"OS-RC-2 epithelioid cells人腎癌細胞系 細胞背景資料:來源于日本人的腎臟腫瘤細胞。 可以移植到裸鼠。 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導(dǎo)致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間,轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇,結(jié)果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復(fù)蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。 DU145細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKN細胞、Mc Coy細胞、1.1B4細胞 NSH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:THC-8307細胞、LA-N-6細胞、HEK 293 EBNA細胞 YES2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB175細胞、WM2664細胞、H-295R細胞 細胞生長:貼壁 OS-RC-2 epithelioid cells人腎癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 冷凍細胞解凍程序:依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因?qū)嶒炐枰仨氂兴煌瑫r,務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細胞適應(yīng)后,方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對細胞而言差異極大,請務(wù)必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度,于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內(nèi)之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言,1%以下之冷凍保護劑DMSO,不會對細胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細胞中去除,待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細胞分化之細胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細胞均勻混合后,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 細胞傳代方法:1:2傳代 NCI-HUT-125細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos.2G6.4C10細胞、Jurkat E6細胞、C33細胞 SU-DH-L5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC 61細胞、RetroPack PT67細胞、EBTr細胞 WM-239A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 410細胞、BRL-3A細胞、Mel-624細胞 TCam 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-320-HSR細胞、OCI-Ly 7細胞、LNT-229細胞 7860細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF II細胞、IMR90細胞、RS411細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 OS-RC-2 epithelioid cells人腎癌細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣 培養(yǎng)細胞真的不難,最關(guān)鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數(shù),傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。 HD11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM05887細胞、RPMI-6666細胞、SKNDZ細胞 Detroit 562細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL6細胞、PaTu 8988s細胞、Hs746T細胞 COLO 206F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA 802細胞、CCD 966 SK細胞、Hi-five細胞 JROECL 33細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOCF細胞、BHK細胞、C3H10T1/2CL8細胞 P3HR-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CA-OV-3細胞、REC 1細胞、KMS11細胞 Hs600T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNK1細胞、Hs832T細胞、U20-S細胞 HOS TE 85細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293AD細胞、LI7細胞、MOVAS-1細胞 NCI-H2029細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ku812細胞、P30 OHK細胞、SK-NEP-1細胞 P31FUJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL-16細胞、ME1細胞、FU-OV-1細胞 SK-Col-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1838細胞、NIE-115細胞、TYK-nu細胞 OS-RC-2 epithelioid cells人腎癌細胞系 Caco-2/ATCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1944細胞、R D細胞、SUD4細胞 CEM-0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:33604細胞、NCIH1341細胞、NB1-RGB細胞 D283細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL3細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞、Det 562細胞 MDA-MB436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-795細胞、X63Ag8.653細胞、Colon 38細胞 NCIH2122細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN-382細胞、OVTOKO細胞、NCIH1581細胞 C8D1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1930細胞、HELA-GFP細胞、Dunn LM8細胞 U87MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OE-19細胞、EFM-192C細胞、BHK 21細胞 HARA-B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUCCT1細胞、MARC145細胞、DR2R1610細胞 IGROV 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDF-a細胞、NCI-Hut 125細胞、OLN-93細胞 FHC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HELA-GFP細胞、T-24細胞、S91細胞 S-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs578Bst細胞、Vero 76 clone E-6細胞、QGY 7701細胞 Hs888Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 829細胞、Y79細胞、SUM52PE細胞 SNU638細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH:OVCAR3細胞、SP2-0-Ag14細胞、AD293細胞 IEC 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H865細胞、H4細胞、Hs 606.T細胞 TF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Chang liver細胞、Alexander cells細胞、hTERT RPE1細胞 U-2-OS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AM-38細胞、NCI-H2087細胞、SUM149-PT細胞 MV4;11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Transformed Human Liver Epithelial-2細胞、LICR-HN6細胞、PA1細胞 G401細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaTu-8988s細胞、GM03571細胞、H322細胞 HCC-1171細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-10A細胞、LNCaP.FGC細胞、FDC-P1細胞 SF-767細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU251細胞、IOSE-Mar細胞、CT 26細胞 OVCAR433細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL/FU細胞、HBZY-1細胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞 MT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞、SKNO-1細胞、RPTEC TERT1細胞 LUDLU-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP62細胞、SY5Y細胞、NCIH1734細胞 NCI/ADR-RES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FM-88細胞、DC 2.4細胞、L-cell細胞 HDQP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tissue Culture-1細胞、HuP-T4細胞、Ect1/E6E7細胞 MAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH820細胞、TF1細胞、RBL細胞 NCIH2107細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H295R細胞、CD-18細胞、Hs 822.T細胞 H520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EoL-1 cell細胞、NCIH660細胞、MLA-144細胞 SHP-77細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NG108-15細胞、COLO-679細胞、Hs-27細胞 COS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OACP4C細胞、H-2172細胞、CL-34細胞 ketr 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTSMC細胞、Granta-519細胞、OVCAR 4細胞 H-716細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL-IU細胞、KYSE140細胞、MGH-U3細胞 MCF7-GFP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/NS-1細胞、SW 1353細胞、CCRF-CEM C1細胞 MAntle cell VERona-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL88細胞、PASMCS細胞、Tu686細胞 CTLL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa-S3細胞、CCRF SB細胞、NCI-H125細胞 SK-HEP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKM-1細胞、MC3T3-E1細胞、rRMECs細胞 NS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-889細胞、OVCAR-5細胞、AN3細胞 NCIH3255細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EAhy 926細胞、A-375細胞、VK2 (E6/E7)細胞 SK_N_FI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMUC1細胞、SUDHL4細胞、HMC-1細胞 AQ-Mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM149PT細胞、NCI522細胞、Jurkat E6.1細胞 LAN-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H82sclc細胞、207細胞、CFPAC細胞 S91細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM192細胞、Walker-256細胞、MDAMB134細胞 P3HR1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU119細胞、KYSE 450細胞、Clone 166細胞 RAMSCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H920細胞、DHL-6細胞、A3細胞 Wien 133細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1404細胞、KLM-1細胞、MNNG細胞 GM01232E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3.times.63 Ag8.653細胞、CATH.a細胞、RS 4;11細胞 KMS26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kuramochi細胞、NCI-441細胞、3T3 Swiss Albino細胞 MIO-M1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL12細胞、OCI/AML2細胞、ZR7530細胞 769-P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:143B細胞、MA 104細胞、RBE細胞 IOSE-80細胞系相關(guān)產(chǎn)品:mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞、LO2細胞、H1781細胞 NCIH1703細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-10A細胞、Hs 683細胞、A-172MG細胞 OS-RC-2 epithelioid cells人腎癌細胞系 SKN-SH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs606細胞、GOS-3細胞、B16-F0細胞 Hepa1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Dx5細胞、H-1522細胞、Panc 5.04細胞 Hs 729.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-820細胞、H-2141細胞、UCLA RO-81A-1細胞 COLO 206F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA 802細胞、AtT20細胞、Scott細胞 "
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