"SUSM-1 Cell:人肺成纖維細胞系
細胞形態(tài):成纖維細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:成纖維細胞;男性
OSRC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GL261細胞、Hep 3B2.1-7細胞、CA-OV-3細胞
NCIH2172細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCA-205細胞、KY-50細胞、HBMEC細胞
ARH-77細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RFL-6細胞、NCI-N87細胞、HEK/EBNA細胞
NCIH2126細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM05862細胞、H1954細胞、HS-766T細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
SUSM-1 Cell:人肺成纖維細胞系
細胞培養(yǎng)過程中相關(guān)問題總結(jié):懸浮性細胞應(yīng)如何繼代處理?一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高,直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶,加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當濃度,重復前述步驟即可。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300xg(約1,000rpm),5-10分鐘,過高之轉(zhuǎn)速,將造成細胞死亡;細胞之接種密度為何?依照細胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長之一重要原因;細胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何?動物細胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原來細胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意:由于DMSO稀釋時會放出大量熱能,故不可將DMSO直接加入細胞液中,必須使用前先行配制完成;DMSO之等級和無菌過濾之方式為何?冷凍保存使用之DMSO等級,必須為Tissue culture grade之DMSO,其本身即為無菌狀況,次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中,保存于4°C,避免反復冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì),并可減少污染之機會。若要過濾DMSO,則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜;冷凍保存細胞之方法?冷凍保存方法一:冷凍管置于4°C 30~60分鐘→ (-20°C 30分鐘)→-80°C 16~18小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-20°C不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些;細胞欲冷凍保存時,細胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細胞濃度?冷凍管內(nèi)細胞數(shù)目一般為1x10(6)cells/ml vial,融合瘤細胞則以5x10(6)cells/ml vial為宜;應(yīng)如何避免細胞污染?細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術(shù)不當、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法;如果細胞發(fā)生微生物污染時,應(yīng)如何處理?直接滅菌后丟棄之。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細胞后,應(yīng)該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應(yīng),造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HCC-94細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPE D407細胞、8226/S細胞、H2081細胞
PF-382細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT-102細胞、Hs888 Lu細胞、SNU-398細胞
H-1650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-SF 21細胞、DAKIKI Clone 1細胞、U 266細胞
Vero-E6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-513細胞、KMH-2細胞、PSN1細胞
LCLC103H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO-S細胞、OAC-P4C細胞、MDA-MB-134細胞
細胞生長特性:貼壁
SUSM-1 Cell:人肺成纖維細胞系
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結(jié)1:復蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y(jié)2:首先應(yīng)該懷疑凍存,實際上復蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
H1694細胞系相關(guān)產(chǎn)品:beta TC6細胞、TE671細胞、CCRF/CEM/0細胞
RS(4;11)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞、MUTZ1細胞、THLE2細胞
MSF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2227細胞、U87-MG細胞、Panc 10.05細胞
B78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI6666細胞、SW-1783細胞、ASH3細胞
HEK 293 c18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBEpiC細胞、OVCAR 420細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞
C4-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-024細胞、NCI-H1693細胞、MDAMB453細胞
TF1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB1-RGB細胞、SHEP1細胞、BetaTC6細胞
SUSM-1 Cell:人肺成纖維細胞系
FO [Mouse myeloma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P31/Fujioka細胞、Colo16細胞、MHH-CALL-2細胞
HIC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hA549細胞、GP2d細胞、SF 763細胞
ECV304細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H82細胞、3T3L1細胞、GOS-3細胞
NCI-H596細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK supertube細胞、Vero C1008細胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細胞
SW1353細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GP293細胞、L5178Y細胞、CAL-51細胞
Hs895T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 7951細胞、SK-N-AS細胞、MOLP2細胞
PNT1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPE-1細胞、HCCLM6細胞、HLEC-SRA 01/04細胞
BIC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB/c 3T3 clone A31細胞、SW-756細胞、ONS76細胞
NK-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WPMY1細胞、CAL-62細胞、MDA-MB-361細胞
