"SW579 epithelioid cells人甲狀腺鱗癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:在裸鼠中成瘤(產(chǎn)生三級惡性紡錘狀巨細(xì)胞瘤)。 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng):細(xì)胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯(cuò),就是記得到時(shí)間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細(xì)胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢?細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細(xì)胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細(xì)胞:補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長至70%單層時(shí)收獲細(xì)胞,計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù),用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時(shí))內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個(gè)最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞,以免其中的一個(gè)液氮罐出現(xiàn)問題!細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點(diǎn):當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時(shí),有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要;其實(shí),細(xì)胞復(fù)蘇只是一個(gè)簡單的實(shí)驗(yàn),不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護(hù)目鏡;盡量降低DMSO對細(xì)胞的損傷等等。 SK-NEP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL II細(xì)胞、Dunn LM8細(xì)胞、COLO-829細(xì)胞 JROECL 33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOCF細(xì)胞、BHK細(xì)胞、C3H10T1/2CL8細(xì)胞 COR-L 105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP212細(xì)胞、MDCKII細(xì)胞、HCCLM3細(xì)胞 細(xì)胞生長:貼壁 SW579 epithelioid cells人甲狀腺鱗癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 冷凍細(xì)胞解凍程序:依據(jù)細(xì)胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同時(shí),務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行所需之實(shí)驗(yàn)。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對細(xì)胞而言差異極大,請務(wù)必依據(jù)細(xì)胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細(xì)胞種類和濃度,于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細(xì)胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內(nèi)之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細(xì)胞而言,1%以下之冷凍保護(hù)劑DMSO,不會對細(xì)胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細(xì)胞中去除,待第二天確定細(xì)胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細(xì)胞分化之細(xì)胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細(xì)胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細(xì)胞均勻混合后,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 細(xì)胞傳代方法:1:2傳代 RKO-AS45-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0827細(xì)胞、MDA-MB-468-RED細(xì)胞、OCI Ly19細(xì)胞 HCC0038細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-373MG細(xì)胞、Hs688(A)T細(xì)胞、J-774細(xì)胞 P-388D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV1063細(xì)胞、L-Wnt3A細(xì)胞、Neuro 2a細(xì)胞 T 84細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SACC83細(xì)胞、Strain L-929細(xì)胞、BCP1細(xì)胞 HIT.T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M3 Clone M-3細(xì)胞、H7721細(xì)胞、Capan 1細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 SW579 epithelioid cells人甲狀腺鱗癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:貼壁生長 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞樣 常見細(xì)胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因?yàn)楹窟^低會導(dǎo)致細(xì)胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時(shí)須更換培養(yǎng)基?視細(xì)胞生長密度而定,或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時(shí)間,按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換;3)購買的復(fù)蘇細(xì)胞,為何會有脫落?因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少,大都是因?yàn)殡x心過程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性損傷,以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí),均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。 EFO27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2171細(xì)胞、H1417細(xì)胞、Balb/c 3T3細(xì)胞 786-0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH716細(xì)胞、TOG細(xì)胞、NCIH2291細(xì)胞 LNCaP-FGC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL26細(xì)胞、NCI-H250細(xì)胞、RA 1細(xì)胞 RBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGROV-1細(xì)胞、HEK 293 c18細(xì)胞、NS1-Ag4/1細(xì)胞 Centre Antoine Lacassagne-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mv 1 Lu (NBL-7)細(xì)胞、High 5細(xì)胞、CD 18細(xì)胞 HeLa-229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293T/17細(xì)胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細(xì)胞、SP2/0 Ag-14細(xì)胞 Michigan Cancer Foundation-12A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL-12細(xì)胞、HSC/mHSC細(xì)胞、CAL27細(xì)胞 CEF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細(xì)胞、343 MG細(xì)胞、MALME 3M細(xì)胞 U87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC1005細(xì)胞、ECC10細(xì)胞、RCM1細(xì)胞 