"Kasumi-6 Cell:急性髓系細胞白血病細胞系
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
細胞生長:懸浮
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
FHs74 Int細胞系相關產(chǎn)品:HRC-99細胞、Med 283細胞、LO2細胞
CAL-62細胞系相關產(chǎn)品:mRMEC細胞、KYSE180細胞、HS766T細胞
C4-2 B細胞系相關產(chǎn)品:AR41P細胞、EB-3細胞、Panc-813細胞
MC3T3-E細胞系相關產(chǎn)品:SK-RC-42細胞、LNCaP細胞、FLC7細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
Kasumi-6 Cell:急性髓系細胞白血病細胞系
細胞消化過程總結:其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:每周2-3次。
為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代?體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性,也就是說當一個細胞被其他細胞包圍的時候,它就會停止生長,及時傳代后,細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染;試劑保存不當;比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細胞濃度;讓細胞逐漸適應新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補加谷酷肢或生長因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內用完;分離培養(yǎng)物,檢測支原體。冷凍管應如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺操作細胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預防冷凍管爆裂。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
B4G12細胞系相關產(chǎn)品:MUM2B細胞、PCI:SG231細胞、Hs-578Bst細胞
MG63細胞系相關產(chǎn)品:SW 1271細胞、VP 229細胞、SW 13細胞
C33A細胞系相關產(chǎn)品:NCIH1770細胞、HCC2157細胞、Chinese Hamster Ovary細胞
LK2細胞系相關產(chǎn)品:H3396細胞、PaTu 8988 S細胞、PC-3M 2B4細胞
MV-522細胞系相關產(chǎn)品:SUM 102細胞、451-LU細胞、Caki2細胞
細胞生長特性:懸浮生長
Kasumi-6 Cell:急性髓系細胞白血病細胞系
細胞凍存復蘇材料與方法步驟:常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時要注意以下幾點:(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個月充氮一次。液氮溫度達-196℃,使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結構,中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時,要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導,使液氮直達瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或專用細胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或專用冷凍塑料管中,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內;置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細胞形態(tài)特性:成髓細胞
Madison 109細胞系相關產(chǎn)品:NCI-BL2141細胞、SK RC 52細胞、H510細胞
GC-2spd(ts)細胞系相關產(chǎn)品:Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞、TMD8細胞、SKNBE-1細胞
L1210細胞系相關產(chǎn)品:HCA-7細胞、SVG p12細胞、TE9細胞
B104 [Rat neuroblastoma]細胞系相關產(chǎn)品:C57/B6-L細胞、HHL5細胞、C166細胞
T/G HA VSMC細胞系相關產(chǎn)品:10T1/2細胞、AsPC-1細胞、HARAB細胞
L428細胞系相關產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 2650細胞、MCF-7/AdrR細胞、H82細胞
C4-2 Bone metastatic細胞系相關產(chǎn)品:H-82細胞、SW-527細胞、NBL-7細胞
Kasumi-6 Cell:急性髓系細胞白血病細胞系
KYSE0030細胞系相關產(chǎn)品:hOMF細胞、P31/Fujioka細胞、Human Epithelioma-2細胞
H-378細胞系相關產(chǎn)品:SW839細胞、NCI-H87細胞、Alpha Mouse Liver 12細胞
GB1細胞系相關產(chǎn)品:COLO 680N細胞、HL1細胞、rUCMSCs細胞
293EBNA細胞系相關產(chǎn)品:GM-3573細胞、A375-MEL細胞、Hs-281-T細胞
PLA802細胞系相關產(chǎn)品:CaES-17細胞、HS-5細胞、CCD-19Lu細胞
Karpas 422細胞系相關產(chǎn)品:WC00059細胞、NS-1細胞、TC7細胞
Bac12F5細胞系相關產(chǎn)品:RERF-LCMS細胞、WEHI 164細胞、H-28細胞
KS-SLK細胞系相關產(chǎn)品:SNU-668細胞、Mink Lung細胞、Nthy-ori 3-1細胞
