"HCC2157 epithelioid cells人乳腺導(dǎo)管癌細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結(jié)1:復(fù)蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當(dāng)然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y(jié)2:首先應(yīng)該懷疑凍存,實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當(dāng)會事。 L540細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-SA/Dx5細胞、P31 FUJ細胞、RS(4;11)細胞 NCI H295R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1092細胞、RERFLCMS細胞、SUIT2細胞 K299細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL34細胞、H-2347細胞、NK-92細胞 細胞生長:貼壁 HCC2157 epithelioid cells人乳腺導(dǎo)管癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異,有時因寄贈、交換和購買,培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室,的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要。現(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時,細胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止?fàn)顟B(tài),故可以長期保存。細胞低溫保存的關(guān)鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi),水晶呈針狀,極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復(fù)蘇:凍存細胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細胞要快速融化,并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。1ml凍存細胞使用10~20ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù),細胞接種應(yīng)該至少在3×10(5)活細胞/ml;培養(yǎng)細胞12到24小時,更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細胞加入到大約25ml完全生長培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞,并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板,細胞接種應(yīng)該至少為3×10(5)活細胞/ml。細胞的分化:一個成年人全身細胞總數(shù)約1012個,可以區(qū)分為200多種不同類型的細胞:形態(tài)結(jié)構(gòu),代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以,通常把發(fā)育過程中,細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細胞的產(chǎn)生和分化,這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞,轉(zhuǎn)入分化,通常從細胞周期中G1期開始時一個確定的點G0點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞,它們的基因表達和代謝活動各不相同。 細胞傳代方法:每周換液2—3次 NRK49F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN4741細胞、GM04678細胞、3T3-L1 ad細胞 KP-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ES-2細胞、IR983F細胞、P-19細胞 Onda 11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(2)C細胞、GM02219D細胞、COLO206細胞 NCI H226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞、HCC78細胞、BAR-T細胞 OVCAR 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TSCC1細胞、HIEC細胞、NPA-87細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 HCC2157 epithelioid cells人乳腺導(dǎo)管癌細胞系 細胞生長特性:懸浮生長 細胞形態(tài)特性:上皮樣 細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細胞后,應(yīng)該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當(dāng)?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應(yīng),造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。 DH-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-03-27細胞、CMT167細胞、BC-009細胞 NCIH250細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH322細胞、8305-C細胞、SNU-761細胞 NCIH1703細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-10A細胞、Hs 683細胞、A-172MG細胞 SK-N-FI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tb 1 Lu細胞、P3/X63/Ag8細胞、MCF 10A細胞 RWPE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker-256細胞、mIMCD3細胞、P3-X63-Ag8.653細胞 Panc813細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero-E6細胞、HPB-ALL細胞、SuDHL 2細胞 CLL-CII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW13細胞、H-441細胞、D341Med細胞 NB-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HREC細胞、PGLH7細胞、F98細胞 H-711細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03570細胞、SNK1細胞、NIT-1細胞 HTR-8/SVneo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DV-90細胞、hCMEC/D3細胞、PC-12細胞 HCC2157 epithelioid cells人乳腺導(dǎo)管癌細胞系 Hs-675-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO8910細胞、C4 I細胞、RPMI-8226S細胞 AR4IP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D341 Med細胞、IEC 6細胞、SUDHL-16細胞 CCD 966SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MS 751細胞、DHL8細胞、TGBC11TKB細胞 SW-954細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HB 611細胞、KG1細胞、PC 12細胞 CemT4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1937細胞、X63-Ag8細胞、GM2219C細胞 266 Bl細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03671C細胞、KM-H2細胞、SACC-83細胞 266 Bl細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03671C細胞、KM-H2細胞、SACC-83細胞 LNCaP clone FGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-51細胞、H2330細胞、JKT-1細胞 D341細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hFOB1.19細胞、CAL-120細胞、KASUMI6細胞 