"HCC1500 epithelioid cells人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞傳代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn):體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞,并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后,由于密度過(guò)大生存空間不足而引起營(yíng)養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細(xì)胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中,細(xì)胞培增3~6次。細(xì)胞傳代后,一般經(jīng)過(guò)三個(gè)階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度,即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/100個(gè)細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細(xì)胞可達(dá)3~5%;細(xì)胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時(shí)期,稱(chēng)指數(shù)增生期(對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期),適宜進(jìn)行各種試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)步驟:1.將長(zhǎng)成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺(tái)中倒掉瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞,如果細(xì)胞變圓,相互之間不再連接成片,這時(shí)應(yīng)立即在超凈臺(tái)中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細(xì)胞懸液。3.將細(xì)胞懸液吸出2ml左右,加到另一個(gè)培養(yǎng)瓶中并向每個(gè)瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細(xì)胞在2小時(shí)左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶?jī)?nèi)形成單層,需要再次進(jìn)行傳代。 ASPC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-144細(xì)胞、TE671/RD細(xì)胞、MFM223細(xì)胞 HS-683細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTori3細(xì)胞、OK-WT細(xì)胞、HCC 38細(xì)胞 KNS-81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1876細(xì)胞、RS1細(xì)胞、BRL 3A細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 HCC1500 epithelioid cells人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞的衰老:體外細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)證明:成纖維細(xì)胞:來(lái)自胎兒傳代50次后衰老死亡,來(lái)自成人傳代20次后衰老死亡(與具體年齡有關(guān);來(lái)自小鼠傳代14--28次后衰老死亡,來(lái)自烏龜傳代90--125次后衰老死亡。細(xì)胞衰老過(guò)程中會(huì)發(fā)生一系列的變化,包括:蛋白質(zhì)合成速度降低,已有蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)變化,特異蛋白質(zhì)成份出現(xiàn);同時(shí),細(xì)胞核,線粒體,膜系統(tǒng)、骨架系統(tǒng)等都有結(jié)構(gòu)、功能的改變。細(xì)胞衰老原因,尚無(wú)定論,出現(xiàn)過(guò)好幾種理論與假說(shuō),其中得到較廣泛認(rèn)可的是“自由基損傷假說(shuō)”。細(xì)胞凋亡:細(xì)胞的死亡是個(gè)體存活的正?,F(xiàn)象,常見(jiàn)的細(xì)胞死亡形式有3種:壞死、凋亡和細(xì)胞毒性。多細(xì)胞生物的生命活動(dòng)中,因?yàn)榄h(huán)境因素的突然變化或病原物的入侵,導(dǎo)致一部分細(xì)胞死去,稱(chēng)為細(xì)胞的病理死亡,或細(xì)胞壞死。壞死是細(xì)胞暴露于嚴(yán)重的物理或化學(xué)刺激時(shí)導(dǎo)致的細(xì)胞死亡;細(xì)胞毒性是由細(xì)胞或者化學(xué)物質(zhì)引起的單純的細(xì)胞殺傷事件,不依賴(lài)于其它兩種細(xì)胞死亡機(jī)理,如殺傷T細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用。還有一種情況,一部分細(xì)胞的死亡是生物個(gè)體正常生命活動(dòng)(代謝、生長(zhǎng)、發(fā)育、分化)的一個(gè)必要部分;似乎帶有“犧牲局部,保全整體”的意味。這種情況下的細(xì)胞死亡,明顯地受遺傳控制,稱(chēng)為細(xì)胞凋亡。凋亡(Apoptosis)則是程序性的、正常的細(xì)胞死亡,是機(jī)體清除無(wú)用的或者不想要的細(xì)胞的手段。它與細(xì)胞壞死是兩個(gè)截然不同的過(guò)程,無(wú)論從形態(tài)學(xué)、生物學(xué)還是生化的特征來(lái)說(shuō),都有明顯的區(qū)別。細(xì)胞凋亡現(xiàn)象普遍存在于生物界。細(xì)胞凋亡與細(xì)胞增殖、分化和衰老起著互補(bǔ)與平衡的作用,在多細(xì)胞動(dòng)物的發(fā)育、形態(tài)建成與維持中扮演至關(guān)重要的角色。作為細(xì)胞的一種基本生命現(xiàn)象,凋亡失控的結(jié)果將是可怕的:凋亡不足時(shí),易發(fā)生癌變、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡過(guò)量則可能產(chǎn)生獲得性免疫缺陷綜合征(HIV)、重癥肝炎與退行性神經(jīng)疾病,如老年性癡呆癥(Alzheimer""s disease)、帕金森氏癥(Parkinson""s disease)。因此研究細(xì)胞凋亡及其機(jī)理具有重要的理論和實(shí)踐意義。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每3-5天換液 Eca-109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL1細(xì)胞、F-36P細(xì)胞、HCMEC(BL12-H)細(xì)胞 SW1088細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63NS1細(xì)胞、SUDHL-2細(xì)胞、SW-1573細(xì)胞 P3X63NS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 30細(xì)胞、RSC 96細(xì)胞、VP 267細(xì)胞 NCI-H1836細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GRSL細(xì)胞、WM 266-4細(xì)胞、Jurkat 77細(xì)胞 NCIH748細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375S2細(xì)胞、Central Adrenergic TH-expressing a細(xì)胞、SUDHL-10細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 HCC1500 epithelioid cells人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng) 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣 細(xì)胞凍存的步驟:1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類(lèi)型來(lái)選擇;3)將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱(chēng)和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類(lèi)及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過(guò)夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過(guò)夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見(jiàn),凍存半年后,取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。 NTera2/D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK13細(xì)胞、LOUNH91細(xì)胞、HEK293A細(xì)胞 M210B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-20細(xì)胞、NCIH358細(xì)胞、H-920細(xì)胞 C3H/10T1/2 CL8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MT4細(xì)胞、NUGC3細(xì)胞、MCF.10A細(xì)胞 Kit 225-K6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-F442A細(xì)胞、PIEC細(xì)胞、SK-MEL-3細(xì)胞 SKLU-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-Mel1細(xì)胞、WEHI 3細(xì)胞、D283-MED細(xì)胞 NCIH1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C2-C12細(xì)胞、MH-S細(xì)胞、BJAB-1細(xì)胞 BE2-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT/FU細(xì)胞、U-2-OS細(xì)胞、NCI-841細(xì)胞 UPCI:SCC90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat (clone E6-1)細(xì)胞、NCIH1155細(xì)胞、GM00637B細(xì)胞 NCIH1563細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03570E細(xì)胞、COLO-738細(xì)胞、TOV112D細(xì)胞 MC-3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CESS細(xì)胞、A-172MG細(xì)胞、RFL 6細(xì)胞 HCC1500 epithelioid cells人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系 A2780CP70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3 NS1 Ag4/1細(xì)胞、THLE2細(xì)胞、B16 melanoma細(xì)胞 COV434細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SRS-82細(xì)胞、NWA細(xì)胞、FL83B細(xì)胞 H2085細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Epstein-Barr-1細(xì)胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞、H1618細(xì)胞 SupT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HB611細(xì)胞、HCC1171細(xì)胞、H4-IIE-C3細(xì)胞 NCI-H2023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-292細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細(xì)胞、HOS (TE85)細(xì)胞 Michigan Cancer Foundation-12F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL 100細(xì)胞、HRCEC細(xì)胞、WM-2664細(xì)胞 Michigan Cancer 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