WIL2S細胞系相關產(chǎn)品:TGW細胞、HOC細胞、SF-539細胞
L-cells細胞系相關產(chǎn)品:UPCI-SCC-090細胞、HCT 116細胞、Hopkins-92細胞
JIMT-1細胞系相關產(chǎn)品:TFK1細胞、H-1568細胞、BJA-B細胞
NCIH2347細胞系相關產(chǎn)品:SW-48細胞、MFE296細胞、KOPN8細胞
NCIH1915細胞系相關產(chǎn)品:SW260細胞、293細胞、MDA 435細胞
WIL2S細胞系相關產(chǎn)品:TGW細胞、HOC細胞、SF-539細胞
Walker/LLC-WRC 256細胞系相關產(chǎn)品:GM05384細胞、Panc8.13細胞、HCT 8細胞
U-373-MG細胞系相關產(chǎn)品:MC 3T3-E1細胞、WSU-DLCL-2細胞、PANC0327細胞
RK13細胞系相關產(chǎn)品:CCLP1細胞、AMJ2C8細胞、H-2444細胞
MOLP2細胞系相關產(chǎn)品:MDA231細胞、Panc2.03細胞、PTK1細胞
EOC20細胞系相關產(chǎn)品:COV-434細胞、AgC11x3A細胞、Madin-Darby Canine Kidney細胞
CHO細胞系相關產(chǎn)品:MT-2細胞、EVSAT細胞、HECCL-1細胞
TC-1 [Mouse lung]細胞系相關產(chǎn)品:Hs 274細胞、HuH-28細胞、NCIH2023細胞
Hepatoma-22細胞系相關產(chǎn)品:NCI.H522細胞、Colo320細胞、B-104細胞
A-427細胞系相關產(chǎn)品:D407細胞、Centre Antoine Lacassagne-62細胞、SL-1細胞
MDAPCa-2b細胞系相關產(chǎn)品:TOV-112D細胞、U-373MG細胞、HS-683細胞
U-226AR1細胞系相關產(chǎn)品:H-1417細胞、U-937細胞、WML2細胞
HCC2218細胞系相關產(chǎn)品:Hs 819.T細胞、rHSC-99細胞、HCC-78細胞
SBC3細胞系相關產(chǎn)品:L-M[TK-]細胞、RPE1細胞、WERI Rb-1細胞
U118-MG細胞系相關產(chǎn)品:SV-HUC細胞、brain-derived Endothelial cells.3細胞、GH 3細胞
CCRF/CEM細胞系相關產(chǎn)品:M-1細胞、PL 5細胞、DHBE細胞
Kasumi-1細胞系相關產(chǎn)品:NCIH1623細胞、HL-60 Clone 15細胞、NCI-H1155細胞
Farage細胞系相關產(chǎn)品:NRK clone 52E細胞、NTera2/D1細胞、H-1522細胞
MJ細胞系相關產(chǎn)品:RN細胞、NCI-SNU-119細胞、Jurkat-FHCRC細胞
RT4-D6-P2T細胞系相關產(chǎn)品:CAKI.1細胞、H-2196細胞、AR-42J細胞
Anip 973細胞系相關產(chǎn)品:OE21細胞、CCD-966SK細胞、Co 115細胞
Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞系相關產(chǎn)品:QGY7701細胞、CNE-2細胞、PK (15)細胞
H-1694細胞系相關產(chǎn)品:HEL 92.1.7細胞、526-mel細胞、SKMEL-2細胞
HEK293E細胞系相關產(chǎn)品:RPMI-7951細胞、H920細胞、Tn-5B1-4細胞
HEL 299細胞系相關產(chǎn)品:H2085細胞、MM.1S細胞、L-5178-Y細胞
LU-65M細胞系相關產(chǎn)品:OE19細胞、LL/2細胞、NCIH1436細胞
NCIH2591細胞系相關產(chǎn)品:KS-SLK細胞、Mouse Colon 38細胞、Meat Animal Research Center-145細胞
DMS 53細胞系相關產(chǎn)品:CCRF-CEM C7細胞、VB細胞、Eca 109細胞
RSC-364細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H-128細胞、KMBC細胞、MES-SA細胞
RMG-1細胞系相關產(chǎn)品:V79-GalK1細胞、LOU-NH-91細胞、OSC-19細胞
Kasumi-6 Cell:急性髓系細胞白血病細胞系
Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞系相關產(chǎn)品:Hs822T細胞、SNU-449細胞、U266 B1細胞
RenCa細胞系相關產(chǎn)品:NIE 115細胞、SVOG細胞、MT-2細胞
DB細胞系相關產(chǎn)品:RGB細胞、NBL-3細胞、HEL299細胞
SK-MEL24細胞系相關產(chǎn)品:IGROV 1細胞、EFM192B細胞、COLO-1細胞
Hs 739.T細胞系相關產(chǎn)品:U138-MG細胞、HUVSMC細胞、OVCA 432細胞
AML-12細胞系相關產(chǎn)品:HEL 299細胞、H1672細胞、CEF細胞
H-2444細胞系相關產(chǎn)品:CAL85-1細胞、PA-1細胞、NCI-H1341細胞
COLO-320DM細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H510A細胞、L-cell細胞、PK-15細胞
ME1細胞系相關產(chǎn)品:TE9細胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細胞、NCI-H2228細胞
Human Embryo Lung-1細胞系相關產(chǎn)品:H-1437細胞、SKNBE(1)細胞、TKB-1細胞
ME 180細胞系相關產(chǎn)品:RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞、RD 2細胞、IR 983F細胞
IEC 18細胞系相關產(chǎn)品:H865細胞、DMS273細胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞
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關鍵字: Kasumi-6 Cell:急性髓系細胞白血病細胞系
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