"MHCC97-L epithelioid cells低轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:來源于中山醫(yī)院,生長(zhǎng)較緩慢
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
貼壁細(xì)胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時(shí)不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時(shí),從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和,對(duì)細(xì)胞損傷較小,但是,價(jià)格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì),對(duì)細(xì)胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時(shí)應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細(xì)胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個(gè)人的使用經(jīng)常覺得對(duì)細(xì)胞的損傷比較大,但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實(shí)比較強(qiáng)。5、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時(shí)。無法使組織上的細(xì)胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細(xì)胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點(diǎn)是:對(duì)細(xì)胞損傷小,不需要中止或洗細(xì)胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細(xì)胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺(tái)上,很快細(xì)胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細(xì)胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。
R1610細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H510細(xì)胞、Murine Thymic Epithelial Cell line 1細(xì)胞、HUT 28細(xì)胞
HPMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hela-mock細(xì)胞、GEO細(xì)胞、FAK+/+細(xì)胞
HS-294T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HF-91細(xì)胞、Hep 2細(xì)胞、LIXC002細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
MHCC97-L epithelioid cells低轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請(qǐng)勿超過一個(gè)月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時(shí)體積會(huì)增加約10%,必須預(yù)留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會(huì)變得混濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會(huì)因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會(huì)影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因?yàn)闀?huì)阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點(diǎn)”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會(huì)顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點(diǎn)”,常會(huì)誤認(rèn)為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會(huì)使此沈淀物增多,更會(huì)誤認(rèn)為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細(xì)菌之培養(yǎng)基檢測(cè),又沒有污染。一般而言,此小黑點(diǎn)應(yīng)不會(huì)影響細(xì)胞之生長(zhǎng),但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號(hào)的血清。
細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
NCI-SNU-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRMC細(xì)胞、RIN-14B細(xì)胞、THC-8307細(xì)胞
CALU1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LUDLU1細(xì)胞、NCI-HUT-69細(xì)胞、H1770細(xì)胞
G402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLP2細(xì)胞、TE353.SK細(xì)胞、PANC403細(xì)胞
P3/NS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3LL細(xì)胞、SUM-102PT細(xì)胞、IPLB-Sf21細(xì)胞
EFM19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC78細(xì)胞、MC3T3細(xì)胞、SKRC-52細(xì)胞
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
MHCC97-L epithelioid cells低轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣
造成實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞污染常見情況總結(jié):細(xì)胞培養(yǎng)中最常見污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會(huì)造成細(xì)胞污染呢?我們根據(jù)常見細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時(shí)間,有人已經(jīng)用超凈臺(tái)四個(gè)多小時(shí),不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗(yàn);2)器材或者溶液很久沒用,未檢測(cè)是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺(tái)不點(diǎn)酒精燈;點(diǎn)了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗(yàn);4)不帶手套,徒手操作;5)細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機(jī)、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實(shí)驗(yàn)服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細(xì)胞使用。培養(yǎng)細(xì)胞過程中使用的所有實(shí)驗(yàn)用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺(tái)和桌面,東西太多太亂:超凈臺(tái)不是儲(chǔ)物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺(tái)!這樣就會(huì)有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細(xì)胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細(xì)胞!一不小心“飄”進(jìn)你的細(xì)胞培養(yǎng)板里,細(xì)胞就會(huì)養(yǎng)的不好,啥時(shí)候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細(xì)胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個(gè)恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染,如果有而且好幾個(gè)板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個(gè)大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個(gè)月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔?xì)胞人多口雜,難管理】在傳代細(xì)胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗(yàn)在無菌條件下操作。出入試驗(yàn)室,實(shí)驗(yàn)服當(dāng)風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細(xì)胞污染;超凈臺(tái)做實(shí)驗(yàn)時(shí),喜歡說話聊著做試驗(yàn),要是還不帶口罩,里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞呢!
AA-Mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1463細(xì)胞、L 929細(xì)胞、HT-1080細(xì)胞
LL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMNSAH-DF 1細(xì)胞、HL-60細(xì)胞、SW 1116細(xì)胞
NCIH460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc02-H0細(xì)胞、COLO-357細(xì)胞、NCIH292細(xì)胞
T2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-38細(xì)胞、Mel-624細(xì)胞、Hs-695-T細(xì)胞
QBC(939)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC(Human Schwann)細(xì)胞、ARPE-19細(xì)胞、MuM-2C細(xì)胞
MDA-436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKOAS451細(xì)胞、BNL-CL.2細(xì)胞、HUT28細(xì)胞
SACCLM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293細(xì)胞、HCT/Taxo1細(xì)胞、Det. 562細(xì)胞
MC/9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A7r5細(xì)胞、H-1355細(xì)胞、CMEC/D3細(xì)胞
NCI-SNU-620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-441細(xì)胞、MKN 28細(xì)胞、MHCC97-L細(xì)胞
Calf Pulmonary Artery Endothelial細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GTL16細(xì)胞、T47-D細(xì)胞、MDA-468細(xì)胞
