"WML2 Cell:小鼠肺成纖維細胞系
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：肺；成纖維細胞
Hs888T細胞系相關產(chǎn)品：C4 I細胞、LPC-H12細胞、GOS3細胞
NCI-HUT-69細胞系相關產(chǎn)品：SKUT1細胞、Karpas 299細胞、H596細胞
Hepa1-6細胞系相關產(chǎn)品：Dx5細胞、CATH-a細胞、SAS細胞
B16/BL6細胞系相關產(chǎn)品：ketr 3細胞、Huh-7.5細胞、RWPE2細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
WML2 Cell:小鼠肺成纖維細胞系
細胞傳代時消化的問題：可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況你自己把握）。這是第四步。其實還可以有第五步，對于特別難消化的細胞和對胰酶特別敏感的細胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對細胞的損傷降到最低，保證細胞的狀態(tài)能夠。當然了，如果細胞是屬于那種很容易消化的細胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實驗中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細胞時把各步消化的細胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實驗的開展。將細胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對細胞的損傷之外，還有一個更重要的作用就是，可以程度地把細胞吹打成單個單個的狀態(tài)，不成片不連體。
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
如何進行細胞復蘇：１)從液氮容器中取出凍存管，直接浸入３７℃溫水中，并不時搖動令其盡快融化；２)從３７℃水浴中取出凍存管，打開蓋子，用吸管吸出細胞懸液，加到離心管并滴加１０倍以上培養(yǎng)液，混勻；３)離心，１０００rpm，５min；４)棄去上清液，加入含１０%小牛血清培養(yǎng)液重懸細胞，計數(shù)，調(diào)整細胞密度，接種培養(yǎng)瓶，３７℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)；５)次日更換一次培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)?！緶剀疤嵝选浚?從增殖期到形成致密的單層細胞以前的培養(yǎng)細胞都可以用于凍存，但為對數(shù)生長期細胞。在凍存前一天換一次培養(yǎng)液；２)將凍存管放入液氮容器或從中取出時，要做好防護工作(戴棉手套)，以免凍傷；３)凍存和復蘇用新配制的培養(yǎng)液。細胞復蘇的時候，有些初次實驗員將凍存管從液氮中取出后，放在室溫下，經(jīng)常發(fā)生凍存管爆炸，該怎么避免出現(xiàn)這種情況嗎？其中在擰緊凍存管的時候是否有哪些細節(jié)要注意的？一般常用的方法是取出凍存管后在超凈工作臺中用酒精棉球擦試管口，再稍擰松蓋子，再放３７度水浴鍋中搖溶，在將細胞轉移到裝有３７度預熱過的培養(yǎng)基的試管中，迅速離心，再用培養(yǎng)基洗一遍。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
SU86.86細胞系相關產(chǎn)品：NT2D1細胞、BIC細胞、H-1435細胞
ssMCF7細胞系相關產(chǎn)品：Mc Coy細胞、NCI-H2106細胞、BEL/FU細胞
TE-85 clone 5細胞系相關產(chǎn)品：TE6細胞、MRC-5細胞、FT-293細胞
ME16C細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H250細胞、Hs-611-T細胞、3T3J2細胞
KM-H2細胞系相關產(chǎn)品：HMC-1細胞、CaSki細胞、KP-2細胞
細胞生長特性：貼壁
WML2 Cell:小鼠肺成纖維細胞系
