"NCI-H596 epithelioid cells人肺腺鱗癌細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 正確的細胞復蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復蘇。那么,細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。 UMC11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-373-MG細胞、KRC/Y細胞、NTERA-2 cl.D1細胞 ZR75-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSB-1細胞、SF126細胞、Large Cell Lung Cancer-103H細胞 DSL6A/C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-4細胞、SW 900細胞、LK-2細胞 細胞生長:貼壁 NCI-H596 epithelioid cells人肺腺鱗癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學治療劑。 細胞傳代方法:1:4-1:8傳代;每周換液2-3次。 SKOV3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA 1386細胞、3T3-L1細胞、SW-1088細胞 Dysplastic Oral Keratinocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACC2細胞、SK-RC-42細胞、SKMEL1細胞 P3/X63/Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1666細胞、HFSF細胞、CAL-62細胞 MV4;11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Transformed Human Liver Epithelial-2細胞、LICR-HN6細胞、PA1細胞 K562細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM52細胞、LWnt-3A細胞、EO771細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 NCI-H596 epithelioid cells人肺腺鱗癌細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:上皮樣 常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。 Human Epidermoid carcinoma #2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1569細胞、NBL-4細胞、NS20Y細胞 A375-S2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 7666細胞、SU-DHL-16細胞、C8166細胞 NPC-039細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF 7B細胞、PE/CA-PJ-34細胞、Sp2/O-Ag14細胞 HConEpic細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero 76 clone E-6細胞、KP-N-RT細胞、NCIH929細胞 UCLA RO-81-A-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 EBNA細胞、Molm 13細胞、SUDHL8細胞 LTEP-s細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IEC6細胞、CCRF-CEM/S細胞、TR 146細胞 OVCAR5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-NSH細胞、C3H10T1/2 clone8細胞、H524細胞 Hs895T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 7951細胞、SK-N-AS細胞、MOLP2細胞 P3J.HR1K細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-510A細胞、B16BL6細胞、SUSM1細胞 H-2405細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lu-99A細胞、WiDr細胞、WM115F細胞 NCI-H596 epithelioid cells人肺腺鱗癌細胞系 SNU-886細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 2細胞、RBL 1細胞、MIN-6細胞 P31/Fujioka細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B958細胞、SK BR 03細胞、D562細胞 HT-55細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-474細胞、NS1/1-Ag4.1細胞、HLEB-3細胞 DH 82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549/DDP細胞、MEG01細胞、IMR 32細胞 NCI-H719細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca 9-22細胞、HLEC細胞、JG細胞 HCC-9204細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNGHOS細胞、Sp2/0-Ag-14細胞、FTC-133細胞 BMU-S1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco 2細胞、NCI-H1781細胞、SW 982細胞 CHL-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U373 MG細胞、Chang Cells細胞、HC11 Mammary Epithelium細胞 HTori-3.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL-7405細胞、TEC細胞、P3HR-1細胞 MFM223細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TMD8細胞、Hepatoma 22細胞、P3J-HR-1細胞 U-138-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-GT-2細胞、HNSC細胞、RIN-m5F細胞 NCIH2029細胞系相關(guān)產(chǎn)品:16-HBE細胞、CFPAC1細胞、Transformed Human Liver Epithelial-3細胞 WSU-DLCL(2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK細胞、V 79-4細胞、HCV 29細胞 H-2052細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM149-PT細胞、SCL II細胞、Hs 863.T細胞 HR8348細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL10細胞、LS174T細胞、DMS153細胞 OCI AML5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1693細胞、Hs-688A-T細胞、X63Ag8.653細胞 HL60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MT-3 [Human leukocytes]細胞、Farage細胞、MDA MB 436細胞 HSC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1105細胞、mIMCD-3細胞、NSH細胞 H1819細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL細胞、NCI-H446細胞、NCI-H1395細胞 786.O細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2347細胞、Caov-3細胞、NCIH1838細胞 RC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HR-1細胞、HPDE細胞、OKT3細胞 Vx-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuPT3細胞、GL-261細胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞 OLN-93細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SRA 01/04細胞、C3H/10T1/2細胞、NS1/1-Ag4.1細胞 PSN-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJ1細胞、NB-19細胞、293E細胞 NCI.H460細胞系相關(guān)產(chǎn)品:THP-1(ATCC)細胞、P3J HR-1細胞、NS-I/1細胞 SW1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JEKO細胞、MOLM-16細胞、Hs1.Tes細胞 DC 2.4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:526細胞、HFLS-OA細胞、NBL-S細胞 hTERT-RPE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs821T細胞、STTG1細胞、DR2R 1610細胞 M-G63細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMel-5細胞、SUIT-2細胞、HLE-B3細胞 Hs895T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 7951細胞、SK-N-AS細胞、MOLP2細胞 293/EBNA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK_N_FI細胞、Ly3細胞、U2-OS細胞 HCC1954-BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-A細胞、SK-MEL-3細胞、MyLa 2059細胞 BrCL12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM2-4175細胞、HM06.A1細胞、EOL1細胞 KM12SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV90細胞、16-HBEo細胞、SW 948細胞 MDA231-LM2-4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CSQT-2細胞、Leukemia L1210細胞、HCT-FET細胞 Farage Original Line細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE-Van細胞、HO1N1細胞、HEL 299細胞 Mouse podocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC 813細胞、MEC-1細胞、L5178Y-R細胞 N9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KB細胞、KU-812-F細胞、HT144mel細胞 SNU-C2A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AAV293細胞、SNU-354細胞、SNU-5細胞 HEK-AD 293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H184A1細胞、M059K細胞、CNLMG-B5537SKIN細胞 J 774A.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc4.03細胞、SKCol1細胞、KBM-5細胞 MNNG/HOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2195細胞、Hs-852-T細胞、OCI-LY-3細胞 WSU-DLCL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UWB1.289+BRCA1細胞、MuM-2C細胞、H.Ep.-2細胞 HCEC-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM-637細胞、HSF2細胞、Normal Rat Kidney-49F細胞 NCI-H2030細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、H-2591細胞、BIU-87/Adr細胞 GT39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI.H460細胞、RPMI8226細胞、HCC1588細胞 JeKo-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM2細胞、BCP-1細胞、H1734細胞 COLO206F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TC7細胞、INS1細胞、MonoMac6細胞 NKM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC 10細胞、RD-2細胞、766T細胞 293 HEK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FAO-1細胞、Huh 7.5細胞、Sp 2/0-Ag 14細胞 WB F344細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-HSC細胞、LS-174T細胞、RPMI8226/S細胞 NCI-H596 epithelioid cells人肺腺鱗癌細胞系 LC1sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞、RPMI-8226S細胞、RenCa細胞 MDA MB 436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266-B1細胞、Ramos-2G6-4C10細胞、H-128細胞 NCI-H226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞、ZR-75-30細胞、CNE細胞 NPC-039細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF 7B細胞、P3/X63/Ag8細胞、Danio rerio Gill細胞 "
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