"NCI-H1563 epithelioid cells人胚肺細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng):1.取細(xì)胞的過(guò)程中注意帶好防凍手套,護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要,細(xì)胞凍存管可能漏入液氮,解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升,可導(dǎo)致爆炸。2.凍存液的問(wèn)題:凍存液的配置已是常識(shí),在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對(duì)細(xì)胞不是完全無(wú)毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢,會(huì)造成細(xì)胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。4.離心問(wèn)題:目前主要有兩種見(jiàn)解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng),第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè),去除DMSO,去除死細(xì)胞,這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程,但對(duì)一般人來(lái)說(shuō),把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間,轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少,細(xì)胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過(guò)了活細(xì)胞會(huì)受壓過(guò)大,死亡。此外在操作過(guò)程中容易污染,所以不推薦。另一種說(shuō)法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇,結(jié)果無(wú)異常。5.細(xì)胞貼壁少的問(wèn)題:教科書(shū)中說(shuō)明凍存細(xì)胞解凍時(shí)1ml細(xì)胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。6.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問(wèn)題:試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇1管細(xì)胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過(guò)多,細(xì)胞濃度過(guò)低,不利于細(xì)胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問(wèn)題:這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問(wèn)題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會(huì)比較大,就會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng),從以前的資料來(lái)看,DMSO的濃度在小于0.5%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒(méi)有什么影響,還有一個(gè)說(shuō)法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無(wú)害濃度。 32Dc3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-M(TK-)細(xì)胞、BMSCs(mBMSCs)細(xì)胞、BE(2)M-17細(xì)胞 C6661細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLP-8細(xì)胞、THLE-3細(xì)胞、NS1細(xì)胞 LED-WiDr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVOG細(xì)胞、H1404細(xì)胞、ARO-81細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 NCI-H1563 epithelioid cells人胚肺細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 為了防止因污染或技術(shù)原因使長(zhǎng)期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細(xì)胞因傳代而遲早會(huì)出現(xiàn)變異,有時(shí)因寄贈(zèng)、交換和購(gòu)買(mǎi),培養(yǎng)細(xì)胞從一個(gè)實(shí)驗(yàn)室轉(zhuǎn)運(yùn)到另一個(gè)實(shí)驗(yàn)室,的策略是進(jìn)行低溫保存。這對(duì)于維持一些特殊細(xì)胞株的遺傳特性極為重要?,F(xiàn)簡(jiǎn)要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點(diǎn)。細(xì)胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時(shí),細(xì)胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止?fàn)顟B(tài),故可以長(zhǎng)期保存。細(xì)胞低溫保存的關(guān)鍵,在于通過(guò)0~20℃階段的處理過(guò)程。在此溫度范圍內(nèi),水晶呈針狀,極易招致細(xì)胞的嚴(yán)重?fù)p傷。凍存細(xì)胞的復(fù)蘇:凍存細(xì)胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細(xì)胞要快速融化,并直接加入完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中。若細(xì)胞對(duì)凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細(xì)胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基鋪板細(xì)胞。1ml凍存細(xì)胞使用10~20ml完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基。進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù),細(xì)胞接種應(yīng)該至少在3×10(5)活細(xì)胞/ml;培養(yǎng)細(xì)胞12到24小時(shí),更換新鮮的完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細(xì)胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細(xì)胞加入到大約25ml完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細(xì)胞,并且進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)。細(xì)胞鋪板,細(xì)胞接種應(yīng)該至少為3×10(5)活細(xì)胞/ml。細(xì)胞的分化:一個(gè)成年人全身細(xì)胞總數(shù)約1012個(gè),可以區(qū)分為200多種不同類型的細(xì)胞:形態(tài)結(jié)構(gòu),代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細(xì)胞均來(lái)自一個(gè)受精卵細(xì)胞。所以,通常把發(fā)育過(guò)程中,細(xì)胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過(guò)程稱為細(xì)胞分化。細(xì)胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細(xì)胞的產(chǎn)生和分化,這個(gè)過(guò)程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長(zhǎng)不斷分裂的細(xì)胞,轉(zhuǎn)入分化,通常從細(xì)胞周期中G1期開(kāi)始時(shí)一個(gè)確定的點(diǎn)G0點(diǎn)“逃逸”出細(xì)胞周期。旺盛生長(zhǎng)分裂的細(xì)胞和各種分化了的細(xì)胞,它們的基因表達(dá)和代謝活動(dòng)各不相同。 細(xì)胞傳代方法:1:3-1:4傳代;每周換液2次。 