、DMS153細(xì)胞
HOK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T98 G細(xì)胞、HSC-2細(xì)胞、SW962細(xì)胞
Opossum Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK RC 52細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細(xì)胞、NHA細(xì)胞
H-2029細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC-929細(xì)胞、UM-UC3細(xì)胞、SK MES 1細(xì)胞
HEK-293H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC7901/DDP細(xì)胞、H1650_CO細(xì)胞、10T1/2細(xì)胞
CHL-CL-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AE1201細(xì)胞、H-2228細(xì)胞、H125細(xì)胞
2780CP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KOPN8細(xì)胞、TFH細(xì)胞、CHP-100細(xì)胞
HIT T-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL23細(xì)胞、SGC 7901細(xì)胞、SK RC 20細(xì)胞
HEK-293-FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NP-69細(xì)胞、32D:cl3細(xì)胞、C3H/10T1/2-clone8細(xì)胞
SCL I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCW 100細(xì)胞、SF-295細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-33細(xì)胞
MCA-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MILE SVEN 1細(xì)胞、MOLT 3細(xì)胞、OCI Ly10細(xì)胞
JTC-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G 292 Clone A 141B1細(xì)胞、HSC2細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415細(xì)胞
H1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT 125細(xì)胞、OSK-1細(xì)胞、NK-10A細(xì)胞
NCIH208細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L6565細(xì)胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4細(xì)胞、M-G63細(xì)胞
GM02131A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16/F10細(xì)胞、PLC-8024細(xì)胞、MDA MB 453細(xì)胞
A-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM192A細(xì)胞、NPA 87細(xì)胞、SN4741細(xì)胞
HuP-T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-CO-1細(xì)胞、SMMC-7721細(xì)胞、HCT-116細(xì)胞
Roswell Park Memorial Institute 7951細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-ADR-RES細(xì)胞、SKN-AS細(xì)胞、A-375.S2細(xì)胞
H1238細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Dysplastic Oral Keratinocyte細(xì)胞、PC-3M-IE8細(xì)胞、A549-Taxol細(xì)胞
FRTL 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW264細(xì)胞、OCI/AML-5細(xì)胞、NS1-Ag 4/1細(xì)胞
EBTr (NBL-4)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep3B細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細(xì)胞、HHL5細(xì)胞
BGC823細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM12SM細(xì)胞、Hep G2/C3A細(xì)胞、MLMA細(xì)胞
hTERT-HME-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-EBNA細(xì)胞、HGF-1細(xì)胞、KOPN-8細(xì)胞
H209細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HN6細(xì)胞、SKHEP1細(xì)胞、SPCA1細(xì)胞
MGH-U1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML2細(xì)胞、IM-9細(xì)胞、GM02219C細(xì)胞
As-PC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-435-S細(xì)胞、U373細(xì)胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞
ARH-77 Cell:人漿細(xì)胞白血病細(xì)胞系
HO-8910細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2081細(xì)胞、LA-795細(xì)胞、SUM159PT細(xì)胞
Jurkat-FHCRC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNK-1細(xì)胞、SKLMS1細(xì)胞、H-508細(xì)胞
BEAS-2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA-1細(xì)胞、143TK-細(xì)胞、HCC0078細(xì)胞
HOS (TE85)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4-IIE-C3細(xì)胞、HT-1080細(xì)胞、PANC-08-13細(xì)胞
T-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR22-Rv1細(xì)胞、32D clone3細(xì)胞、SBC-5細(xì)胞
NCIH740細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：95C細(xì)胞、NCI-H3255細(xì)胞、CCC-HHM-2細(xì)胞
PL5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PSN-1細(xì)胞、JM-Jurkat細(xì)胞、SK-N-FI細(xì)胞
PA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Becker細(xì)胞、NUGC-2細(xì)胞、NCIH1819細(xì)胞
RBMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：mRTEC細(xì)胞、Hs 729細(xì)胞、Ramos(RA1)細(xì)胞
KYSE 450細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Med 283細(xì)胞、WM239細(xì)胞、SNU354細(xì)胞
SUM 102PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H660細(xì)胞、BC-009細(xì)胞、SK-LU-1細(xì)胞
AtT20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U138MG細(xì)胞、Emory University-3細(xì)胞、RT112細(xì)胞
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