"HuTu 80 epithelioid cells人十二指腸腺癌細胞系 細胞背景資料:詳見相關文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉! MZCRC1細胞系相關產(chǎn)品:PNT-1A細胞、YD15細胞、HLF-a細胞 KBM-7細胞系相關產(chǎn)品:KY-50細胞、GS-9L細胞、SK-N-MC細胞 WM266mel細胞系相關產(chǎn)品:Hepatoma-22細胞、HEK-293細胞、CEMC1細胞 細胞生長:貼壁 HuTu 80 epithelioid cells人十二指腸腺癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉化,需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前,細胞應該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細胞條件無血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存:計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應該處于對數(shù)生長期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以1×10(7)到5×10(7)細胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存:使用分離試劑從基層分離細胞,分離時盡可能溫和,使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細胞,確定有活力細胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以5×10(6)到1×10(6)細胞/ml密度,在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉移到液氮中貯存。 細胞傳代方法:1:2—1:5傳代,每周換液2-3次 293細胞系相關產(chǎn)品:NPA87細胞、HT-144細胞、A875細胞 NCI-H735細胞系相關產(chǎn)品:OVCA433細胞、MES-SA Dx5細胞、OsACL細胞 Ramos-2G6-4C10細胞系相關產(chǎn)品:BT 549細胞、PANC0327細胞、COS7細胞 hTERT-HPNE細胞系相關產(chǎn)品:OVCAR-8/ADR細胞、LUDLU1細胞、Lewis lung carcinoma細胞 L5178Y TK+/-3.7.2c細胞系相關產(chǎn)品:293S細胞、A375mel細胞、H4IIEC3細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 HuTu 80 epithelioid cells人十二指腸腺癌細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣 細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。 SK-N-DZ細胞系相關產(chǎn)品:A-1847細胞、EC109細胞、BEL 7405細胞 MKN-28細胞系相關產(chǎn)品:H820細胞、Japanese Tissue Culture-39細胞、HTh 74細胞 P3/NS1/1-Ag4.1細胞系相關產(chǎn)品:H2444細胞、IR 983F細胞、LC1細胞 THLE2細胞系相關產(chǎn)品:7860細胞、SCC90細胞、SNK-6細胞 BEAS 2B細胞系相關產(chǎn)品:NTERA-2細胞、MM1.S細胞、NCI-HUT-125細胞 MADB 106細胞系相關產(chǎn)品:HCT FET細胞、KMS18細胞、KMS18細胞 Hs 611.T細胞系相關產(chǎn)品:PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞、P3/X63-Ag8細胞、HPAF/CD18細胞 NPA87-1細胞系相關產(chǎn)品:SUM 52PE細胞、Y3細胞、HT 1376細胞 HANK細胞系相關產(chǎn)品:BJAB-1細胞、HCT/FU細胞、SUP-B1細胞 EB2細胞系相關產(chǎn)品:CX1細胞、786O細胞、NCIH524細胞 HuTu 80 epithelioid cells人十二指腸腺癌細胞系 OVTOKO細胞系相關產(chǎn)品:RL-65細胞、Tn 5B1-4細胞、ketr 3細胞 ReNcell CX細胞系相關產(chǎn)品:HM06.A1細胞、U251MG細胞、P3-x63-Ag8 653細胞 NCI-H1385細胞系相關產(chǎn)品:TCCSUP細胞、H1703細胞、LYR細胞 RPMI #8226細胞系相關產(chǎn)品:He La細胞、LICR-LON-HN6-R細胞、SKNBE-2細胞 CCD-1095Sk細胞系相關產(chǎn)品:SCC 9細胞、hFOB 1.19細胞、HCO細胞 SNU182細胞系相關產(chǎn)品:U266細胞、CC-LP-1細胞、hTERT-RPE1細胞 SNU182細胞系相關產(chǎn)品:U266細胞、CC-LP-1細胞、hTERT-RPE1細胞 SNU-668細胞系相關產(chǎn)品:Mac-1細胞、EU-4細胞、NCI-H660細胞 Panc-8_13細胞系相關產(chǎn)品:HUV-EC-C細胞、KMST6細胞、NCIH838細胞 beta TC6細胞系相關產(chǎn)品:RPMI1788細胞、HUVEC-C[HUVEC]細胞、STTG1細胞 Medical Research