細胞培養(yǎng)無菌操作步驟和注意事項：１.打開無菌工作臺及凈化室的紫外燈，消毒半小時以上。２.進入凈化室前先關閉紫外燈，打開超凈臺風機，等待３０min以上，以排盡臭氧。３.穿好隔離衣，戴好口罩，帽子。４.風淋２分鐘。５.０.１%水泡手，擦干。６.點燃酒精燈;超凈臺內(nèi)應避免放入過多的物品;使用的吸管，滴管，試管，培養(yǎng)瓶等均事先滅菌。７.打開各類瓶蓋前先過火，以固定灰塵;打開的瓶口、試管口過火焰，鑷子使用前應經(jīng)火焰燒灼。８.水平式風機的超凈臺，應使瓶口斜置，應盡量避免瓶口敞開直立。９.同一根吸管或滴管不應連續(xù)用于幾個不同的細胞系；吸取培養(yǎng)基的吸管應離開培養(yǎng)瓶或試管口０.５cm，避免伸入培養(yǎng)瓶口或試管口；以防止細胞系的互相混雜污染。１０.漏在培養(yǎng)瓶上或臺上的液體，立即用酒精棉球擦凈。１１.操作完畢后恢復工作臺面。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
OCM-1細胞系相關產(chǎn)品：BV-173細胞、GM03320D細胞、Mv1.Lu細胞
ESC-410細胞系相關產(chǎn)品：HOS-143B細胞、FOXNY細胞、HANK-1細胞
LS-513細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1792細胞、OCIAML4細胞、brain-derived Endothelial cells.3細胞
HCC-2218細胞系相關產(chǎn)品：WRL 68細胞、SCC4細胞、RT-BM 1細胞
3T3F442A細胞系相關產(chǎn)品：Microbiological Associates-104細胞、JB-6 Cl 30細胞、NWA細胞
8402細胞系相關產(chǎn)品：VMCUB1細胞、BMDC細胞、WM 2664細胞
WC00097細胞系相關產(chǎn)品：HCC0202細胞、MFE-296細胞、SEM細胞
WML2 Cell:小鼠肺成纖維細胞系
UACC 893細胞系相關產(chǎn)品：M2-10B4細胞、RT-BM-1細胞、293S細胞
U 138 MG細胞系相關產(chǎn)品：A375-MEL細胞、R-1059-D細胞、32D-Cl3細胞
H1651細胞系相關產(chǎn)品：OVSAHO細胞、LC-2-Ad細胞、SkChA1細胞
PC3細胞系相關產(chǎn)品：MDCK-2細胞、NCI-H1770細胞、NUGC3細胞
MV4;11細胞系相關產(chǎn)品：Transformed Human Liver Epithelial-2細胞、LICR-HN6細胞、PA1細胞
LK 2細胞系相關產(chǎn)品：MZ-CRC-1細胞、LADMAC細胞、J774 A1細胞
DITNC1細胞系相關產(chǎn)品：GES-1細胞、LU165細胞、HEK-AD293細胞
KGN細胞系相關產(chǎn)品：SO-RB50細胞、HS688AT細胞、SKCO1細胞
NKM-1細胞系相關產(chǎn)品：ZYM-SVEC01細胞、SCL-1細胞、Roswell Park Memorial Institute 1788細胞
184A1細胞系相關產(chǎn)品：Hep 3B2_1-7細胞、BALB/c 3T3 clone A31細胞、RK13細胞
AN3CA細胞系相關產(chǎn)品：MB 157細胞、C6661細胞、Rat podocyte細胞
KG-1細胞系相關產(chǎn)品：SPC-A1細胞、Hs 895.T細胞、AMJ2-C8細胞
U343MG細胞系相關產(chǎn)品：JM-Jurkat細胞、RPMI 1788細胞、U87-MG細胞
OCI-Ly07細胞系相關產(chǎn)品：MDA-175細胞、Nthy-ori 3-1細胞、U118MG細胞
TE-32細胞系相關產(chǎn)品：P3-Jiyoye細胞、hTERT-RPE細胞、EVSAT細胞
PC 12細胞系相關產(chǎn)品：RPMI-2650細胞、RPMI 6666細胞、SKN-SH細胞
HFL 1細胞系相關產(chǎn)品：MIA Paca2細胞、Panc 04.03細胞、HCC-1937細胞
343MG細胞系相關產(chǎn)品：Fox/NY細胞、ECC-12細胞、BCP-1細胞
FAO-1細胞系相關產(chǎn)品：LS 174 T細胞、CORL23細胞、NCI-H2330細胞
Hut292細胞系相關產(chǎn)品：H650細胞、GM3569細胞、H-841細胞
GM00346B細胞系相關產(chǎn)品：ReNcell CX細胞、RCC10 RGB細胞、TR-146細胞
A-101D細胞系相關產(chǎn)品：OCI/AML-3細胞、FRTL-5 Cl 2細胞、TE-15細胞
Emory University-3細胞系相關產(chǎn)品：NCI747細胞、CHP100細胞、Capan-2細胞
HeLa細胞系相關產(chǎn)品：Panc2_03細胞、SK-N-SH細胞、PC-9S1細胞
