"GM00637 Cell:人皮膚成纖維細胞系
細胞形態(tài):成纖維細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
AU-Mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKO-AS45-1細胞、B 95-8細胞、NCI-157細胞
alphaTC1 Clone 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF.CEM細胞、HBE135-E6E7細胞、ZR-75-1細胞
NCC-IT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2198細胞、MGHU1細胞、SUP-T1細胞
Jurkat77細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCEC細胞、P3.times.63 Ag8.653細胞、H766T細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
GM00637 Cell:人皮膚成纖維細胞系
細胞消化過程總結(jié):其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學(xué)那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散;3)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復(fù)1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化,請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
M1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VM-CUB-1細胞、COLO-320細胞、MDA-MB-435S細胞
C26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS123細胞、TNC-1B12B4細胞、H9c2細胞
Hx147細胞系相關(guān)產(chǎn)品:343 MG細胞、BJAB細胞、COLO 394細胞
NFS 60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO細胞、NCI-SNU-761細胞、Malme3M細胞
HCC-1833細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞、Panc 5.04細胞、HOCF細胞
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
GM00637 Cell:人皮膚成纖維細胞系
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細胞先脫落,對腫瘤細胞來說,這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細胞!
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
Hs445細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC-39細胞、CAL85-1細胞、CEM-C1細胞
MDA435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC-3細胞、MFE280細胞、JEG3細胞
NCIH209細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-N-5細胞、Capan 1細胞、VE細胞
MMAc.SF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PIEC細胞、NCIH2452細胞、CDC/EU.HMEC-1細胞
MC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUIT2細胞、PTK-2細胞、CAL-85-1細胞
EJ 138細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IEC18細胞、MV(4;11)細胞、MSCs(mUCMSCs)細胞
Rainbow Trout Embryo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SupB15W細胞、BOWES細胞、TOG細胞
GM00637 Cell:人皮膚成纖維細胞系
MT-2J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNAS細胞、FUOV1細胞、293/EBNA細胞
H-1793細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC-10細胞、Swiss 3T6細胞、SCC-25細胞
SKNEP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-138MG細胞、U14細胞、BIC1細胞
SW480細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAEpiC細胞、SK-LMS-1細胞、TK-1細胞
IOSE29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C32r細胞、SCC7細胞、CORL26細胞
P31/Fujioka細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B958細胞、SK BR 03細胞、D562細胞
BOWES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T 24細胞、MDA 435細胞、3T3-A31細胞
HGE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs343T細胞、ECGI10細胞、A-2058細胞
C3H/10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JIMT-1細胞、SF763細胞、RTMC細胞
C3H/10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JIMT-1細胞、SF763細胞、RTMC細胞
Tokyo Medical and Dental university 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEK細胞、HB 611細胞、FLC-7細胞
HAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Baby Hamster Kidney 21細胞、A-72細胞、DU4475細胞
HMEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Strain V細胞、HEK 293A細胞、H1184細胞
RCF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HA細胞、Malme-3 M細胞、MRASMC細胞
H-1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品:143BTK-細胞、LN 229細胞、hADSCs細胞
SW 579細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ATN-1細胞、WM 115細胞、EPC細胞
CEMC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DK-MG細胞、H9c2 (2-1)細胞、MDCK.2細胞
NCL-H548細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLM13細胞、HH [Human lymphoma]細胞、BEAS 2B細胞
H-2330細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Soleus clone 8細胞、RL-952細胞、HEK293FT細胞
SP2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD1095Sk細胞、SW 13細胞、HPB-ALL細胞
CEM-CCRF (CAMR)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-358細胞、SKM-1細胞、Epstein-Barr-3細胞
CCRF-CEM C7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:1301細胞、Colon 26細胞、Alexander細胞
SG231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K7M2細胞、32Dc3細胞、MRMT-1細胞
KP-N-RT-BM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-116細胞、190PT細胞、VERO C 1008細胞
LCLC-103H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mouse Forestomach Carcinoma細胞、RPMI 7666細胞、PA-TU-8988S細胞
293-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3M-IE8細胞、JIII細胞、C8161細胞
Ramos 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBE 135-E6/E7細胞、SK-N-BE-2c細胞、Sc-1細胞
Panc 02.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞、VK2/E6E7細胞、CCD-841CoN細胞
GL-261細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-746T細胞、NCI-H1623細胞、CCLP-1細胞
Hs 895 T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CP-70細胞、THP-1細胞、MLTC-1細胞
SUDHL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-M (TK-)細胞、SV-HUC細胞、NCTC929細胞
MSB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI3細胞、MC57細胞、NBL-5細胞
DanG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:207細胞、TGW細胞、T2(174 x CEM.T2)細胞
Panc8.13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM04680細胞、Nb2a細胞、NCIH660細胞
JF305細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT115細胞、HT22細胞、HTh74細胞
HUT-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-815細胞、Hut292細胞、NMCG1細胞
HDSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEPsm細胞、MHH-CALL-2細胞、Kit 225-K6細胞
HANK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJAB-1細胞、HCT/FU細胞、SUP-B1細胞
OLN-93細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SRA 01/04細胞、C3H/10T1/2細胞、NS1/1-Ag4.1細胞
SKNEP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-138MG細胞、U14細胞、BIC1細胞
SKNEP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-138MG細胞、U14細胞、BIC1細胞
Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs729T細胞、BMU-S1細胞、Rca-B細胞
HSC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT125細胞、HEC251細胞、NKM-1細胞
GM00637 Cell:人皮膚成纖維細胞系
BT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 19細胞、SHP-77細胞、SCC25細胞
HCC941122細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1963細胞、Blotchy fibroblast-11細胞、H-1793細胞
HPAF/CD18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUS-M1細胞、PANC 813細胞、BSC-40細胞
SK N SH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCC MSB1細胞、Hopkins-92細胞、H-1341細胞
EFM-192A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H524細胞、Anip 973細胞、Mv1Lu細胞
746T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG-HOS (Cl#5)細胞、PC3M-2B4細胞、VM-CUB1細胞
Helacyton gartleri細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCGC細胞、VP229細胞、RBL.2H3細胞
U266細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV-4-11細胞、H1993細胞、AZ-521細胞
MOVAS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM159PT細胞、KHYG細胞、M-O7e細胞
SW-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B35細胞、RH35細胞、MCF-7B細胞
MPC 11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLE細胞、H1105細胞、SEG-1細胞
MEF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OKAC1細胞、SK Col 1細胞、MCF-12A細胞
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