PANC 203細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE4細(xì)胞、WEHI-3細(xì)胞、L-WRN細(xì)胞 RGE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 683.T細(xì)胞、L615細(xì)胞、NOZC-1細(xì)胞 GalK 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞、HEB細(xì)胞、WiDr細(xì)胞 Ramos 2G6.4C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NSI/1-Ag4-1細(xì)胞、Hx147細(xì)胞、no.11細(xì)胞 J774.A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS114細(xì)胞、UMR 106細(xì)胞、RGC-6細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 NCI-H1563 epithelioid cells人胚肺細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng) 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū) 培養(yǎng)細(xì)胞真的不難,最關(guān)鍵幾點(diǎn):1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的,真的很難相信你會(huì)把細(xì)胞養(yǎng)壞;2)動(dòng)作要快,胰酶消化,換液什么,細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時(shí)間,所謂的細(xì)胞狀態(tài)差,很多時(shí)候是傳代的原因;3)有時(shí)間的話,需要細(xì)胞計(jì)數(shù),傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線,不會(huì)臨時(shí)要處理,手足無(wú)措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時(shí)間,傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行,可以節(jié)省很多時(shí)間,也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn);5)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人,避免相互干擾。每天對(duì)待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?1)嚴(yán)格無(wú)菌操作,多噴噴酒精,要是對(duì)滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準(zhǔn)備一套;3)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測(cè);4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤(pán)里的水也會(huì)很臟,勤換(滅菌水加進(jìn)去);5)晚上離開(kāi)的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外,超凈臺(tái)是用完就開(kāi);6)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。 HuH-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCCAR細(xì)胞、Hs934T細(xì)胞、Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞 L 132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 8226細(xì)胞、MES-13細(xì)胞、H1694細(xì)胞 K562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM52細(xì)胞、LWnt-3A細(xì)胞、EO771細(xì)胞 VeroE6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HANK細(xì)胞、SF 767細(xì)胞、A-20細(xì)胞 HEL 92.1.7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MA104細(xì)胞、MSTO-211 H細(xì)胞、T-24細(xì)胞 NCCIT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-929細(xì)胞、Ca Ski細(xì)胞、NPC-TW01細(xì)胞 COV434細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SRS-82細(xì)胞、NWA細(xì)胞、FL83B細(xì)胞 BIC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB/c 3T3 clone A31細(xì)胞、SW-756細(xì)胞、ONS76細(xì)胞 H2122細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR-8/SV-neo細(xì)胞、H2023細(xì)胞、RMa-bm細(xì)胞 OCI-LY-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC-251細(xì)胞、SK-ES-1細(xì)胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細(xì)胞 NCI-H1563 epithelioid cells人胚肺細(xì)胞系 MIO-M1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL12細(xì)胞、OCI/AML2細(xì)胞、ZR7530細(xì)胞 Hi5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JC細(xì)胞、SKCO1細(xì)胞、CEMx721.174.T2細(xì)胞 TMD-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-FT細(xì)胞、SKNBE-2細(xì)胞、CEM-0細(xì)胞 OE19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-10.05細(xì)胞、BT 20細(xì)胞、DH82細(xì)胞 Hs888Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 829細(xì)胞、Y79細(xì)胞、SUM52PE細(xì)胞 COLO 699細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE671/RD細(xì)胞、UCD-MLA-144細(xì)胞、ZR-75-30細(xì)胞 COLO 699細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE671/RD細(xì)胞、UCD-MLA-144細(xì)胞、ZR-75-30細(xì)胞 MLO-Y4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HELF細(xì)胞、Hs 832(C).T細(xì)胞、Jiyoye (P-2003)細(xì)胞 HPC-Y5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM02131A細(xì)胞、H1694細(xì)胞、IEC 6細(xì)胞 IHC-ST1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Be-Wo細(xì)胞、H-3255細(xì)胞、HPC-Y5細(xì)胞 NuTu-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUP-B15細(xì)胞、WI 38細(xì)胞、Tb 1-Lu細(xì)胞 JCA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTC-200細(xì)胞、H-1975細(xì)胞、Fox/NY細(xì)胞 MDA-MB-175-VII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1463細(xì)胞、KOSC2細(xì)胞、NB.4細(xì)胞 HT 29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TM4細(xì)胞、G361-mel細(xì)胞、SRA01/04 (HLE)細(xì)胞 BNL 1ME A.7R.