"Pfeiffer Cell:人彌漫性大細(xì)胞淋巴瘤B淋巴細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)：淋巴母細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：懸浮
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
SKCol1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AtT 20細(xì)胞、NCIH250細(xì)胞、OVCAR-8/ADR細(xì)胞
MPC 11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KLE細(xì)胞、H1105細(xì)胞、SEG-1細(xì)胞
CMT.64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv.1.Lu細(xì)胞、NCI-H2135細(xì)胞、Mel-RM細(xì)胞
143TK-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE(2)C細(xì)胞、SK Hep1細(xì)胞、WRL-68細(xì)胞
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
Pfeiffer Cell:人彌漫性大細(xì)胞淋巴瘤B淋巴細(xì)胞系
細(xì)胞傳代時消化的問題：可以這樣說，對于需要消化傳代的細(xì)胞，每一次的消化都是對這個細(xì)胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細(xì)胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細(xì)胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細(xì)胞消化同樣的時間對細(xì)胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進(jìn)行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細(xì)胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對比觀察看誰長的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細(xì)胞間隙明顯，細(xì)胞獨(dú)立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實(shí)際情況你自己把握）。這是第四步。其實(shí)還可以有第五步，對于特別難消化的細(xì)胞和對胰酶特別敏感的細(xì)胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對細(xì)胞的損傷降到最低，保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了，如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實(shí)驗(yàn)中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細(xì)胞時把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細(xì)胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實(shí)驗(yàn)的開展。將細(xì)胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對細(xì)胞的損傷之外，還有一個更重要的作用就是，可以程度地把細(xì)胞吹打成單個單個的狀態(tài)，不成片不連體。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴(yán)格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散；３)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細(xì)胞密度達(dá)到８０%以后重復(fù)１項(xiàng)操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細(xì)胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化，請將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
KPL-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1417細(xì)胞、SW626細(xì)胞、BMDC細(xì)胞
ssMCF-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-C1細(xì)胞、NCI.H522細(xì)胞、AZ 521細(xì)胞
NCIH446細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Medical University of Graz-Chordoma 1細(xì)胞、Ketr3細(xì)胞、HRA 19細(xì)胞
SP2/0 Ag-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cloudman S91 melanoma細(xì)胞、KTA7細(xì)胞、Psi-2-DAP細(xì)胞
Pa18C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-766T細(xì)胞、BSC40細(xì)胞、NCI-441細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：懸浮生長
Pfeiffer Cell:人彌漫性大細(xì)胞淋巴瘤B淋巴細(xì)胞系
貼壁細(xì)胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細(xì)胞施加胰酶選擇，因?yàn)榭偸琴N壁不牢的細(xì)胞先脫落，對腫瘤細(xì)胞來說，這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對于較難消化的細(xì)胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點(diǎn)，直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積１/１０v。消化到有細(xì)胞脫落。不過有人說EDTA對細(xì)胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細(xì)胞！
細(xì)胞形態(tài)特性：淋巴母細(xì)胞樣
HPDEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO_320DM細(xì)胞、Jurkat Clone E6-1細(xì)胞、HRGEC細(xì)胞
TCam 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-320-HSR細(xì)胞、OCI-Ly 7細(xì)胞、LNT-229細(xì)胞
NCIH1092細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC-JF細(xì)胞、D283細(xì)胞、SK-OV-433細(xì)胞
MGH-U1 (EJ)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis lung carcinoma line 1細(xì)胞、HBL-100細(xì)胞、H1436細(xì)胞
Hs 888.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SPDC-CCL141細(xì)胞、LC-MS細(xì)胞、TCC-PAN2細(xì)胞
Detroit562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NALM-6細(xì)胞、OE-33細(xì)胞、UCD-MLA-144細(xì)胞
H-292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI164細(xì)胞、PC3M細(xì)胞、NCI-H-128細(xì)胞
Pfeiffer Cell:人彌漫性大細(xì)胞淋巴瘤B淋巴細(xì)胞系
EU-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FUOV1細(xì)胞、ZYM-DIEC02細(xì)胞、HEK-293F細(xì)胞
CNE2Z細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LOU-NH-91細(xì)胞、COS-1細(xì)胞、CNE細(xì)胞
BT325細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGY細(xì)胞、J82細(xì)胞、HuH7細(xì)胞
Tb 1-Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL-HCC細(xì)胞、NCIH1688細(xì)胞、GM07404D細(xì)胞
Tb1.Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CPA47細(xì)胞、H-1869細(xì)胞、L363細(xì)胞
CAL 51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bac 1.2F5細(xì)胞、Hs27細(xì)胞、L540細(xì)胞
OVCAR3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BLO-11細(xì)胞、SNB.19細(xì)胞、NCI-H711細(xì)胞
MOLT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H660細(xì)胞、P3 (Jiyoye)細(xì)胞、293 c18細(xì)胞
SPCA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep-G2細(xì)胞、DHL-5細(xì)胞、CCD 966 SK細(xì)胞
