"NCI-H1993 epithelioid cells人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過(guò)程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問(wèn)題：凍存液的配置已是常識(shí)，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對(duì)細(xì)胞不是完全無(wú)毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會(huì)造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。４.離心問(wèn)題：目前主要有兩種見(jiàn)解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè)，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對(duì)一般人來(lái)說(shuō)，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過(guò)了活細(xì)胞會(huì)受壓過(guò)大，死亡。此外在操作過(guò)程中容易污染，所以不推薦。另一種說(shuō)法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無(wú)異常。５.細(xì)胞貼壁少的問(wèn)題：教科書(shū)中說(shuō)明凍存細(xì)胞解凍時(shí)１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問(wèn)題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過(guò)多，細(xì)胞濃度過(guò)低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問(wèn)題：這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問(wèn)題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會(huì)比較大，就會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)，從以前的資料來(lái)看，DMSO的濃度在小于０.５%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒(méi)有什么影響，還有一個(gè)說(shuō)法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無(wú)害濃度。
M-NFS-60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACC-2細(xì)胞、EOL1細(xì)胞、Caco-2 BBe細(xì)胞
LY-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EJ1細(xì)胞、A498細(xì)胞、Colon-26細(xì)胞
J-111細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero 76 clone E6細(xì)胞、LAD2細(xì)胞、HT-22細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
NCI-H1993 epithelioid cells人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前，細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來(lái)凍存細(xì)胞。對(duì)于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對(duì)于無(wú)血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細(xì)胞條件無(wú)血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無(wú)血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)BSA的新鮮無(wú)血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存：計(jì)數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細(xì)胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無(wú)血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開(kāi)始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過(guò)可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存：使用分離試劑從基層分離細(xì)胞，分離時(shí)盡可能溫和，使對(duì)細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細(xì)胞，確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細(xì)胞/ml密度，在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開(kāi)始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過(guò)可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細(xì)胞傳代方法：１：２—１：６傳代
3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Me-Wo細(xì)胞、WERIRb1細(xì)胞、Line 207細(xì)胞
KBM-7/Hap8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEP3B2細(xì)胞、GCT0404細(xì)胞、4T1-A細(xì)胞
P3/NS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3LL細(xì)胞、SUM-102PT細(xì)胞、IPLB-Sf21細(xì)胞
L 132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 8226細(xì)胞、MES-13細(xì)胞、H1694細(xì)胞
WERIRb1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Clone 15 HL-60細(xì)胞、HCC0070細(xì)胞、Ly18細(xì)胞
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
NCI-H1993 epithelioid cells人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會(huì)把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動(dòng)作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時(shí)間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時(shí)候是傳代的原因；３)有時(shí)間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線，不會(huì)臨時(shí)要處理，手足無(wú)措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時(shí)間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時(shí)間，也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對(duì)待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無(wú)菌操作，多噴噴酒精，要是對(duì)滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測(cè)；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤里的水也會(huì)很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開(kāi)的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺(tái)是用完就開(kāi)；６)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
PLCPRF5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL-II細(xì)胞、QBC939細(xì)胞、L929(NCTC)細(xì)胞
BCPAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCCIT細(xì)胞、X63-AG 8.653細(xì)胞、COLO-357細(xì)胞
C166細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細(xì)胞、NCI-SNU-601細(xì)胞、NCI-H847細(xì)胞
CCRF-CEM C7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：1301細(xì)胞、Colon 26細(xì)胞、Alexander細(xì)胞
NCIH661細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YTMLC-90細(xì)胞、H1618細(xì)胞、HUVEC-C[HUVEC]細(xì)胞
NCIH716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03573A細(xì)胞、3D4/21細(xì)胞、AMJ2C8細(xì)胞
KMY1022細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY-19細(xì)胞、CT26.CL25細(xì)胞、HCC0095細(xì)胞
LN229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 870.T細(xì)胞、H647ell細(xì)胞、Swiss3T3細(xì)胞
Immortal Pig Intestinal-2I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO Lec1細(xì)胞、LM TK negative細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-27細(xì)胞
H-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1648細(xì)胞、NALM6細(xì)胞、H4IIE細(xì)胞
NCI-H1993 epithelioid cells人肺癌細(xì)胞系
SW948細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL1-5細(xì)胞、Ramos 2G6.4C10細(xì)胞、Hs895T細(xì)胞
