"M059K epithelioid cells人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞傳代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn):體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞,并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細(xì)胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中,細(xì)胞培增3~6次。細(xì)胞傳代后,一般經(jīng)過三個(gè)階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度,即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/100個(gè)細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細(xì)胞可達(dá)3~5%;細(xì)胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時(shí)期,稱指數(shù)增生期(對(duì)數(shù)生長期),適宜進(jìn)行各種試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)步驟:1.將長成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺(tái)中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞,如果細(xì)胞變圓,相互之間不再連接成片,這時(shí)應(yīng)立即在超凈臺(tái)中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細(xì)胞懸液。3.將細(xì)胞懸液吸出2ml左右,加到另一個(gè)培養(yǎng)瓶中并向每個(gè)瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細(xì)胞在2小時(shí)左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進(jìn)行傳代。 SNU601細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE0030細(xì)胞、WiDr-TC細(xì)胞、KPNRTBM1細(xì)胞 D10G41細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-102細(xì)胞、AR4IP細(xì)胞、bEnd3細(xì)胞 SK-RC 52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BLO11細(xì)胞、McCoy細(xì)胞、Vertebral Cancer of the Prostate細(xì)胞 細(xì)胞生長:貼壁 M059K epithelioid cells人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞傳代的一般方法:開始細(xì)胞傳代前,仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細(xì)胞(單層細(xì)胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細(xì)胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細(xì)胞,挑選生長狀態(tài)良好,細(xì)胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細(xì)胞;先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細(xì)胞瓶內(nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細(xì)胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。 細(xì)胞傳代方法:1:6-1:8傳代;每周換液2-3次。 Vx2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:697細(xì)胞、NCIH2196細(xì)胞、Psi-2 DAP細(xì)胞 NCI-H1703細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC1sq細(xì)胞、NH-6細(xì)胞、OVCAR3細(xì)胞 HSC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 H細(xì)胞、HOP 62細(xì)胞、WI-38細(xì)胞 bEND.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ATDC5細(xì)胞、KP-N-NS細(xì)胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細(xì)胞 NIH-3T3-L1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sup T-1細(xì)胞、B4G12細(xì)胞、RM1細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 M059K epithelioid cells人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:貼壁生長 細(xì)胞形態(tài)特性:成纖維細(xì)胞 細(xì)胞凍存的步驟:1)選擇處于對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來選擇;3)將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 MDA-435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10 (Clone 4)細(xì)胞、SK-RC-20細(xì)胞、F-36P細(xì)胞 SNU-368細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML12細(xì)胞、MS 751細(xì)胞、5-8F細(xì)胞 Tca-83細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-33細(xì)胞、NCI-H1648細(xì)胞、NCI-H1355細(xì)胞 TNC-1B12B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pa18C細(xì)胞、G-402細(xì)胞、U373MG細(xì)胞 T98-G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-28細(xì)胞、D341 Med細(xì)胞、OV1/P細(xì)胞 HT-1197細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:766T細(xì)胞、GA-10 (Clone 4)細(xì)胞、HCT-8/V細(xì)胞 YAC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC-2細(xì)胞、SUDHL5細(xì)胞、MCA-205細(xì)胞 MAVER細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH 6細(xì)胞、FL-83B細(xì)胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細(xì)胞 U-2 OS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL 1-0細(xì)胞、HSAS3細(xì)胞、MMQ細(xì)胞 HEK;293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1954 BL細(xì)胞、B16/F1細(xì)胞、PaTu 8988 S細(xì)胞 M059K epithelioid cells人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系 624mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO206細(xì)胞、K-562細(xì)胞、HUT-28細(xì)胞 SKN-AS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1238細(xì)胞、Glioma-261細(xì)胞、Earle's L cells細(xì)胞 J774 A.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-1040細(xì)胞、F-81細(xì)胞、MCA205細(xì)胞 HeLa.S3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ND7/23細(xì)胞、Ocular Choroidal Melanoma-1細(xì)胞、BT474細(xì)胞 Clone 15 HL-60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-578Bst細(xì)胞、CW-2細(xì)胞、KU-19-19細(xì)胞 H250細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VM-CUB1細(xì)胞、RERF-LC-MS細(xì)胞、NU-GC-2細(xì)胞 H250細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VM-CUB1細(xì)胞、RERF-LC-MS細(xì)胞、NU-GC-2細(xì)胞 Walker/LLC-WRC256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:INS1-E細(xì)胞、CL1-0細(xì)胞、Vero 76 clone E-6細(xì)胞 SK-N-BE-2c細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1915細(xì)胞、Human Foreskin Fibroblast細(xì)胞、ABC-1細(xì)胞 NUGC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP C4-2細(xì)胞、HBE 135-E6/E7細(xì)胞、H1703細(xì)胞 PC615.