NCI-H87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:7404細(xì)胞、RH-35細(xì)胞、COLO824細(xì)胞 SW579 epithelioid cells人甲狀腺鱗癌細(xì)胞系 C-4 I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細(xì)胞、THP-1(ATCC)細(xì)胞、CCRF/CEM細(xì)胞 LIM1215細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC44細(xì)胞、HL60細(xì)胞、MDAMB468細(xì)胞 PLA801-95D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJSA細(xì)胞、Panc05.04細(xì)胞、MPC 11細(xì)胞 M-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW626細(xì)胞、NIH 3T6細(xì)胞、BNL-CL.2細(xì)胞 BAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C28/I2細(xì)胞、H295細(xì)胞、LK2細(xì)胞 NCIH1092細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC-JF細(xì)胞、D283細(xì)胞、SK-OV-433細(xì)胞 NCIH1092細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC-JF細(xì)胞、D283細(xì)胞、SK-OV-433細(xì)胞 MDCK.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-10A細(xì)胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細(xì)胞、Hep G2-Luc細(xì)胞 LL/2 (LLC1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa229細(xì)胞、ROS 17/2.8細(xì)胞、LAN6細(xì)胞 Calu6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ra #1細(xì)胞、RPMI8402細(xì)胞、HEK-A細(xì)胞 RPMI No. 1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2081細(xì)胞、MDA-MB-231 #4175細(xì)胞、SK-OV-3細(xì)胞 BSC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Granta-519細(xì)胞、SNU-119細(xì)胞、H69/P細(xì)胞 4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR433細(xì)胞、MDCK II細(xì)胞、Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞 BEP2D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT102細(xì)胞、HFL-I細(xì)胞、LS-1034細(xì)胞 HBVP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1793細(xì)胞、Panc-8_13細(xì)胞、Reuber H35細(xì)胞 NCI-SNU-423細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE2細(xì)胞、JKT-1細(xì)胞、PMVEC細(xì)胞 BV-173細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 940.T細(xì)胞、Mv1.Lu細(xì)胞、H676細(xì)胞 NS1/1-Ag4.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JEG-3細(xì)胞、SW 839細(xì)胞、MCF-7ADR細(xì)胞 H2347細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ChaGo-K1細(xì)胞、P388細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-148細(xì)胞 SK-N-BE(1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AZ-521細(xì)胞、NOR-10細(xì)胞、RAMOS2G64C10細(xì)胞 NCIADRRES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RWPE-1細(xì)胞、CEL細(xì)胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細(xì)胞 MD Anderson-Metastatic Breast-330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RINm-5F細(xì)胞、3T3-Swiss albino細(xì)胞、EBC1細(xì)胞 Bowes melanoma cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1187細(xì)胞、Panc327細(xì)胞、QGY-7701細(xì)胞 H4-II-EC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-190細(xì)胞、SKRC-20細(xì)胞、T241細(xì)胞 SUM-52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AG 9細(xì)胞、B16/F0細(xì)胞、HCC 2185細(xì)胞 SW1088細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63NS1細(xì)胞、SUDHL-2細(xì)胞、SW-1573細(xì)胞 NCTC929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OAW-42細(xì)胞、GM07404細(xì)胞、SK-N-BE(1)n細(xì)胞 C17.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U 138 MG細(xì)胞、Eca109細(xì)胞、U266S細(xì)胞 Mevo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sci-1細(xì)胞、BxPC-3細(xì)胞、MDA2B細(xì)胞 NCI-H2228細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEM細(xì)胞、CaES-17細(xì)胞、Jiyoye(P-2003)細(xì)胞 H-1155細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:143BTK-細(xì)胞、LN 229細(xì)胞、hADSCs細(xì)胞 L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PMVEC細(xì)胞、DU-4475細(xì)胞、NCI-SNU-668細(xì)胞 G422細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKGT2細(xì)胞、B16F1細(xì)胞、H-2170細(xì)胞 FUOV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO320 DM細(xì)胞、MonoMac 6細(xì)胞、MNNGHOS細(xì)胞 MDA-MB-231-GFP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EJ細(xì)胞、LuCL4細(xì)胞、BTI-Tn-5B1-4細(xì)胞 NCI-1155細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM05372細(xì)胞、MCF7-GFP細(xì)胞、102PT細(xì)胞 MD Anderson-Metastatic Breast-330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RINm-5F細(xì)胞、3T3-Swiss albino細(xì)胞、EBC1細(xì)胞 MCF/Adr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE(2)M-17細(xì)胞、BEL-7404細(xì)胞、CCC-ESF-1細(xì)胞 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cells人甲狀腺鱗癌細(xì)胞系 SKNBE(2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:786-0WT細(xì)胞、HEL細(xì)胞、MDCK-2細(xì)胞 B16F1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:870細(xì)胞、H2052_MM細(xì)胞、SK-N-BE(2)C細(xì)胞 SKG3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE29細(xì)胞、SK-CO-1細(xì)胞、Ca761細(xì)胞 LNCaP-FGC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL26細(xì)胞、SCC7細(xì)胞、HLMVEC細(xì)胞 "
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