NK-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WPMY1細胞、CAL-62細胞、MDA-MB-361細胞
CORL23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DoTc2細胞、Madin Darby Bovine Kidney細胞、RF/6A細胞
SUM-52細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AG 9細胞、B16/F0細胞、HCC 2185細胞
KYSE-270細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCA 38細胞、NCI-H2108細胞、GM02132C細胞
IFRS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-423細胞、GM06141細胞、TE13細胞
HS578細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAMA-1細胞、SCCVII/St細胞、MT-3 [Human leukocytes]細胞
HeLa-229細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293T/17細胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞、SP2/0 Ag-14細胞
BC-009細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-7細胞、L-540細胞、Pt-K1細胞
NCI-H2347細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KATO III細胞、32D/cl3細胞、KAT-5細胞
Hs852細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FDCP1細胞、OCI-AML4細胞、PC-3M細胞
MLMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-266細胞、GDM-1細胞、HuT-78細胞
TKB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Embryo Lung-1細胞、AMC-HN-8細胞、KYSE270細胞
MDA-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS(TE85)細胞、MNNG/HOS Clone F-5細胞、OC 316細胞
U-87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC-WRC 256細胞、TE-12細胞、McArdle RH-7777細胞
SNU-C2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-435細胞、H-82細胞、HuLEC-5a細胞
BC-3H-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H766T細胞、BALB/3T3 (clone A31)細胞、MCA 205細胞
Ball 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM-H2細胞、HMEC1細胞、GM03569B細胞
NCIH1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT26細胞、KYSE50細胞、MOVAS細胞
HEK-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos 2G6.4C10細胞、OCI-Ly19細胞、NPA'87細胞
WM-451Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞、H-1666細胞、LN-18細胞
RKO_AS45細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCL-H548細胞、X63-Ag8.653細胞、Saos2細胞
NK10a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuTu 80細胞、UMUC14細胞、SN12PM6細胞
BE(2)-M17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-774細胞、A2780細胞、beta-TC6細胞
Hi-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1438細胞、SNU-C2A細胞、As-PC1細胞
TM4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UC-3細胞、CWR22R-V1細胞、TE-11細胞
FU-OV-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH526細胞、MDA-MB-231-GFP細胞、U-CH1細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RINm-5F細胞、3T3-Swiss albino細胞、EBC1細胞
H-220細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cor L51細胞、SV-HUC-1細胞、PK 15細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIBEpiC細胞、HRA19細胞、P3 NS1 Ag4/1細胞
PIGI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GTL 16細胞、HS-683細胞、Y3細胞
AM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFLS-RA細胞、GLC-15細胞、HO1N1細胞
PLC PRF 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RLE-6TN細胞、U-2932細胞、DMS-53細胞
Michigan Cancer Foundation-10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ST486細胞、VP303細胞、3T3-J2細胞
RD-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 675.T細胞、MDA453細胞、MES-13細胞
SUSM-1 Cell:人肺成纖維細胞系
143BTK-細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H9細胞、NCIH1770細胞、HCEC細胞
NK-92MI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SLMT1細胞、SUPB-15細胞、NCI-SNU-407細胞
LTEP-sm細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H146細胞、293/EBNA細胞、HFL-I細胞
KYSE-50細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs604T細胞、Calu 3細胞、SW 620細胞
130 T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2106細胞、3396細胞、MDAMB231細胞
293 Ad5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MO59J細胞、639V細胞、NCIADR.RES細胞
CMECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1573細胞、JHH2細胞、mREC細胞
QGP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB 3T3 clone A31細胞、HSC-1細胞、JB6 Cl 30細胞
MGH-U1 (EJ)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lewis lung carcinoma line 1細胞、HBL-100細胞、H1436細胞
HPDLF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2935細胞、MLO-Y4細胞、J774 A.1細胞
PLC-PRF-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH345細胞、DU 4475細胞、207細胞
KASUMI1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:9L細胞、Daoy細胞、3T3-A31細胞
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