"LS1034 epithelioid cells人結(jié)直腸癌細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 正確的細胞復(fù)蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。 NCI-H2172細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pt K1細胞、NPC-TW 039細胞、Detroit 562細胞 H1105細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP 126細胞、SW579細胞、D-324MED細胞 COLO 679細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAOV4細胞、BHK 21細胞、NCIH2066細胞 細胞生長:貼壁 LS1034 epithelioid cells人結(jié)直腸癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時體積會增加約10%,必須預(yù)留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”,常會誤認(rèn)為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認(rèn)為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長,但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號的血清。 細胞傳代方法:1:3傳代,每周2-3次 TE-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV4:11細胞、CHOS細胞、NCI-H820細胞 LTEP-a-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BOWES細胞、SKNBE(2c)細胞、A498細胞 Caco 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEM-L細胞、hSCC-25細胞、FRO細胞 ID8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPI-2I細胞、RA 1細胞、FHs 74 Int細胞 D-324MED細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF 539細胞、A-875細胞、OE-33細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 LS1034 epithelioid cells人結(jié)直腸癌細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣 常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導(dǎo)致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復(fù)蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認(rèn)為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。 RBVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI AML2細胞、HDLM2細胞、HBZY 1細胞 CEM T4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL5細胞、Douglas Foster-1細胞、NPA 87細胞 HCC70細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1819細胞、KHYG-1細胞、MCF-10 Attached細胞 HCe-8693細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLM-16細胞、UACC893細胞、OCIAML5細胞 HL-7702細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly3細胞、H508細胞、BPH1細胞 C-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC9細胞、JIMT細胞、GM-637細胞 NCI-H2291細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1299細胞、OCI-LY-19細胞、H1435細胞 HT144-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 436細胞、C6細胞、IHH細胞 WC00044細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293 EBNA細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞、MDA-175細胞 PFSK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H548細胞、RAW264細胞、SUSM-1細胞 LS1034 epithelioid cells人結(jié)直腸癌細胞系 NCIH441細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ASH-3細胞、HA細胞、A-204細胞 SUDHL4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-Swiss albino細胞、MPC-11細胞、GM0637細胞 AMJ2-C8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ANA1細胞、CHO K1細胞、SGC 7901細胞 Super Tube細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCCVII/St細胞、COR-L23/P細胞、TE5細胞 H-1882細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPECJ2細胞、K7M2細胞、MIA PaCa-2細胞 MDAMB415細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293F細胞、SCL-I細胞、MDA436細胞 MDAMB415細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293F細胞、SCL-I細胞、MDA436細胞 ME 180細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞、RD 2細胞、IR 983F細胞 266 Bl細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03671C細胞、KM-H2細胞、SACC-83細胞 CP70細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUTU80細胞、HEL-92-1-7細胞、NCI-N87細胞 293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPA87細胞、HT-144細胞、A875細胞 Turbot Embryonic Cell line細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAOEC細胞、SKNEP細胞、Caco-2/BBe細胞 Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GTL16細胞、T47-D細胞、MDA-468細胞 SKO3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:143 B細胞、NCIH460細胞、CV-1 in Origin Simian-7細胞 SUM102細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CPAE細胞、GS9L細胞、H2.35細胞 SuDHL 10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madin-Darby Canine Kidney細胞、CATHa細胞、SK-MEL 28細胞 FHs 74 Int細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPL1細胞、H-510細胞、HEC-251細胞 SK_HEP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WIL2 S細胞、Panc 03.27細胞、Hk-2細胞 A9(Hamprecht)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC-15細胞、HCC-1359細胞、PC-14細胞 CEM-C7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL120細胞、NOMO-1細胞、Farage OL細胞 SK-GT-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:6-10B細胞、H1963細胞、M2-10B4細胞 SN12CPM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SV40-HCEC細胞、COLO 320HSR細胞、Hs-274-T細胞 SW982細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞、HEI-193細胞、HS 1.Tes細胞 Farage細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK clone 52E細胞、NTera2/D1細胞、H-1522細胞 BE(2)-M17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-774細胞、A2780細胞、beta-TC6細胞 Rat Basophilic Leukemia-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp2/O-Ag14細胞、PG-LH7細胞、CAL-27細胞 MIA PaCa-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H82細胞、SP2細胞、DoTc2-4510細胞 IBRS2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DoTc2-4510細胞、NCI-H1092細胞、SW780細胞 RMG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:V79-GalK1細胞、LOU-NH-91細胞、OSC-19細胞 MC/CAR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-2058細胞、A 72細胞、WEHI 3B細胞 D407細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH:OVCAR-3細胞、IB-RS-2細胞、Panc5.04細胞 HRC-99細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CW-2細胞、HA1800細胞、MO59J細胞 M4e細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GBCSD細胞、JeKo 1細胞、H676B細胞 CAMA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Microglia Clone 3細胞、PC3M-IE8細胞、WERI細胞 C-Lu-65細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT-167細胞、AU565細胞、RH7777細胞 NPC-TW-039細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB231細胞、OV433細胞、LWnt3A細胞 0V-1063細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780S細胞、QGY 7701細胞、JB 6細胞 Chinese Hamster Ovary細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs934T細胞、SKBR-3細胞、MGC-803細胞 HEK-AD293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KASUMI1細胞、ROS1728細胞、LA-N-5細胞 KLM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPE1細胞、KALS1細胞、MEL細胞 18G3.cl 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-216細胞、NCI H157細胞、SKGIIIA細胞 National Medical Center-Glioma 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBE 135-E6E7細胞、HSCT6細胞、KYSE 410細胞 MHCC 97-L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT-26 WT細胞、U-2OS細胞、Colon38細胞 Reuber H-35細胞系相關(guān)產(chǎn)品:STO細胞、Hs940-T細胞、PL 5細胞 RPMI6666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF/CEM-C7細胞、MPP89細胞、DH 82細胞 CV-1 in Origin Simian-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-7/ADR細胞、U937細胞、Vero C1008細胞 NCI-H735細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA433細胞、MES-SA Dx5細胞、OsACL細胞 HPDE6c7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16F1細胞、BCPAP細胞、RCC 786-O細胞 Panc813細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero-E6細胞、HPB-ALL細胞、SuDHL 2細胞 PIGI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GTL 16細胞、HS-683細胞、Y3細胞 2780CP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KOPN8細胞、TFH細胞、CHP-100細胞 LS1034 epithelioid cells人結(jié)直腸癌細胞系 H1650_CO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNGM細胞、SW948細胞、H295R細胞 SuDHL 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 578.Bst細胞、HCV 29細胞、TERT-RPE1細胞 JeKo 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF-2細胞、HNE1細胞、293 HEK細胞 HCC-44細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NU-GC-2細胞、aNK細胞、SK-SH-SY5Y細胞 "
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