DAKIKI Clone 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-431細胞、766T細胞、LLC-MK-2細胞 SIRC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YD-15細胞、RPE-hTERT細胞、NIH 3T3細胞 JM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MG-HU-3細胞、MOLT 4細胞、S3-HeLa細胞 H1915細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG/HOS細胞、AD293細胞、SCC 25細胞 SKNEP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-LH7細胞、BV173細胞、HT3細胞 A875細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU182細胞、U2932細胞、H820細胞 NL-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RERF-LC-MS細胞、9L細胞、Hs832.Tc細胞 NCI-SNU-387細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Scott and White No. 13細胞、SK-BR-3細胞、Y1細胞 FRhK-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IEC-18細胞、EA hy 926細胞、WEHI-164細胞 NCI-N87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK細胞、NCI-H2196細胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細胞 SF 126細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16/BL6細胞、BSC-1細胞、SUM102細胞 WM-266-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-966SK細胞、T-HSC細胞、MCF-7/ADR-RES細胞 NCI-H1694細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1048細胞、OKAC1細胞、NCI-H441細胞 624-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞、aNK細胞、NUGC-2細胞 190PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 888.T細胞、OCM1A細胞、Calu 3細胞 UMUC-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCAEC細胞、NS-20Y細胞、CTLL2細胞 A-2058細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-2-OS細胞、MC-3T3細胞、PK15細胞 OSRC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GL261細胞、Hep 3B2.1-7細胞、CA-OV-3細胞 Panc 8.13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-3H-1細胞、TOV-112D細胞、Medical Research Council cell strain-5細胞 D10.G4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP-126細胞、QGY-7703細胞、MDA-MB157細胞 WM 239A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI 164 TC細胞、NCI-H1672細胞、JHH-2細胞 PTK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JIII細胞、OVCAR3細胞、MDA-MB-435 S細胞 Rat 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMrSV5細胞、NCI-H1792細胞、ACT-1細胞 RPMI 1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMC-HN8細胞、CMT64細胞、TE85細胞 RASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly8細胞、TPC-1細胞、WSU-DLCL-2細胞 BCaP 37細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-N-1細胞、PC615.3細胞、AG06814-N細胞 IR 983F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-231 #4175細胞、Detroit-562細胞、HCT GEO細胞 KMS18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS20-Y細胞、UCLA NPA-87-1細胞、JHH-7細胞 MDAMB134細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT.T15細胞、Panc-10.05細胞、Nittby-Salford 1細胞 MDAMB134細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT.T15細胞、Panc-10.05細胞、Nittby-Salford 1細胞 SK-MEL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO824細胞、NCIH2286細胞、NBL-2細胞 SKMEL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL-60 Clone 15細胞、HCC1954BL細胞、CHO-Lec1細胞 SK-MES-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NEC細胞、SU-86-86細胞、Simpson細胞 HR1K細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB6 Cl 30-7b細胞、TM-4細胞、IB-RS2細胞 Bowes melanoma cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1187細胞、Panc327細胞、QGY-7701細胞 D10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDLM2細胞、ACC-2細胞、AAV293細胞 A-673細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2085細胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞、KG-1a細胞 H-498細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHRF細胞、SNU368細胞、COLO 320 DM細胞 H1623細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY7細胞、HO-8910PM細胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞 MFE296細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL1細胞、CCD-841CoTr細胞、HBL1細胞 786.O細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2347細胞、Caov-3細胞、NCIH1838細胞 WM 239A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI 164 TC細胞、NCI-H1672細胞、JHH-2細胞 HCC2157 epithelioid cells人乳腺導(dǎo)管癌細胞系 CHP212細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTV1細胞、T-98細胞、Farage Original Line細胞 HET1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L279細胞、Gerner 7666細胞、H2195細胞 HD-LM-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOC 20細胞、P30/OHK細胞、LOUNH91細胞 NCIH1703細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-10A細胞、U-138 MG細胞、MKN-1細胞 "
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