Council cell strain-9細胞系相關產(chǎn)品:NCIH441細胞、T24(ECV304)細胞、H4-II-E-C3細胞 MES-SA細胞系相關產(chǎn)品:MCF-12A細胞、SUNE 1細胞、6-10B細胞 Reuber-H-35 hepatoma細胞系相關產(chǎn)品:HCC-1588細胞、MPC5細胞、SW-527細胞 MDAMB435S細胞系相關產(chǎn)品:Caco-2/BBe 1細胞、TOV21細胞、NCI-SNU-520細胞 UT7細胞系相關產(chǎn)品:MEG01細胞、TE-671細胞、T/GHA-VSMC細胞 MEF (CF-1)細胞系相關產(chǎn)品:HPDE6c7細胞、RMG-I細胞、1301細胞 3T3-L1 ad細胞系相關產(chǎn)品:D-283 Med細胞、Hs 819.T細胞、H2009細胞 NCI-H345細胞系相關產(chǎn)品:MOVAS-1細胞、MAC1細胞、K-1735細胞 Ketr3細胞系相關產(chǎn)品:HRA19細胞、VE細胞、RPMI7666細胞 CD-18細胞系相關產(chǎn)品:B16 melanoma F10細胞、NCIH1573細胞、RAEC細胞 10RGB細胞系相關產(chǎn)品:OCM1A細胞、TKB-1細胞、CEM-T4細胞 JCA1細胞系相關產(chǎn)品:NCI-Hut 125細胞、Sp2/O細胞、H-64細胞 T2(174 x CEM.T2)細胞系相關產(chǎn)品:PANC.1細胞、H295R細胞、CNE2Z細胞 GM05887細胞系相關產(chǎn)品:RBL.2H3細胞、H-209細胞、ZR75_1細胞 TC7細胞系相關產(chǎn)品:KMBC細胞、LC2/Ad細胞、A-72細胞 Namalva細胞系相關產(chǎn)品:Nakata-1細胞、FF-WT-BJ細胞、Tca-83細胞 SK-Mel 1細胞系相關產(chǎn)品:Hs 683細胞、KYSE 140細胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞 H-1781細胞系相關產(chǎn)品:RD-2細胞、CHG-5細胞、HSC4細胞 JurkatE6-1細胞系相關產(chǎn)品:Walker-256-TC細胞、NR8383.1細胞、28SC細胞 NCIH889細胞系相關產(chǎn)品:LS180細胞、SK-HEP-1細胞、FHL 124細胞 U-87細胞系相關產(chǎn)品:LLC-WRC 256細胞、TE-12細胞、McArdle RH-7777細胞 C-8161細胞系相關產(chǎn)品:PLB-985細胞、BS-C-1細胞、SNU-423細胞 HS940細胞系相關產(chǎn)品:Panc_02_03細胞、Anip-973細胞、A-9細胞 ESC-410細胞系相關產(chǎn)品:HOS-143B細胞、FOXNY細胞、HANK-1細胞 Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞系相關產(chǎn)品:NHEK細胞、T-HEECs細胞、SV40-MES13細胞 Pa017C細胞系相關產(chǎn)品:PLA802細胞、CWR22Rv1細胞、Li-7細胞 A-172 MG細胞系相關產(chǎn)品:HCC-827細胞、COLO-824細胞、MEC1細胞 D341Med細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H2405細胞、U20S細胞、MDA-MB-157細胞 MGHU1細胞系相關產(chǎn)品:WM2664細胞、MDA-MB-415細胞、RC-K8細胞 WM-266-4細胞系相關產(chǎn)品:CCD-966SK細胞、T-HSC細胞、MCF-7/ADR-RES細胞 MDA-MB-134細胞系相關產(chǎn)品:OVCA432細胞、Tu212細胞、624-mel細胞 SGC-7901/DDP細胞系相關產(chǎn)品:CCD-841CoTr細胞、DHL5細胞、LLCPK1細胞 MDAPCa2b細胞系相關產(chǎn)品:TE3細胞、JM1細胞、Lieming Xu-2細胞 NH6細胞系相關產(chǎn)品:MonoMac6細胞、WERI細胞、HDQ-P1細胞 PCI:SG-231細胞系相關產(chǎn)品:SK-ES1細胞、Hs 27細胞、Hs 706.T細胞 Panc 10.05細胞系相關產(chǎn)品:U373-MG細胞、CMT-93細胞、SNUC2A細胞 hTERTHME1細胞系相關產(chǎn)品:SK-MEL-3細胞、PaCa2細胞、LY-R細胞 JTC-28細胞系相關產(chǎn)品:G 292 Clone A 141B1細胞、HSC2細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞 ZR75_1細胞系相關產(chǎn)品:AML193細胞、CCC-ESF-1細胞、RPMI 2650細胞 BMDC細胞系相關產(chǎn)品:KGN細胞、AHH-1細胞、MDA MB 231細胞 Simpson細胞系相關產(chǎn)品:RERFLCMS細胞、TE-9細胞、UMRC-2細胞 HuTu 80 epithelioid cells人十二指腸腺癌細胞系 SK UT 1細胞系相關產(chǎn)品:SNU216細胞、HD11細胞、MN60細胞 Hs 606.T細胞系相關產(chǎn)品:NCI-SNU-16細胞、DMS 79細胞、RFL6細胞 CEM-CCRF (CAMR)細胞系相關產(chǎn)品:H-358細胞、OVISE細胞、HemECs細胞 P3/NS1/1-Ag4.1細胞系相關產(chǎn)品:H2444細胞、H1184細胞、CMT.64細胞 "
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