"CNLMG-B5537SKIN Cell:人成纖維細胞系
細胞形態(tài):成纖維細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:成纖維細胞
H-1819細胞系相關(guān)產(chǎn)品:5637細胞、SKNDZ細胞、OCI-Ly3細胞
ES-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML-2細胞、GMK,BSC-1細胞、TOV-112細胞
PANC0203細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-BR3細胞、SNU423細胞、HeLa 229細胞
R1610細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H510細胞、Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞、HUT 28細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
CNLMG-B5537SKIN Cell:人成纖維細胞系
細胞消化過程總結(jié):其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學(xué)那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導(dǎo)致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復(fù)蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
CORL88細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1819細胞、Vx2細胞、MESSA/Dx5細胞
NBL-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU 812F細胞、M14細胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞
KTCTL-140細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C518細胞、COLO 684細胞、H-1954細胞
Huh-7.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293-H細胞、NCI-H510細胞、MA104細胞
X63-Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LU451細胞、H-196細胞、SHIN3細胞
細胞生長特性:貼壁
CNLMG-B5537SKIN Cell:人成纖維細胞系
正確的細胞復(fù)蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
Panc-10.05細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA432_Bast細胞、GP2-293細胞、Rat1細胞
U-266 AR1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DI TNC1細胞、SU86.86細胞、H1819細胞
COLO 684細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-620細胞、AtT-20細胞、SKMEL2細胞
GM3569細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3.NS-1/1.Ag4.1細胞、MDA-MB361細胞、KNS-81細胞
WM 115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FU-OV-1細胞、N-2a細胞、BT325細胞
hTERT-HPNE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-8/ADR細胞、LUDLU1細胞、Lewis lung carcinoma細胞
HOS (TE85, Clone F5)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JurkatE6-1細胞、HGE細胞、OCI-Ly03細胞
CNLMG-B5537SKIN Cell:人成纖維細胞系
Rh30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 115細胞、Ramos.G6.C10細胞、JM-Jurkat細胞
SUDHL10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CV-1 in Origin Simian-7細胞、B16 BL6細胞、SW1271細胞
D-324MED細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF 539細胞、A-875細胞、OE-33細胞
HPDEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO_320DM細胞、Jurkat Clone E6-1細胞、HRGEC細胞
HCCC9810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 840.T細胞、MEL細胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞
MRC 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE2-C細胞、PE CA PJ34細胞、RC-4B細胞
HFT 8810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-85-1細胞、MPC 11細胞、HEC-151細胞
U-118 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DH82細胞、NTHY-ORI3.1細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞
Rat podocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 239-A細胞、HCC2185細胞、CHL-1細胞
Rat podocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 239-A細胞、HCC2185細胞、CHL-1細胞
CCD-841CoTr細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fao細胞、NuTu 19細胞、UPCI-SCC-090細胞
SKNBE(1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERI-Rb 1細胞、HCC-1588細胞、NBL_S細胞
T-HSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-119細胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細胞、ROS17/2.8細胞
B35細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-3細胞、NCI-H1688細胞、MeT-5A細胞
L-02細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4IIE細胞、H-2330細胞、ECC 12細胞
Z138細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H520細胞、HeLa 229細胞、KATOIII細胞
RMS1598細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1355細胞、T2細胞、Ramos 1細胞
OLN93細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Medical Research Council cell strain-5細胞、Panc 02.03細胞、SCC 15細胞
HCT/FU細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 27細胞、Panc-1-P細胞、HUVSMC細胞
KG-1a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HVSMC細胞、ROS17/28細胞、QG-56細胞
HET1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L279細胞、Mv 1 Lu細胞、HAVSMC細胞
Hs 578Bst細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1171細胞、Tu686細胞、J82細胞
MC26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-274-T細胞、TW 01細胞、HC-11細胞
EFM-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMES細胞、RD-ES細胞、HT-115細胞
CEK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEAS 2B細胞、HS 445T細胞、Calu-1細胞
CL-34細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA134細胞、IOSE-29細胞、Hep 3B細胞
PANC0327細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3 L1細胞、EU-2細胞、Granta-519細胞
KLE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Chinese Hamster Ovary細胞、T-CAM2細胞、Madison lung細胞
HEK-293-EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:32Dcl3細胞、Bac 1.2F5細胞、BALB/3T3 clone A31細胞
HRA-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H441細胞、aTC1-6細胞、HL 60細胞
LU451細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J82 COT細胞、NCI-H1238細胞、MRC 5細胞
LoVo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 270細胞、SNU878細胞、NCI-H1105細胞
MDA-MB-175VII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2108細胞、SF767細胞、BNL-HCC細胞
Y3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCCLM3細胞、DiFi細胞、DHL8細胞
C3H/10T1/2-clone8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSF細胞、SW-962細胞、NSC-34細胞
SUDHL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LP-1細胞、SK-N-BE-2細胞、8226細胞
L5178Y TK+/-3.7.2c細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293S細胞、A375mel細胞、H4IIEC3細胞
TN5B14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV4;11細胞、SKES-1細胞、F56 [Human neoplasm]細胞
MOLT 16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:R.K.13細胞、HANK1細胞、NS20-Y細胞
MDA 231-LM2-4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞、Ca761細胞、H719細胞
C-33-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PVEC細胞、293c18細胞、NCI-H2107細胞
CCD 1112SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-432細胞、OV1-P細胞、H-1650細胞
HCGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC3H-1細胞、PG-BE1細胞、OCUM-1細胞
CNLMG-B5537SKIN Cell:人成纖維細胞系
RSC-364細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H-128細胞、KMBC細胞、MES-SA細胞
GH 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLCL9B10細胞、SP-2/0-AG14細胞、SU-DHL2細胞
HRGEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-18細胞、HTR8svn細胞、RERF-LCMS細胞
Hs 766T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRVEC細胞、MDA MB 436細胞、WM-266-4細胞
CMT167細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS1/1-Ag4.1細胞、LIM-1215細胞、MC/CAR細胞
BL2141細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL148細胞、MOVAS-1細胞、PL 45細胞
BNL 1ME A.7R.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2218細胞、SW 1573細胞、COLO 684細胞
KS-SLK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-668細胞、Mink Lung細胞、Nthy-ori 3-1細胞
Hs 852.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IR 983F細胞、HS852.T細胞、NTC-200細胞
HT 1197細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RFL 6細胞、HEK293-FT細胞、IALM細胞
JCA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTC-200細胞、H-1975細胞、Fox/NY細胞
SK RC 20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV1-P細胞、HT-29/CX-1細胞、CCD18Co細胞
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