"KG-1 Cell:急性髓系細胞白血病細胞系
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
細胞生長:懸浮
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
118 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNE3細胞、LK-2細胞、B16/F10細胞
HBL100細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLB985細胞、Mel RM細胞、SU-DHL-10細胞
RH-35細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2452細胞、Psi2-DAP細胞、H498細胞
10RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCM1A細胞、TKB-1細胞、CEM-T4細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
KG-1 Cell:急性髓系細胞白血病細胞系
細胞消化過程總結(jié):其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:3傳代,2-3天傳一代
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢!
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
TOV-21G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H22-H8D8細胞、H865細胞、SNU-251細胞
PSN-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJ1細胞、NB-19細胞、293E細胞
MLTC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV3細胞、HemECs細胞、SK N SH細胞
KU-812F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:E304細胞、LAN-6細胞、BpRc1細胞
NCI-H727細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-ALL 1細胞、NCI-H1993細胞、KG-1細胞
細胞生長特性:懸浮生長
KG-1 Cell:急性髓系細胞白血病細胞系
貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。
細胞形態(tài)特性:原粒細胞
Strain V細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NeHepLxHT細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞、SUDHL6細胞
PC3-M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 611.T細胞、H-647細胞、HO-8910細胞
NCIH2141細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Large Cell Lung Cancer-103H細胞、BJAB-1細胞、MESSA-DX5細胞
OCI-Ly8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRTL5細胞、LCMS細胞、NCI-H69細胞
MV4-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBTr (NBL-4)細胞、AC16 [Human hybrid]細胞、SKLU01細胞
MeT 5A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1783細胞、IPI-2I細胞、Panc 02.03細胞
RPMI1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE50細胞、RSC-96細胞、HASMC細胞
KG-1 Cell:急性髓系細胞白血病細胞系
NCI-H647細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCCLM6細胞、SPC-A-1細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞
T-24細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-ML2細胞、Walker 256細胞、BL-6細胞
ARO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:2PK3細胞、MOLM-14細胞、A375.S2細胞
SK-MEL-MeWo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SP2-0-Ag14細胞、Ly8細胞、NEC細胞
UMR106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGW-nu細胞、Panc203細胞、Mouse INsulinoma 6細胞
MHCC-LM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-28I2細胞、JROECL19細胞、Hs934T細胞
NCI-H2085細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-6細胞、H-7721細胞、HT55細胞
SF-763細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF SB細胞、RH8994細胞、L cell line細胞
GM00346B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ReNcell CX細胞、RCC10 RGB細胞、TR-146細胞
GM00346B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ReNcell CX細胞、RCC10 RGB細胞、TR-146細胞
BT549細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC1-A細胞、U343MG細胞、DMS79細胞
SK_N_FI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMUC1細胞、SUDHL4細胞、HMC-1細胞
WEHI3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs294T細胞、RPMI-7951細胞、SGC7901/DDP細胞
CEM clone 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NKM-1細胞、BTI-TN5B1-4細胞、SW-620細胞
MDA436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMR106細胞、HCE-T細胞、Anip 973細胞
NCI-H2122細胞系相關(guān)產(chǎn)品:R1610細胞、U-CH1細胞、HFL1細胞
KU-812細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC14細胞、2008細胞、NKT細胞
RWPE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C 643細胞、SF-539細胞、NT2D1細胞
HFL 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIA Paca2細胞、Panc 04.03細胞、HCC-1937細胞
Kit225 K6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:2780細胞、PA12細胞、NCI-H508細胞
SK-ES-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CD18/HPAF細胞、GCT細胞、N87細胞
OLN-93細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SRA 01/04細胞、C3H/10T1/2細胞、NS1/1-Ag4.1細胞
OKT3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TNC-1B12B4細胞、Experimental Mammary Tumour-6細胞、343 MG細胞
Ca759細胞系相關(guān)產(chǎn)品:130T細胞、C3H10T1/2CL8細胞、OAC-P4C細胞
D 407細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT 15細胞、293 HEK細胞、ECC12細胞
HuPT4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-38細胞、Loucy細胞、SJSA1細胞
NB-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-HUT-125細胞、HCC-1438細胞、HT clone H9細胞
HME1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC 116細胞、LNCaP clone FGC細胞、NCIH1666細胞
SCLC21H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCM-1A細胞、Balb/c3T3細胞、MDA-MB-231 #4175細胞
SW-480細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H78細胞、MSB-1細胞、BALL-1細胞
SK-N-BE(2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2023細胞、NEC8細胞、CALU 1細胞
HCC-202細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT4細胞、NB1-RGB細胞、ND7/23細胞
NCIH196細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YES 2細胞、AZ521細胞、ZR75-1細胞
MC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUIT2細胞、PTK-2細胞、CAL-85-1細胞
CTLA4 Ig-24細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-1-sq細胞、LC-2/ad細胞、253JB-V細胞
SU 86.86細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UWB1.289細胞、HEK-293 c18細胞、Hs840_T細胞
NCI-H2052細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 180細胞、H22細胞、16HBE140細胞
HemECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Beta-TC-6細胞、H-1184細胞、COS-7細胞
TALL-104細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mino細胞、LTEP-sm 1細胞、HEK-293-EBNA細胞
SUNE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM06141B細胞、NCIH1930細胞、NCIH446細胞
A-2058細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-2-OS細胞、MC-3T3細胞、PK15細胞
R1800[RA]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM-192A細胞、NCI H716細胞、NCI-SNU-398細胞
McCoy B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU16細胞、NCIH1373細胞、BEL-7405細胞
KG-1 Cell:急性髓系細胞白血病細胞系
OsA-CL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE11細胞、TE6細胞、NRK 52E細胞
RCC 786-O細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IM95細胞、NCI-H1869細胞、T-84細胞
SJRH30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMEL細胞、SKOV3細胞、WEHI 164 TC細胞
COR-L23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CF Pac1細胞、J774A1細胞、NFS 60細胞
KMM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMS1598細胞、SACCLM細胞、Hs-578T細胞
C 643細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPC-TW 01細胞、HTh74細胞、MDA-453細胞
HuLEC-5a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AG06814-M細胞、OCI-AML-5細胞、NBLAN5T細胞
RC92A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1648細胞、CCC-HEH-2細胞、HUT 125細胞
CNE1-LUC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE3A細胞、C643細胞、H-889細胞
AMC-HN-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL7405細胞、HMSC細胞、SKMES-1細胞
HK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 10細胞、2E8細胞、H-4-II-E細胞
RL95-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone 166細胞、KYSE 450細胞、RKOE6細胞
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