SPCA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep-G2細(xì)胞、DHL-5細(xì)胞、CCD 966 SK細(xì)胞
CWR22-Rv1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag8-6-5-3細(xì)胞、Hs822T細(xì)胞、Panc203細(xì)胞
OCI-Ly18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC9724細(xì)胞、C-643細(xì)胞、LoVo細(xì)胞
MCAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM15452細(xì)胞、293T細(xì)胞、McA-RH 7777細(xì)胞
Michigan Cancer Foundation-12A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-12細(xì)胞、HSC/mHSC細(xì)胞、CAL27細(xì)胞
PTK 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 699細(xì)胞、NS1-Ag4/1細(xì)胞、hCMEC/D3細(xì)胞
EFM192A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63-Ag8-653細(xì)胞、HSC（Human Schwann）細(xì)胞、SU-DHL-8細(xì)胞
293 Ad5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MO59J細(xì)胞、639V細(xì)胞、NCIADR.RES細(xì)胞
H-524細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SRA01/04細(xì)胞、FC33細(xì)胞、Rat Glomerular Endothelial細(xì)胞
KLN 205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-175細(xì)胞、COLO357細(xì)胞、Hep3B細(xì)胞
U-87MG ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJ [Human fibroblast]細(xì)胞、SW 1222細(xì)胞、HT-1376細(xì)胞
HCC2157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR-32細(xì)胞、Panc10.05細(xì)胞、OV433細(xì)胞
CAL-120細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ishikawa細(xì)胞、RAT2細(xì)胞、MBT-2細(xì)胞
MDA PCa 2b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO357細(xì)胞、NCI-H78細(xì)胞、HCT/FU細(xì)胞
Madin-Darby Bovine Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H/10T1/2細(xì)胞、WM 239-A細(xì)胞、U-266 AR1細(xì)胞
H-727細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293A細(xì)胞、U251細(xì)胞、PK-13細(xì)胞
H-35 Reuber細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 394細(xì)胞、SHSY5Y細(xì)胞、HCC1569細(xì)胞
MF2059細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM266mel細(xì)胞、HBL 100細(xì)胞、SU.86細(xì)胞
GB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DLD-1細(xì)胞、RPVSMC細(xì)胞、MOLT3細(xì)胞
MES-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OSK-1細(xì)胞、CTLL(2)細(xì)胞、Calu3細(xì)胞
U-87 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAC細(xì)胞、L-6TG細(xì)胞、ST 486細(xì)胞
TE5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MN-9D細(xì)胞、NCI-H2066細(xì)胞、TE-5細(xì)胞
OVCAR-433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-435 S細(xì)胞、BC3H1細(xì)胞、Hs578Bst細(xì)胞
WM 2664細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-9細(xì)胞、SK-MEL24細(xì)胞、MV411細(xì)胞
BHK 21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-1細(xì)胞、LLC細(xì)胞、HUVEC細(xì)胞
NIH3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGH-U1細(xì)胞、266 Bl細(xì)胞、TE-4細(xì)胞
NCI-H838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT-RPE-1細(xì)胞、R1610細(xì)胞、Okayama University Medical School-23細(xì)胞
SUM 159細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C8-D1A細(xì)胞、IALM細(xì)胞、NCI-H2066細(xì)胞
X63Ag8-653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCMEC(BL12-H)細(xì)胞、HCCLM3細(xì)胞、GNM細(xì)胞
SW 1116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM239A細(xì)胞、PF382細(xì)胞、MCF-12A細(xì)胞
Homo sapiens No. 578, tumor cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS852.T細(xì)胞、NCI-H146細(xì)胞、Giant Cell Tumor細(xì)胞
Hs695細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB4細(xì)胞、C-33-A細(xì)胞、M109細(xì)胞
Blotchy fibroblast-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mevo細(xì)胞、OCI-AML-3細(xì)胞、UMC11細(xì)胞
CCD-112 CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：266 Bl細(xì)胞、H211細(xì)胞、Panc-02細(xì)胞
Pfeiffer Cell:人彌漫性大細(xì)胞淋巴瘤B淋巴細(xì)胞系
H-1781細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RD-2細(xì)胞、CHG-5細(xì)胞、HSC4細(xì)胞
Baby Hamster Kidney from litter No. 21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI-4B細(xì)胞、KATO III細(xì)胞、GFP-Olig2細(xì)胞
C-4 I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細(xì)胞、THP-1(ATCC)細(xì)胞、CCRF/CEM細(xì)胞
HEK-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTPA細(xì)胞、VAESBJ細(xì)胞、NCIH747細(xì)胞
118MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP-B1細(xì)胞、Detroit 562細(xì)胞、LM1細(xì)胞
LC-MS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1963細(xì)胞、SNU601細(xì)胞、NCI-H2170細(xì)胞
CCRF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EC9706細(xì)胞、SP2/0 Ag-14細(xì)胞、EA hy 926細(xì)胞
TCC Sup細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 695.T細(xì)胞、OCI-Ly01細(xì)胞、OCILY10細(xì)胞
DU 4475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WRL68細(xì)胞、32D.cl3細(xì)胞、K562/ADR細(xì)胞
TB-1 Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat細(xì)胞、b.End3細(xì)胞、D341MD細(xì)胞
Mo7e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2196細(xì)胞、CAKI 2細(xì)胞、NCI-H510細(xì)胞
U-CH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL33細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞、CCRF/CEM/0細(xì)胞
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