MHCC97-L epithelioid cells低轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞系
GL-261細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-746T細(xì)胞、NCI-H1623細(xì)胞、CCLP-1細(xì)胞
YT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC細(xì)胞、HCEpiC細(xì)胞、SKNMC細(xì)胞
THPI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(2C)細(xì)胞、NBL-12細(xì)胞、HS940細(xì)胞
U118細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNE-2細(xì)胞、GM17346細(xì)胞、MRAEC細(xì)胞
SK-N-BE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS 17/2.8細(xì)胞、CCD841CoN細(xì)胞、KYSE-410細(xì)胞
AN3 CA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BV-2細(xì)胞、Ishikawa細(xì)胞、COLO 679細(xì)胞
AN3 CA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BV-2細(xì)胞、Ishikawa細(xì)胞、COLO 679細(xì)胞
F-81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIC細(xì)胞、WM266細(xì)胞、X63細(xì)胞
Hs739T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 7細(xì)胞、B-cell with DC Morphology細(xì)胞、H-2171細(xì)胞
RASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly8細(xì)胞、TPC-1細(xì)胞、WSU-DLCL-2細(xì)胞
FO [Mouse myeloma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P31/Fujioka細(xì)胞、Colo16細(xì)胞、MHH-CALL-2細(xì)胞
OLN 93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Co320細(xì)胞、NCI-H2452細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細(xì)胞
SW 962細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly07細(xì)胞、MMAc.SF細(xì)胞、SNU-119細(xì)胞
TGW-I-nu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOK細(xì)胞、N1E-115細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細(xì)胞
WEHI 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H292細(xì)胞、Hs27F細(xì)胞、Clone 15 HL-60細(xì)胞
HCV29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GS9L細(xì)胞、HCC-1171細(xì)胞、WEHI 164細(xì)胞
A431細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS688AT細(xì)胞、H740細(xì)胞、HCC 94細(xì)胞
Caov-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BLO 11細(xì)胞、LUDLU 1細(xì)胞、SUM-52細(xì)胞
L 363細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI 3B細(xì)胞、MDCK.2細(xì)胞、LU451細(xì)胞
GTL 16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FO [Mouse myeloma]細(xì)胞、UPCISCC154細(xì)胞、MDAMB436細(xì)胞
Hs863T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1836細(xì)胞、LC-1細(xì)胞、RDES-1細(xì)胞
OVCAR-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IAR20細(xì)胞、NK-92MI細(xì)胞、Hs 895.T細(xì)胞
H-1688細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA330細(xì)胞、LLC-PK-1細(xì)胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細(xì)胞
LL/2(LLc1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL/IU細(xì)胞、MDA-MB-361細(xì)胞、SW 1463細(xì)胞
DF1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-468細(xì)胞、H838細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞
Institute for Medical Research-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CACO2細(xì)胞、NCIH2009細(xì)胞、NCI-H322T細(xì)胞
Th17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIN-6細(xì)胞、SHIN3細(xì)胞、Eph4 1424細(xì)胞
MB231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN 45細(xì)胞、KNS-81細(xì)胞、NRK 49F細(xì)胞
EFM192細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL8細(xì)胞、Hs 578.Bst細(xì)胞、G-292, clone A141B1細(xì)胞
LU-65M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OE19細(xì)胞、LL/2細(xì)胞、NCIH1436細(xì)胞
JKT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hi-5細(xì)胞、PC3M-1E8細(xì)胞、CAL 120細(xì)胞
NCI-SNU-449細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-330細(xì)胞、D-341Med細(xì)胞、EOC20細(xì)胞
PGBE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Simpson細(xì)胞、Clone 15 HL-60細(xì)胞、C6661細(xì)胞
HCC 2185細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1930細(xì)胞、P3X63Ag8-6-5-3細(xì)胞、N2a細(xì)胞
RAW2647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30/OHK細(xì)胞、0V-1063細(xì)胞、SNU520細(xì)胞
87MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJA-B-1細(xì)胞、SK-RC 42細(xì)胞、GA10細(xì)胞
H-2405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lu-99A細(xì)胞、WiDr細(xì)胞、WM115F細(xì)胞
NS1-Ag4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2196細(xì)胞、OCI-Ly 3細(xì)胞、SW-626細(xì)胞
Panc 08.13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AZ 521細(xì)胞、HKF細(xì)胞、HSAS1細(xì)胞
RPMI-8226S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCSMC細(xì)胞、C32 mel細(xì)胞、HT115細(xì)胞
MCF-7/ADR-RES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PT67細(xì)胞、B16-F0細(xì)胞、MDAMB-231細(xì)胞
HCA 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-292細(xì)胞、GC1-SPG細(xì)胞、AR4-IP細(xì)胞
Jurkat 77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QBI-293A細(xì)胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細(xì)胞、Kupffer細(xì)胞
HS688AT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OPM2細(xì)胞、COV 504細(xì)胞、Adeno 293細(xì)胞
LNT-229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1435細(xì)胞、MAVER-1細(xì)胞、C-33A細(xì)胞
NCI-H441細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-366細(xì)胞、MN 60細(xì)胞、DITNC1細(xì)胞
Daoy細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMB-17細(xì)胞、UMRC-2細(xì)胞、Rat-2細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM17219細(xì)胞、UACC-812細(xì)胞、D-324 Med細(xì)胞
KHYG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3細(xì)胞、GM00346細(xì)胞、BALB 3T3 clone A31細(xì)胞
U-118 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DH82細(xì)胞、NTHY-ORI3.1細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細(xì)胞
SCCVII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-373MG ATCC細(xì)胞、Vx-2細(xì)胞、SiHa細(xì)胞
MHCC97-L epithelioid cells低轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞系
ES-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML-2細(xì)胞、GMK,BSC-1細(xì)胞、TOV-112細(xì)胞
HN4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA4細(xì)胞、OAW-42細(xì)胞、OKT 3細(xì)胞
SCL-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-266-4細(xì)胞、HRCEC細(xì)胞、MDAPC2B細(xì)胞
NCIH460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc02-H0細(xì)胞、4T1-A細(xì)胞、Walker/LLC-WRC256細(xì)胞
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