"MS751 epithelioid cells人子宮頸表皮癌細胞系 細胞背景資料:這株細胞是J. Sykes于1974年建立的(參考ATCC HTB-33)。有報告稱MS751細胞含有人乳頭狀瘤病毒18 (HPV-18)序列。[22995] [23180]后來發(fā)現MS751細胞包含HPV-45基因組的一部分,而其中E6/E7區(qū)域表達呈poly(A)+RNA的形式。[49721] 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質,對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應調節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 253J細胞系相關產品:GM3569細胞、Mouse Podocyte Clone-5細胞、RT4P細胞 NCI-SNU-475細胞系相關產品:PANC-02-03細胞、Madison細胞、BHP-10細胞 SCL I細胞系相關產品:UCW 100細胞、SF-295細胞、Centre Antoine Lacassagne-33細胞 細胞生長:貼壁 MS751 epithelioid cells人子宮頸表皮癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 最近在培養(yǎng)細胞時,發(fā)現其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來,很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細胞和你一樣,消化下來也是一團的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕,避免晃動。細胞生長挺快,那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能:一、細胞消化后吹打不均勻,造成細胞成團生長:二、細胞細化太過,細胞成片脫落,吹打時沒有受力點,細胞聚團生長。解決辦法:根據細胞生長的情況進行多次消化,將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內。貼壁細胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數次以打散細胞團塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間,若胰酶處理太久,容易造成細胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強,嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經驗:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細胞處理時間可適當放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。 細胞傳代方法:1:2傳代 MDA-MB-415細胞系相關產品:NCI.H23細胞、QSG7701細胞、H-1930細胞 MuM-2B細胞系相關產品:MNNG細胞、KYSE 70細胞、CL34細胞 IPLB-Sf21細胞系相關產品:OV-2008細胞、HNTEC細胞、KYSE-510細胞 CT26細胞系相關產品:H-EMC-SS細胞、GM03569B細胞、H-526細胞 639-V細胞系相關產品:PA-TU-8988S細胞、CAL27細胞、NCI-H1435細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系 MS751 epithelioid cells人子宮頸表皮癌細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣 造成實驗室細胞污染常見情況總結:細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術器械、離心機、冰箱等專用儀器設備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢! AD293細胞系相關產品:T-T細胞、MV4:11細胞、ID8/MOSEC細胞 6-10B細胞系相關產品:SK-ChA-1細胞、OVCA8細胞、SU-86-86細胞 MX1細胞系相關產品:BXPC3細胞、ASH-3細胞、Lu-65細胞 LSECs細胞系相關產品:NCI-H295細胞、QGY7701細胞、DHL10細胞 Y-79細胞系相關產品:MBT2細胞、DITNC1細胞、CX-1細胞 SUM52PE細胞系相關產品:AtT-20細胞、451Lu細胞、JM1細胞 ZR75-30細胞系相關產品:NCI-H1522細胞、SCC VII細胞、HEC1-B細胞 HT22細胞系相關產品:Ramos細胞、Kato-III細胞、MDA-MB453細胞 DoTc2 4510細胞系相關產品:COLO201細胞、SACC-83細胞、T-47-D細胞 alphaTC clone 6細胞系相關產品:L細胞、PK(15)細胞、Hs 683.T細胞 MS751 epithelioid cells人子宮頸表皮癌細胞系 NCI-SNU-886細胞系相關產品:SJSA-1細胞、MGC-803細胞、R 2 C細胞 QGY 7701細胞系相關產品:NCI H23細胞、HOPC細胞、MS1細胞 PG [Human lung carcinoma]細胞系相關產品:NCIH2009細胞、LWnt3A細胞、CL11細胞 CHP212細胞系相關產品:CTV1細胞、T-98細胞、Farage