"B16 epithelioid cells小鼠黑色素瘤細胞系
細胞背景資料：該細胞源于C５７BL/６J小鼠黑色素瘤，可以產(chǎn)生黑色素，同基因小鼠體內(nèi)移植可成瘤
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題。總結(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當(dāng)會事。
H-3255細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 1080細胞、RL95細胞、B16-F10--RED細胞
ME-180細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16BL-6細胞、B16 F1細胞、SJ-Rh 30細胞
OV1-P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H740細胞、SK-ChA-1細胞、UPCI:SCC154細胞
細胞生長：貼壁
B16 epithelioid cells小鼠黑色素瘤細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣，考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異，有時因寄贈、交換和購買，培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室，的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?，F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-７０℃~-１９６℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是：在-７０℃以下時，細胞內(nèi)的酶活性均己停止，即代謝處于完全停止狀態(tài)，故可以長期保存。細胞低溫保存的關(guān)鍵，在于通過０~２０℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi)，水晶呈針狀，極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復(fù)蘇：凍存細胞較脆弱，要輕柔操作。凍存細胞要快速融化，并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感，離心去除凍存培養(yǎng)基，然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。１ml凍存細胞使用１０~２０ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù)，細胞接種應(yīng)該至少在３×１０(５)活細胞/ml；培養(yǎng)細胞１２到２４小時，更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基，去除凍存劑。離心方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml凍存細胞加入到大約２５ml完全生長培養(yǎng)基，輕輕混勻；以大約８０x離心２到３分鐘；棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞，并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板，細胞接種應(yīng)該至少為３×１０(５)活細胞/ml。細胞的分化：一個成年人全身細胞總數(shù)約１０１２個，可以區(qū)分為２００多種不同類型的細胞：形態(tài)結(jié)構(gòu)，代謝，行為，功能等各不相同。追根溯源，這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以，通常把發(fā)育過程中，細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段，也發(fā)生在胎兒出生以后，乃至成人階段。例如，人體血細胞的產(chǎn)生和分化，這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞，轉(zhuǎn)入分化，通常從細胞周期中G１期開始時一個確定的點G０點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞，它們的基因表達和代謝活動各不相同。
細胞傳代方法：１：３傳代，２-３天換液一次
COLO-394細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H810細胞、T2 (174 x CEM.T2)細胞、NBL-12細胞
DC 2.4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：526細胞、HFLS-OA細胞、NBL-S細胞
LX-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-435S細胞、OVCA433_Bast細胞、GM04678細胞
RCC_7860細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-2 OS細胞、IOSE80UBC細胞、OLN93細胞
NCI-747細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos-2G6-4C10細胞、CHG5細胞、FRO81-2細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
B16 epithelioid cells小鼠黑色素瘤細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞形態(tài)特性：梭形
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當(dāng)?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應(yīng)，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
NKT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MASMC細胞、Tca8113細胞、SKMEL5細胞
LTEP a2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63 AG 8.653細胞、870細胞、Malme-3 M細胞
LN 382細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-FI細胞、T98G細胞、HuNS1細胞
Clone M-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB435細胞、MOPC細胞、SNU-368細胞
3LL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-22細胞、PA-TU S細胞、SH-SY5Y Parental細胞
Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-UMC-11細胞、Saos2細胞、GT39細胞
OVCAR.4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF/CEM細胞、BeWo細胞、MDCC MSB1細胞
SF 767細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TSUpr1細胞、ESC細胞、PE/CA-PJ-34細胞
U373MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE85細胞、C127細胞、CHP126細胞
MCF-10 Attached細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH929細胞、E6-1細胞、RL952細胞
B16 epithelioid cells小鼠黑色素瘤細胞系
WEHI164細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMS 13細胞、BL2141細胞、HCC0202細胞
BT 325細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCaP-37細胞、KNS-62細胞、DU-4475細胞
NCI-H1930細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCC Sup細胞、Hs695細胞、NCI-H1793細胞
KB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-ALL1細胞、H-2171細胞、SUM-159PT細胞
J774細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LuCL4細胞、SKM1細胞、H-2066細胞
MFE-280細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSAS3細胞、JB6Cl30細胞、L- cell細胞
CTX TNA2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB-6 Cl 30細胞、USMC細胞、C-32細胞