JB6 clone 30, subclone 7b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6 Cl 30細(xì)胞、RS4;11細(xì)胞、RC92A細(xì)胞
KP 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Saos2細(xì)胞、D341Med細(xì)胞、CCD 19Lu細(xì)胞
SAS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA-10-Clone-4細(xì)胞、NPA細(xì)胞、H-650細(xì)胞
NCIH810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2126細(xì)胞、NFHIOSE-29細(xì)胞、LS513細(xì)胞
NCIH2126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05862細(xì)胞、H1954細(xì)胞、HS-766T細(xì)胞
NCIH2126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05862細(xì)胞、H1954細(xì)胞、HS-766T細(xì)胞
MS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1522細(xì)胞、MS-751細(xì)胞、YES-2細(xì)胞
WSU-DLCL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UWB1.289+BRCA1細(xì)胞、MuM-2C細(xì)胞、H.Ep.-2細(xì)胞
MA-782細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NKT細(xì)胞、AR41P細(xì)胞、UCLA SO M14細(xì)胞
QGY-7703細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FLC7細(xì)胞、PFSK1細(xì)胞、MDCK2細(xì)胞
H-1954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV 1063細(xì)胞、ZR75_1細(xì)胞、C-Lu65細(xì)胞
Y3-Ag123細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4-1細(xì)胞、SK RC 20細(xì)胞、Hep-G2/C3A細(xì)胞
BALB/3T3 clone A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO-ori細(xì)胞、RC-2細(xì)胞、LS-174細(xì)胞
Bac12F5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RERF-LCMS細(xì)胞、WEHI 164細(xì)胞、H-28細(xì)胞
NRK clone 52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PBL細(xì)胞、ARO81細(xì)胞、NIH:OVCAR-5細(xì)胞
LED-WiDr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVOG細(xì)胞、H1404細(xì)胞、ARO-81細(xì)胞
RWPE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細(xì)胞、DMS 153細(xì)胞、SCLC21H細(xì)胞
NCIN87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1876細(xì)胞、NCIH841細(xì)胞、NCI-H2405細(xì)胞
NT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T1-73細(xì)胞、C 643細(xì)胞、NFHIOSE-80細(xì)胞
NCIH128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞、EBTr (NBL-4)細(xì)胞、G361mel細(xì)胞
C33A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1770細(xì)胞、HCC2157細(xì)胞、Chinese Hamster Ovary細(xì)胞
OVCAR.4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF/CEM細(xì)胞、BeWo細(xì)胞、MDCC MSB1細(xì)胞
SCC 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JTC-39細(xì)胞、RSC96細(xì)胞、Z-138細(xì)胞
RAG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFTF細(xì)胞、OSRC2細(xì)胞、CD18細(xì)胞
FHs 74 Int細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KPL1細(xì)胞、H-510細(xì)胞、HEC-251細(xì)胞
B-CPAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MuM-2C細(xì)胞、SW 527細(xì)胞、KYSE 30細(xì)胞
OVCAR-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE10細(xì)胞、SW1417細(xì)胞、LN-382細(xì)胞
KM933細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Psi-2 DAP細(xì)胞、SK-Mel1細(xì)胞、BT549細(xì)胞
3T3 L1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NL20SV細(xì)胞、IEC6細(xì)胞、NALM 6細(xì)胞
Hs852T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA NPA871細(xì)胞、NCI-H1573細(xì)胞、KTA-7細(xì)胞
BA/F3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DSL-6A-C1細(xì)胞、HEP-3B2細(xì)胞、MDA-MB468細(xì)胞
HUTU80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-LMS-1細(xì)胞、IPECJ2細(xì)胞、PCI-SG231細(xì)胞
CCD18Co細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLE B-3細(xì)胞、NCI-H1385細(xì)胞、HBL 100細(xì)胞
NUGC2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 1細(xì)胞、GM05887A細(xì)胞、P3/X63/Ag8.653細(xì)胞
HSF2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ssMCF-7細(xì)胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞、NCI-H2196細(xì)胞
L-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L02細(xì)胞、ATN-1細(xì)胞、HOS-143B細(xì)胞
HBE135-E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERIRb1細(xì)胞、NFS 60細(xì)胞、GalK1細(xì)胞
DoTc2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 688(A).T細(xì)胞、FU-OV-1細(xì)胞、MV4:11細(xì)胞
Hep G2-Luc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-5細(xì)胞、A673細(xì)胞、Ls-174-T細(xì)胞
C41細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-A細(xì)胞、C2A細(xì)胞、EMT6細(xì)胞
SK MEL 28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fetal Human Colon細(xì)胞、NP69細(xì)胞、HREC細(xì)胞
NCI.H522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-4 (S+L-)細(xì)胞、GM03573A細(xì)胞、NS1-1 Ag4.1細(xì)胞
Wistar Institute, Susan Hayflick細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-EBNA1細(xì)胞、RPMI-1846細(xì)胞、JROECL 21細(xì)胞
HCa/16A3-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHEP1細(xì)胞、CCK-81細(xì)胞、RA.1細(xì)胞
FET細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTLL-2細(xì)胞、N-Tera-2細(xì)胞、H-1563細(xì)胞
EOC 20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(1)n細(xì)胞、HRMC細(xì)胞、CORL23細(xì)胞
M-O7e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCE-T細(xì)胞、EFO27細(xì)胞、NCIH548細(xì)胞
JKT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hi-5細(xì)胞、PC3M-1E8細(xì)胞、CAL 120細(xì)胞
MT-3 [Human leukocytes]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PAMC82細(xì)胞、Hs 729T細(xì)胞、RPMI 8226/S細(xì)胞
SCCVII/St細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-327細(xì)胞、LNCaP-ATCC細(xì)胞、LS 180細(xì)胞
NCI-H1993 epithelioid cells人肺癌細(xì)胞系
SK-GT-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：6-10B細(xì)胞、H1963細(xì)胞、M2-10B4細(xì)胞
KYSE30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF7/WT細(xì)胞、GA-10 clone 4細(xì)胞、JB6 Cl 30-7b細(xì)胞
NCL-H548細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM13細(xì)胞、MDA-MB-435S細(xì)胞、GH 3細(xì)胞
C166細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細(xì)胞、N1E-115細(xì)胞、Malme3M細(xì)胞
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