Original Line細胞 G401細胞系相關產品:PaTu-8988s細胞、GM03571細胞、H322細胞 PZ-HPV-7細胞系相關產品:NCI-SNU-216細胞、174xCEM.T2細胞、HEK-293FT細胞 PZ-HPV-7細胞系相關產品:NCI-SNU-216細胞、174xCEM.T2細胞、HEK-293FT細胞 H2228細胞系相關產品:Ocular Choroidal Melanoma-1細胞、N87細胞、210RCY3-Ag1.2.3細胞 JIMT1細胞系相關產品:SKMel-28細胞、CL40細胞、Calu-6細胞 H-2081細胞系相關產品:PK 15細胞、NuTu-19細胞、HCC-1569細胞 OVCAR3細胞系相關產品:BLO-11細胞、SNB.19細胞、NCI-H711細胞 TOV-112細胞系相關產品:SW-626細胞、RWPE2細胞、RCSMC細胞 NPC-TW039細胞系相關產品:Madison lung細胞、HCC-1954細胞、Ramos (RA)細胞 REC-1細胞系相關產品:NCI-H-82細胞、MDA-MB 361細胞、SY5Y細胞 JTC-39細胞系相關產品:H460細胞、OS-RC-2細胞、MOLT-4細胞 SV40-MES13細胞系相關產品:KRC Y細胞、G519細胞、149 PT細胞 TMK-1細胞系相關產品:MGHU3細胞、SF 295細胞、BOWES細胞 HSC-2細胞系相關產品:Hs-578-T細胞、EPC細胞、MPC-11細胞 MDA 231-LM2-4175細胞系相關產品:University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞、Ca761細胞、H719細胞 H-510細胞系相關產品:LC-2 ad細胞、FHL124細胞、SK-BR3細胞 SN12-PM6細胞系相關產品:Panc08.13細胞、CNE-1細胞、108CC15細胞 SUDHL-10細胞系相關產品:MDCC-MSB-1細胞、HPAC細胞、MDA-MB415細胞 H-660細胞系相關產品:P3X63細胞、WM266mel細胞、Y3-Ag123細胞 SW 1222細胞系相關產品:H-2029細胞、T. T細胞、CAL 51細胞 JVM-2細胞系相關產品:3T3-L1 ad細胞、Caco-2 BBe細胞、SaOS-2細胞 COR-L51細胞系相關產品:C26細胞、MC/9細胞、LM8細胞 HUT28細胞系相關產品:COLO 320 HSR細胞、KS-1 [Human glioblastoma]細胞、QSG7701細胞 Cattle chondrocytes細胞系相關產品:L5178YR細胞、S37細胞、P3JHR1細胞 MS1細胞系相關產品:H1522細胞、MS-751細胞、YES-2細胞 Sci-1細胞系相關產品:Anip-973細胞、EC-9706細胞、ECC 10細胞 PTK 2細胞系相關產品:COLO 699細胞、NS1-Ag4/1細胞、hCMEC/D3細胞 Mel-624細胞系相關產品:CCK81細胞、OCI-Ly8細胞、KYSE-30細胞 NS1-Ag4細胞系相關產品:NCI-H2196細胞、OCI-Ly 3細胞、SW-626細胞 HANK細胞系相關產品:BJAB-1細胞、HCT/FU細胞、SUP-B1細胞 LCLC103H細胞系相關產品:CHO-S細胞、OAC-P4C細胞、MDA-MB-134細胞 NRK52E細胞系相關產品:HCC-1500細胞、SK-MEL-2細胞、SKNEP1細胞 DV90細胞系相關產品:SRA01/04 (HLE)細胞、RenCa細胞、373 MG細胞 GM00346細胞系相關產品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞、BT474細胞、HFL-1細胞 GM00346細胞系相關產品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞、BT474細胞、HFL-1細胞 KU-812F細胞系相關產品:E304細胞、LAN-6細胞、BpRc1細胞 OVMANA細胞系相關產品:SK-MEL-5細胞、LIXC-002細胞、PA317細胞 Y1細胞系相關產品:CaSki細胞、28SC細胞、LS-123細胞 P3/NS1/1-Ag4-1細胞系相關產品:EU-3細胞、GM 2132細胞、SHP-77細胞 NB1RGB細胞系相關產品:SK-MEL-2-LUC細胞、H-1819細胞、SHIN-3細胞 PNT-1A細胞系相關產品:SV40 MES 13細胞、A9 (Hamprecht)細胞、GMK,BSC-1細胞 MEG-01細胞系相關產品:NCI-H165細胞、CAL 33細胞、LOU-NH91細胞 RD-ES細胞系相關產品:BSC1細胞、H-810細胞、OCI-AML-4細胞 P3X63細胞系相關產品:GM3570細胞、L6565細胞、TE 354.T細胞 MHCC97H細胞系相關產品:Melanoma 14細胞、M-O7e細胞、H2030細胞 Tb1.Lu細胞系相關產品:CPA47細胞、H-1869細胞、L363細胞 KCL22細胞系相關產品:GC9811-P細胞、EC-GI細胞、Hs27F細胞 MS751 epithelioid cells人子宮頸表皮癌細胞系 H-1355細胞系相關產品:CCC-HIE-2細胞、BERH-2細胞、UCLA NPA871細胞 373MG細胞系相關產品:624 MEL細胞、Tu-177細胞、H1650細胞 CCC-ESF-1細胞系相關產品:H1781細胞、LO2細胞、EC-109細胞 MX1細胞系相關產品:BXPC3細胞、K1細胞、ACC-M細胞 "
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