"Ca Ski epithelioid cells人宮頸癌腸轉移細胞系
細胞背景資料：這株細胞是從小腸腸系膜轉移灶的細胞中建立的。 據(jù)報道，它含有完整的HPV-１６(每個細胞大約６００個拷貝)和HPV-１８相關序列。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結１：復蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y２：首先應該懷疑凍存，實際上復蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
NCI-SNU-C1細胞系相關產(chǎn)品：SH-SY5Y細胞、HeLa S3細胞、PC-9/GR細胞
Hx147細胞系相關產(chǎn)品：343 MG細胞、BJAB細胞、COLO 394細胞
KYSE270細胞系相關產(chǎn)品：2780CP細胞、P3JHR1細胞、BALB/3T3細胞
細胞生長：貼壁
Ca Ski epithelioid cells人宮頸癌腸轉移細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結凍時體積會增加約１０%，必須預留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質，應立即停用，更換另一批號的血清。
細胞傳代方法：１：２傳代
RCC-JF細胞系相關產(chǎn)品：HUVEC-C[HUVEC]細胞、T47D細胞、EFM19細胞
3T6細胞系相關產(chǎn)品：L cells細胞、alpha TC1-6細胞、OV 1063細胞
NCIH1435細胞系相關產(chǎn)品：CHG-5細胞、293-GP細胞、JIII細胞
MC-3T3細胞系相關產(chǎn)品：CESS細胞、A-172MG細胞、RFL 6細胞
BrCL15細胞系相關產(chǎn)品：Hep II細胞、Cates 1B細胞、P388-D1細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
Ca Ski epithelioid cells人宮頸癌腸轉移細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結：１)一般客戶拿到細胞后，應該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
T173細胞系相關產(chǎn)品：Hep-G2/C3A細胞、GOS3細胞、SUNE-1細胞
HFB細胞系相關產(chǎn)品：SNU484細胞、SUSM-1細胞、BA/F3細胞
HFF細胞系相關產(chǎn)品：MAEC細胞、HuH 6細胞、P3.653細胞
H-1092細胞系相關產(chǎn)品：Hs 863.T細胞、MCF 10A細胞、H-1238細胞
DHL-6細胞系相關產(chǎn)品：MLMA細胞、H719細胞、A549/DDP細胞
P3X63-Ag8.653細胞系相關產(chǎn)品：8226/S細胞、PC14細胞、OV3121細胞
H-727細胞系相關產(chǎn)品：293A細胞、U251細胞、PK-13細胞
T-84細胞系相關產(chǎn)品：SK-RC 39細胞、HCC1500細胞、BHP10-3細胞
EJ-1細胞系相關產(chǎn)品：Functional Liver Cell-7細胞、FHCRC subclone 11細胞、Cor L88細胞
TE-4細胞系相關產(chǎn)品：GOS-3細胞、Hs 675.T細胞、SNT-8細胞
Ca Ski epithelioid cells人宮頸癌腸轉移細胞系
alpha-TC1-6細胞系相關產(chǎn)品：SW-527細胞、CTV-1細胞、SLK細胞
CEM-C1細胞系相關產(chǎn)品：Reuber H35細胞、AG06814-J細胞、Hs 729細胞
KYSE-520細胞系相關產(chǎn)品：Bx-PC3細胞、S180細胞、H35細胞
NCIH378細胞系相關產(chǎn)品：COLO320-DM細胞、COS-7細胞、EC9706細胞
Karpas422細胞系相關產(chǎn)品：CAL 12細胞、Hepa 1-6細胞、W133細胞
HL7702細胞系相關產(chǎn)品：HPAFII細胞、MCAEC細胞、H-1373細胞
HL7702細胞系相關產(chǎn)品：HPAFII細胞、MCAEC細胞、H-1373細胞
H929細胞系相關產(chǎn)品：639 V細胞、VK-2/E6E7細胞、NOK細胞
H735細胞系相關產(chǎn)品：Hs 934.T細胞、IPLB-Sf21AE細胞、CAL 12細胞
TOV21細胞系相關產(chǎn)品：H-1563細胞、MDA-231細胞、OCI-Ly18細胞
Medical Research Council cell strain-5細胞系相關產(chǎn)品：SupT1細胞、G 292 Clone A 141B1細胞、IR983F細胞
HCC-1187細胞系相關產(chǎn)品：High 5細胞、Wistar Institute-38細胞、OCI-Ly8細胞
NCI-H2052細胞系相關產(chǎn)品：KYSE 180細胞、H22細胞、16HBE140細胞
Jurkat clone A3細胞系相關產(chǎn)品：LL/2 (LLC1)細胞、RTMC細胞、RIN m5F細胞
NCI-H322T細胞系相關產(chǎn)品：Rh30細胞、H-660細胞、BC-PAP細胞
