"MDA-MB-134-VI epithelioid cells人乳腺導(dǎo)管癌細胞系 細胞背景資料:該細胞1973年由R. Cailleau建系,源自74歲乳腺導(dǎo)管癌女性患者的胸腔積液,細胞生長緩慢,松散貼壁,生長過程中會脫落到培養(yǎng)基,不會匯合,過表達FGF受體 細胞形態(tài):上皮細胞樣 正確的細胞復(fù)蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。 HS 1.Tes細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCFs細胞、NCI-747細胞、NCI-H-69細胞 143B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JVM2細胞、Hs-695-T細胞、V 79-4細胞 RPMI 7951細胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63.Ag8.653細胞、BEAS 2B細胞、SU-DHL-4細胞 細胞生長:貼壁 MDA-MB-134-VI epithelioid cells人乳腺導(dǎo)管癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。 細胞傳代方法:1:2—1:4傳代,每周換液2—3次 Y1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CaSki細胞、28SC細胞、LS-123細胞 HPBALL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL100細胞、FDCP1細胞、3T3-F442A細胞 Be-Wo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-022細胞、SIRC細胞、3T3(A31)細胞 PF-382細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT-102細胞、Hs888 Lu細胞、SNU-398細胞 Medical University of Graz-Chordoma 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEH2細胞、CA46細胞、B95-8細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 MDA-MB-134-VI epithelioid cells人乳腺導(dǎo)管癌細胞系 細胞生長特性:松散貼壁生長 細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣 常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導(dǎo)致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復(fù)蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。 Co 205細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs1.Tes細胞、KNS81細胞、KYSE 270細胞 MDA-MB 361細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 6666細胞、HUASMC細胞、SF-126細胞 Homo sapiens No. 578, breast cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TMK-1細胞、Ramos.2G6.4C10細胞、COLO 206F細胞 SU-DHL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs695細胞、HEC1B細胞、Mono-Mac-6細胞 A101D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-C2B細胞、NCI-A549細胞、B6Tert-1細胞 C6661細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLP-8細胞、THLE-3細胞、NS1細胞 SK-RC 52細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BLO11細胞、McCoy細胞、Vertebral Cancer of the Prostate細胞 Jurkat (clone E6-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW756細胞、CEM-CCRF (CAMR)細胞、MOLT-16細胞 K7M2 wt細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caov-4細胞、J-774A.1細胞、Jeko1細胞 HL7702細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAFII細胞、MCAEC細胞、H-1373細胞 MDA-MB-134-VI epithelioid cells人乳腺導(dǎo)管癌細胞系 LO2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE 29細胞、NR 8383細胞、Hs 695T細胞 PTK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCISCC154細胞、CHP 100細胞、GLRK 13細胞 HCe-8693細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLM-16細胞、UACC893細胞、OCIAML5細胞 RD-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 675.T細胞、MDA453細胞、MES-13細胞 AHH-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Be Wo細胞、3T6-Swiss albino細胞、WEHI231細胞 HOC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2073細胞、293S細胞、H1648細胞 KE 37細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-4細胞、NCI-H747細胞、KP-N-RT細胞 NIE-115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRASMC細胞、Hs852細胞、L5178Y細胞 SK-N-FI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tb 1 Lu細胞、P3/X63/Ag8細胞、MCF 10A細胞 STO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1092細胞、WEHI3B細胞、H-146細胞 GM06141細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL-I細胞、THP 1細胞、NCI N87細胞 H1876細胞系相關(guān)產(chǎn)品:22Rv-1細胞、Mo7e細胞、GC9811-P細胞 NSI/1-Ag4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2066細胞、Nthy-ori 3.1細胞、alpha TC1 clone 6細胞 A-204細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 205細胞、P31/FUJ細胞、NCI H345細胞 YD-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H64細胞、293-FT細胞、MS 751細胞 TE13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1944細胞、GM05372細胞、CT26.CL25細胞 OV-CA 432細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLM-1細胞、CV-1 in Origin Simian-1細胞、OP-9細胞 Centre Antoine Lacassagne-51細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LWnt-3A細胞、HT 1197.T細胞、SRA01/04細胞 SW-1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDBK (NBL-1)細胞、IM 9細胞、NR 8383細胞 OVMANA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-5細胞、LIXC-002細胞、PA317細胞 SGC-996細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 604.T細胞、HCET細胞、LAN1細胞 AGS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Glioma 261細胞、B 95.8細胞、H-596細胞 HFF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC 97-L細胞、McARH7777細胞、HCC827細胞 HLEC-B3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT 16細胞、BN-CL2細胞、MTEC1細胞 RS411細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NT2-D1細胞、LAN-5細胞、HEK293-FT細胞 OCI Ly19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-3255細胞、M-20細胞、HCC70細胞 HBMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP clone FGC細胞、U-266 AR1細胞、LS-174T細胞 ZR7530細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco2-BBE細胞、293-F細胞、H-1092細胞 NCIH1581細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-125細胞、EB-2細胞、Soleus clone 8細胞 WM115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NE1細胞、SN12PM6細胞、Jurkat FHCRC細胞 P3/NS1/1-Ag4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EU-3細胞、GM 2132細胞、SHP-77細胞 R.K.13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-134-VI細胞、Microbiological Associates-104細胞、OCI AML5細胞 SK-MEL-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSF細胞、AQ-Mel細胞、4-1st細胞 M619細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H498細胞、PC-10細胞、UM-RC-2細胞 CMT167細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS1/1-Ag4.1細胞、LIM-1215細胞、MC/CAR細胞 WM239A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M-IE8細胞、OVCAR420細胞、TCMK1細胞 NGP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM-C1細胞、K299細胞、MRC-9細胞 F56 [Human neoplasm]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL-11細胞、PANC-02-03細胞、TE-85 clone 5細胞 H526細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLCPRF5細胞、HMy2.CIR細胞、GTL-16細胞 OK-WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BBE細胞、AML-193細胞、PLA-801C細胞 SMC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM07404A細胞、FRTL5細胞、Caki-2細胞 Tn5 B1-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL51細胞、UCLA-RO 81細胞、B-3細胞 MDAMB361細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH-6細胞、SW1783細胞、HT1080細胞 GM03569細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA NPA-87-1細胞、NCIH3255細胞、BV2細胞 EBTr (NBL-4)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep3B細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞、HHL5細胞 Roswell Park Memorial Institute 1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC PRF 5細胞、HuT-102細胞、GM02219細胞 NCIH838細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAVER1細胞、KMM-1細胞、NE-4C細胞 SVG(P12)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BPH1細胞、NCI-SNU-886細胞、COLO320-DM細胞 74Int細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT-BM細胞、H-1581細胞、H6c7細胞 MN 60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H719細胞、639-V細胞、MZCRC1細胞 SW962細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375.S2細胞、HTR-8/SVneo細胞、3T6-Swiss albino細胞 MDA-MB-134-VI epithelioid cells人乳腺導(dǎo)管癌細胞系 OCI-Ly 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:32Dc3細胞、LA 4細胞、SR-786細胞 Fetal Rhesus Kidney-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGR-OV1細胞、MC/CAR細胞、SW-1116細胞 THLE-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human podocyte細胞、HCASMC細胞、74Int細胞 hOMF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nthy ori 3.1細胞、KOPN8細胞、BT483細胞 "
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