HCC1143細胞系相關產(chǎn)品：Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞、NL-20細胞、MDCK-II細胞
PC-9/S1細胞系相關產(chǎn)品：SU86-86細胞、H-498細胞、D407細胞
U-251MG細胞系相關產(chǎn)品：SW1116細胞、EC-GI-10細胞、P 3 HR 1細胞
Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞系相關產(chǎn)品：L 540細胞、RMC細胞、P3-X63-Ag8-653細胞
HCC1833細胞系相關產(chǎn)品：HBL-100細胞、NGEC細胞、HUT-125細胞
AG06814-M細胞系相關產(chǎn)品：J774 A.1細胞、SNU-761細胞、Walker/LLC-WRC256細胞
SW756細胞系相關產(chǎn)品：UCLA-SO-M14細胞、7860細胞、CAL120細胞
766T細胞系相關產(chǎn)品：EnCa1細胞、ABC-1細胞、RS4-11細胞
NHDF細胞系相關產(chǎn)品：CAL 33細胞、UCLA-SO-M21細胞、D341 Med細胞
ABC1細胞系相關產(chǎn)品：Hs-852-T細胞、Sci-1細胞、R1800[RA]細胞
RS 4;11細胞系相關產(chǎn)品：MPC5細胞、H-1404細胞、D-341 Med細胞
GM02131細胞系相關產(chǎn)品：NCTC-3960細胞、Rat Fetal Lung-6細胞、LICR-HN6細胞
Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞系相關產(chǎn)品：L 540細胞、RMC細胞、P3-X63-Ag8-653細胞
GL261細胞系相關產(chǎn)品：GM02131細胞、SK-N-MC細胞、HuH-1細胞
P3J.HR1K細胞系相關產(chǎn)品：H-510A細胞、B16BL6細胞、SUSM1細胞
MV411細胞系相關產(chǎn)品：SCC7細胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞、PFSK細胞
Hx-147細胞系相關產(chǎn)品：PLB 985細胞、MES-23.5細胞、PG-4細胞
D10.G4.1細胞系相關產(chǎn)品：CHP-126細胞、QGY-7703細胞、MDA-MB157細胞
TE-32細胞系相關產(chǎn)品：P3-Jiyoye細胞、hTERT-RPE細胞、EVSAT細胞
WML2 Cell:小鼠肺成纖維細胞系
Earles's cells細胞系相關產(chǎn)品：BC3 H1細胞、OCI-LY-8細胞、NCI-SNU-C2B細胞
SupB15WT細胞系相關產(chǎn)品：H-1944細胞、IGROV 1細胞、ME 180細胞
MDA-361細胞系相關產(chǎn)品：MCF7-CTRL細胞、C-28/I2細胞、MFE-280細胞
HRMC細胞系相關產(chǎn)品：Institute for Medical Research-90細胞、3T3-Swiss細胞、Hs852T細胞
TE5細胞系相關產(chǎn)品：MN-9D細胞、NCI-H2066細胞、TE-5細胞
PLC PRF 5細胞系相關產(chǎn)品：RLE-6TN細胞、U-2932細胞、DMS-53細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞系相關產(chǎn)品：Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞、Okayama University Medical School-23細胞、FHL124細胞
AU 565細胞系相關產(chǎn)品：Det 562細胞、OCM1細胞、WC00097細胞
Tb1Lu細胞系相關產(chǎn)品：J-774細胞、SUM-52細胞、BE(2)C細胞
U266 B1細胞系相關產(chǎn)品：NCIH727細胞、NHA細胞、H920細胞
COLO 680N細胞系相關產(chǎn)品：SVG(P12)細胞、J45.01細胞、5637細胞
KBM-7細胞系相關產(chǎn)品：KY-50細胞、NCI-H2126細胞、WM266mel細胞
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關鍵字： WML2 Cell:小鼠肺成纖維細胞系
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