HT-1080細胞系相關產(chǎn)品：AMJ2C8細胞、Capan-2細胞、U266細胞
PA-TU S細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H322T細胞、IMR 32細胞、NCI-ADR-RES細胞
PL 45細胞系相關產(chǎn)品：RK 13細胞、HC-11細胞、Human Embryo Lung-1細胞
SNU387細胞系相關產(chǎn)品：3T3L1細胞、SNU739細胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞
SNU387細胞系相關產(chǎn)品：3T3L1細胞、SNU739細胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞
DMS 273細胞系相關產(chǎn)品：AN-3細胞、OCI-Ly7細胞、Hs940-T細胞
HCC-1143細胞系相關產(chǎn)品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞、VMCUB-1細胞、M-07e細胞
HCC-1937細胞系相關產(chǎn)品：RBMEC細胞、OE21細胞、MDAMB330細胞
SUM159細胞系相關產(chǎn)品：DH-82細胞、GM02132C細胞、SK-RC 42細胞
FAK+/+細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1869細胞、Melanoma 14細胞、RD-ES細胞
MDA-MB468細胞系相關產(chǎn)品：MDA MB 453細胞、A375S2細胞、U-343MG細胞
KTCTL140細胞系相關產(chǎn)品：H-2009細胞、Evsa-T細胞、COLO 678細胞
MKN45細胞系相關產(chǎn)品：TE-671細胞、MCMEC細胞、SVG(P12)細胞
P30-OHK細胞系相關產(chǎn)品：MDA468細胞、KU812-F細胞、H441細胞
IPLB-SF-21-AE細胞系相關產(chǎn)品：SKMEL24細胞、SCC154細胞、JC細胞
Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞系相關產(chǎn)品：MDA-PCa-2b細胞、HT-22細胞、293FT細胞
NCI-747細胞系相關產(chǎn)品：Ramos-2G6-4C10細胞、CHG5細胞、FRO81-2細胞
JM-Jurkat細胞系相關產(chǎn)品：PFSK-1細胞、TE85細胞、Hs274T細胞
JB 6細胞系相關產(chǎn)品：H1417細胞、16-HBE細胞、FC33細胞
Sp2/O-Ag14細胞系相關產(chǎn)品：MUVEC細胞、SJ-RH30細胞、H-87細胞
WM 451-Lu細胞系相關產(chǎn)品：HCC2185細胞、H-716細胞、MKN 45細胞
YD-38細胞系相關產(chǎn)品：H64細胞、293-FT細胞、MS 751細胞
EJ-1細胞系相關產(chǎn)品：Functional Liver Cell-7細胞、FHCRC subclone 11細胞、Cor L88細胞
LoMeT-ccRcc細胞系相關產(chǎn)品：RASMCs細胞、EoL-1細胞、OVCAR.5細胞
P388D1細胞系相關產(chǎn)品：MCF7ADR細胞、LTEP-sm細胞、HCC-70細胞
LC-MS細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1963細胞、SNU601細胞、NCI-H2170細胞
OSK-1細胞系相關產(chǎn)品：REC-1細胞、Pro-5 Lec1.3c細胞、A-549細胞
Ca 9-22細胞系相關產(chǎn)品：Caco-2 BBe細胞、CHL細胞、CHP212細胞
Nb2a細胞系相關產(chǎn)品：CEM clone 7細胞、PIGI細胞、Kato-III細胞
NIH:OVCAR-10細胞系相關產(chǎn)品：RPTEC TERT1細胞、HONE-1細胞、MDA MB 175 VII細胞
COLO 320HSR細胞系相關產(chǎn)品：A 72細胞、OV90細胞、HHL-5細胞
OP9細胞系相關產(chǎn)品：SNU354細胞、P3X63 Ag8細胞、HCC-1187細胞
GM12878細胞系相關產(chǎn)品：KM-12細胞、COR-L26細胞、HDLM2細胞
Hs68細胞系相關產(chǎn)品：DMS 114細胞、OCI-LY-1細胞、M21細胞
Kit-225細胞系相關產(chǎn)品：PLC8024細胞、ST486細胞、NCIH209細胞
OVCAR3細胞系相關產(chǎn)品：BLO-11細胞、SNB.19細胞、NCI-H711細胞
Ca Ski epithelioid cells人宮頸癌腸轉移細胞系
M14細胞系相關產(chǎn)品：SK MEL-28細胞、T1-73細胞、Douglas Foster-1細胞
HMrSV5細胞系相關產(chǎn)品：CL11細胞、LWnt3A細胞、A10細胞
SPDC-CCL141細胞系相關產(chǎn)品：CCC-HEH-2細胞、H-2452細胞、KOSC-2 cl3-43細胞
HFF-1細胞系相關產(chǎn)品：MHCC 97-L細胞、PL 45細胞、786-O細胞
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