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC827細(xì)胞、LIM1215細(xì)胞、BEL7402細(xì)胞 NCI-H1944細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL2H3細(xì)胞、RA細(xì)胞、NCI-H596細(xì)胞 MB231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN 45細(xì)胞、KNS-81細(xì)胞、NRK 49F細(xì)胞 159 PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T2細(xì)胞、H526細(xì)胞、HCC1937細(xì)胞 MIA-Pa-Ca-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:451-LU細(xì)胞、JEG-3細(xì)胞、Panc 08.13細(xì)胞 J.E6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JROECL 33細(xì)胞、SU86_86細(xì)胞、18G3.cl 1細(xì)胞 QSG7701細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKUT-1細(xì)胞、CCRF-SB細(xì)胞、PGBE1細(xì)胞 V79-GalK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM05372E細(xì)胞、NCIH322細(xì)胞、NCIH2196細(xì)胞 SGC7901/DDP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC 97-H細(xì)胞、SUM190PT細(xì)胞、Co-115細(xì)胞 OV-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3JHR-1細(xì)胞、RK-13細(xì)胞、OK-WT細(xì)胞 HCC-1359細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-159PT細(xì)胞、NIH:OVCAR-4細(xì)胞、Karpas-299細(xì)胞 SU-DHL-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CII細(xì)胞、HMrSV5細(xì)胞、MCA38細(xì)胞 Tn 5B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2029細(xì)胞、OV1/P細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-78細(xì)胞 H.Ep. #2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1792細(xì)胞、Hs 739.T細(xì)胞、COV-362細(xì)胞 BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UO-31細(xì)胞、MC-38細(xì)胞、NIH:OVCAR-8細(xì)胞 EU-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FUOV1細(xì)胞、ZYM-DIEC02細(xì)胞、HEK-293F細(xì)胞 22Rv-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC7901細(xì)胞、HCC-70細(xì)胞、Monomac-1細(xì)胞 P31 FUJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB453細(xì)胞、PAMC82細(xì)胞、NT2/D1細(xì)胞 WERI-Rb1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GCT細(xì)胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細(xì)胞、CAOV3細(xì)胞 SUPB15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN12C-PM6細(xì)胞、HRPEpiC細(xì)胞、A 2058細(xì)胞 OSC19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BL-6細(xì)胞、SEG-1細(xì)胞、SU86_86細(xì)胞 HANK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCA-38細(xì)胞、H-1781細(xì)胞、NCI-H322細(xì)胞 MPC-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-886細(xì)胞、NCIH1703細(xì)胞、MOLM-14細(xì)胞 HEC151細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Monomac-1細(xì)胞、LN-382細(xì)胞、253J細(xì)胞 H-711細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03570細(xì)胞、SNK1細(xì)胞、NIT-1細(xì)胞 H2073細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:253J B-V細(xì)胞、CSQT-2細(xì)胞、McA-RH8994細(xì)胞 Epstein-Barr-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHG44細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 2650細(xì)胞、NEC-8細(xì)胞 PC12(高分化)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Oregon J-111細(xì)胞、HO-1-N-1細(xì)胞、PC3細(xì)胞 4T1-LUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL-92.1.7細(xì)胞、BT-325細(xì)胞、H650細(xì)胞 TMD8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMNSAH/DF-1細(xì)胞、H-1915細(xì)胞、SNU387細(xì)胞 SNU-387細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1395細(xì)胞、NCIH1105細(xì)胞、UMNSAH/DF#1細(xì)胞 PLB 985細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHI1細(xì)胞、OEC33細(xì)胞、FRH-0201細(xì)胞 Murine Thymic Epithelial Cell line 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-84細(xì)胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細(xì)胞、PA I細(xì)胞 CCD19-Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCD-MLA-144細(xì)胞、NG 108-15細(xì)胞、AAV-293細(xì)胞 ONS-76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3D4/21細(xì)胞、SC細(xì)胞、KRC Y細(xì)胞 DU145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKN細(xì)胞、Mc Coy細(xì)胞、1.1B4細(xì)胞 CHO-K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:V 79細(xì)胞、MCF 7細(xì)胞、NCI-HUT-69細(xì)胞 H2171細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS513細(xì)胞、293T/17細(xì)胞、HSC-4細(xì)胞 MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1666_DA細(xì)胞、526mel細(xì)胞、Lung cancer-1/squamous細(xì)胞 HNE3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM04678細(xì)胞、KYSE-410細(xì)胞、LM-TK-細(xì)胞 HCC202細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NKM1細(xì)胞、WEHI 164 TC細(xì)胞、SUDHL16細(xì)胞 M059K epithelioid cells人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系 Baby Hamster Kidney-21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMC-11細(xì)胞、SW527細(xì)胞、HCC4006細(xì)胞 OAW42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EAC細(xì)胞、HEK-293-FT細(xì)胞、KU812-F細(xì)胞 HL7702細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAFII細(xì)胞、Tissue Culture-1細(xì)胞、Walker256細(xì)胞 Tca-83細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-33細(xì)胞、SF-295細(xì)胞、DLD-1細(xì)胞 "
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