AC16 [Human hybrid]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU86.86細胞、L2細胞、L23/P細胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-676B細胞、Centre Antoine Lacassagne-148細胞、RIN-m 14B細胞
EoL-1-cell細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BRL細胞、H-1048細胞、SPCA-1細胞
H-498細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHRF細胞、SNU368細胞、COLO 320 DM細胞
SHI-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T24(ECV304)細胞、C32r細胞、A 172細胞
3AO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TH1細胞、H711細胞、RN細胞
RPMI8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TERT-RPE1細胞、PLA801-95C細胞、LIPF178C細胞
EAhy926細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs.27細胞、C-33 A細胞、NCI-322細胞
J774 A.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-1040細胞、F-81細胞、MCA205細胞
Hi5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JC細胞、SKCO1細胞、CEMx721.174.T2細胞
SCL-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-266-4細胞、UCLA-SO-M20細胞、NCI-H647細胞
Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：18G3.cl 1細胞、NCIH226細胞、Pa16C細胞
T-HEECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QBI-HEK 293A細胞、MV4;11細胞、MDA134細胞
THC-8307細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 123細胞、SW-403細胞、Medical Research Council cell strain-9細胞
NCI522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-kb2細胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細胞、OCI-LY-19細胞
MZ-CRC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2030細胞、KM933細胞、SUM 102細胞
3AO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TH1細胞、H711細胞、RN細胞
T47D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR-42J細胞、Hs895T細胞、Hs888T細胞
B16BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEI193細胞、Rat Basophilic Leukemia-1細胞、MSF細胞
Rca-B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GT39細胞、MDA-MB 231細胞、NCI-H1792細胞
CCC-HIE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293EBNA細胞、293 H細胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細胞
SW-1222細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SEG1細胞、GTL 16細胞、RCK-8細胞
SK-MES-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NEC細胞、SU-86-86細胞、Simpson細胞
U87 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：F56 [Human neoplasm]細胞、Chinese Hamster Lung細胞、NCI-H929細胞
Hs 895.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS 79細胞、SRA01/04細胞、HOP 92細胞
OC-3-VGH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-6細胞、PJ34細胞、SUD-4細胞
TSU-Pr1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1568細胞、COLO-829細胞、R.K.13細胞
SK-MEL 28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1-Ag4細胞、OSC19細胞、IHC-ST1細胞
End1/E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero E6細胞、HECCL-1細胞、H1869細胞
SKMEL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C57 Mouse Tumor 93細胞、PC-3M-1E8細胞、293-EBNA1細胞
SW954細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS81細胞、MIA-Pa-Ca-2細胞、HCC15細胞
Tca-83細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-33細胞、NCI-H1648細胞、NCI-H1355細胞
HOS TE 85細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293AD細胞、LI7細胞、MOVAS-1細胞
U-251細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 606細胞、293E細胞、CT26-clone 25細胞
PANC0813細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293c18細胞、P3/ag細胞、BRL-3A細胞
Ramos 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBE 135-E6/E7細胞、SK-N-BE-2c細胞、Sc-1細胞
J.E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL 33細胞、SU86_86細胞、18G3.cl 1細胞
TO 175.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW264.7細胞、HCC70細胞、SCL2細胞
OCM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTV-1細胞、hTERTHME1細胞、CL-11細胞
L929(NCTC)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-26細胞、GP-293細胞、AHH1細胞
H-596細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-661細胞、CAL62細胞、Tb1Lu細胞
BNCL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI 2細胞、QGY-7701細胞、A72細胞
alpha TC1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Namalva細胞、H-1688細胞、NCIH2228細胞
TPC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OUMS23細胞、D407 RPE細胞、RTE細胞
B16 epithelioid cells小鼠黑色素瘤細胞系
PCI:SG-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ES1細胞、Hs 27細胞、Hs 706.T細胞
RL-952細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16細胞、Strain V細胞、Hep G2細胞
COLO206細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NALM-6-M1細胞、IEC6細胞、NP-69細胞
LN 382細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-FI細胞、H146細胞、NTera2 cl.D1細胞
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