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2218細(xì)胞、SW 1573細(xì)胞、COLO 684細(xì)胞 RM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ChaGo K-1細(xì)胞、HOP-92細(xì)胞、159PT細(xì)胞 Anip-973細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D 407細(xì)胞、HR-8348細(xì)胞、RKOE6細(xì)胞 Panc3_27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG13細(xì)胞、Hs 746.T細(xì)胞、SVG p12細(xì)胞 BT549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC1-A細(xì)胞、U343MG細(xì)胞、DMS79細(xì)胞 BT549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC1-A細(xì)胞、U343MG細(xì)胞、DMS79細(xì)胞 OCI/AML-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC94細(xì)胞、SKNFI細(xì)胞、HC11細(xì)胞 C-4I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BMF細(xì)胞、YH-13細(xì)胞、Pa18C細(xì)胞 DHL4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IALM細(xì)胞、CALU 1細(xì)胞、GDM1細(xì)胞 JROECL19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC1/Sq細(xì)胞、U118細(xì)胞、BT483細(xì)胞 BCP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63Ag8-6-5-3細(xì)胞、High-5細(xì)胞、H-810細(xì)胞 H-2291細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 4細(xì)胞、BCaP-37細(xì)胞、HeLa/DDP細(xì)胞 LTPA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH244細(xì)胞、HT-55細(xì)胞、NCIH1299細(xì)胞 OCI AML3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 839細(xì)胞、MOLP-8細(xì)胞、OVISE細(xì)胞 MDA-MB231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-126細(xì)胞、NCI-H1184細(xì)胞、TW-039細(xì)胞 U251MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3AO細(xì)胞、Cattle chondrocytes細(xì)胞、MCF10A細(xì)胞 SN12PM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO679細(xì)胞、HeLa細(xì)胞、KYSE180細(xì)胞 32D.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TKB-1細(xì)胞、Hs 636.T細(xì)胞、Capan1細(xì)胞 P388.D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKHEP1細(xì)胞、BT 549細(xì)胞、U-87MG ATCC細(xì)胞 LN-18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SLK細(xì)胞、RH30SJ細(xì)胞、WM 266-4細(xì)胞 Hs 606.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-16細(xì)胞、TM3細(xì)胞、HDSMC細(xì)胞 NK-92 MI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2291細(xì)胞、GP293細(xì)胞、BE(2)M17細(xì)胞 Vero from pool #76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TM-3細(xì)胞、DoTc2 4510細(xì)胞、HCE-2 [50.B1]細(xì)胞 SuDHL 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Evsa T細(xì)胞、H-1876細(xì)胞、WTRL1細(xì)胞 DoHH2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMRCRCZ細(xì)胞、KYSE 180細(xì)胞、H-2291細(xì)胞 LIM 1215細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87細(xì)胞、DF1細(xì)胞、H1573細(xì)胞 624細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCMEC細(xì)胞、D10.G4.1細(xì)胞、CMT 64細(xì)胞 Epstein-Barr-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHG44細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 2650細(xì)胞、NEC-8細(xì)胞 Tu686細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA-RO 81細(xì)胞、SUM102細(xì)胞、RPMI8402細(xì)胞 NRK-49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL 28細(xì)胞、SK-N-BE細(xì)胞、MCCAR細(xì)胞 B95-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE 32.T細(xì)胞、CoC1細(xì)胞、118MG細(xì)胞 KYSE-140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-453細(xì)胞、PCI-SG231細(xì)胞、BV-2細(xì)胞 HEK293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK62a細(xì)胞、Panc 4.03細(xì)胞、L-540細(xì)胞 PIEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-SH-SY5Y細(xì)胞、GC-1 spg細(xì)胞、WiDr-TC細(xì)胞 HCC0827細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-8402細(xì)胞、3 LL細(xì)胞、IBRS-2細(xì)胞 RGE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 683.T細(xì)胞、L615細(xì)胞、NOZC-1細(xì)胞 MCF 10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly01細(xì)胞、HBdSMC細(xì)胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細(xì)胞 NCI-H1563 epithelioid cells人胚肺細(xì)胞系 SUIT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:rRMECs細(xì)胞、PG-4(S+L-)細(xì)胞、CHO Lec1細(xì)胞 Human Embryo Lung-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1437細(xì)胞、NCIH526細(xì)胞、THP 1細(xì)胞 NCI-H1876細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-647細(xì)胞、NCTC clone 1469細(xì)胞、TK10細(xì)胞 K-562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GFP-Olig2細(xì)胞、KATO III細(xì)胞、Embryonic Bovine Tracheal cells細(xì)胞 "
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