"HT-29 epithelioid cells人結腸癌細胞系
細胞背景資料:該細胞是1964年由FoghJ用移植培養(yǎng)方法和含15%FBS的F12培養(yǎng)液從原發(fā)性腫瘤分離的。近來,已建株的培養(yǎng)細胞用含血清的McCoy's5a培養(yǎng)基培養(yǎng)。該細胞系在裸鼠中成瘤,也能在類固醇處理的地鼠中成瘤。該細胞可合成IgA、CEA、TGFβ結合蛋白和黏液素;表達尿激酶受體,但沒有檢測到血漿酶原活性;不表達CD4,但細胞表面表達半乳糖神經(jīng)酰胺(HIV的可能替代受體)。該細胞系癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、Myb、sis、fos陽性;p53基因過表達,并且在273位密碼子處發(fā)
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞復蘇相關注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉速和時間,轉的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇,結果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結為復蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候對一般細胞沒有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
H4-IIE-C3細胞系相關產品:CAL 27細胞、Human Embryonic Kidney 293細胞、Walker-Ca.256細胞
NCI-SNU-620細胞系相關產品:NCI-441細胞、MKN 28細胞、MHCC97-L細胞
Mahlavu細胞系相關產品:Sp2/0-Ag14細胞、MB468細胞、HO-1-N-1細胞
細胞生長:貼壁
HT-29 epithelioid cells人結腸癌細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代的一般方法:開始細胞傳代前,仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細胞(單層細胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細胞,挑選生長狀態(tài)良好,細胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內,加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細胞;先用PBS洗液沖洗細胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細胞瓶內加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細胞培養(yǎng)液重復吹打一次后分裝,然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。
細胞傳代方法:1:2傳代
Mouse INsulinoma 6細胞系相關產品:U251MG細胞、H1436細胞、WI38細胞
Mel-MeWo細胞系相關產品:UK Pan-1細胞、K562細胞、P3HR1-BL細胞
MeWo細胞系相關產品:OCI-Ly3細胞、HBVSMC細胞、OPM-2細胞
H1876細胞系相關產品:22Rv-1細胞、Mo7e細胞、GC9811-P細胞
CAL 12細胞系相關產品:PTK2細胞、HO8910/PM細胞、IPLB-SF 21細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HT-29 epithelioid cells人結腸癌細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
細胞形態(tài)特性:上皮樣
培養(yǎng)細胞真的不難,最關鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數(shù),傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
QSG7701細胞系相關產品:SKUT-1細胞、CCRF-SB細胞、PGBE1細胞
ECV-304細胞系相關產品:National Medical Center-Glioma 1細胞、F56 [Human neoplasm]細胞、SDBMSC細胞
SK-MEL28細胞系相關產品:Hs 606.T細胞、Hs863T細胞、FRTL-5 Cl 2細胞
MC3T3-E1 Subclone 14細胞系相關產品:P3/X63/Ag8.653細胞、FLS細胞、DMS 53細胞
FL83B細胞系相關產品:H847細胞、SW 837細胞、WM266-4細胞
MDA-MB-435 S細胞系相關產品:MDA231-LM2細胞、DHL6細胞、INS1E細胞
Mono Mac 6細胞系相關產品:CCD-841CoN細胞、Walker-Ca.256細胞、Hs 578Bst細胞
Y3-Ag 1.2.3細胞系相關產品:0V-1063細胞、DU_145細胞、ECC-10細胞
U-138-MG細胞系相關產品:SK-GT-2細胞、HNSC細胞、RIN-m5F細胞
451-LU細胞系相關產品:U-138 MG細胞、LY-R細胞、HOP92細胞
HT-29 epithelioid cells人結腸癌細胞系
L-M (TK-)細胞系相關產品:Sp2/0細胞、SKGT2細胞、SKG IIIa細胞
COLO-320-HSR細胞系相關產品:OVCA 433細胞、TERT-RPE1細胞、RPTEC/TERT1細胞
NCI-H2170細胞系相關產品:Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞、BHT101細胞、COLO-824細胞
HCC-1833細胞系相關產品:Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞、Panc 5.04細胞、HOCF細胞
H-1703細胞系相關產品:Porcine Kidney-13細胞、IOSE 80細胞、U343MG細胞
SW954細胞系相關產品:KNS81細胞、MIA-Pa-Ca-2細胞、HCC15細胞
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BNCL-2細胞系相關產品:CAKI 2細胞、QGY-7701細胞、A72細胞
Roswell Park Memorial Institute 1846細胞系相關產品:PLC PRF 5細胞、HuT-102細胞、GM02219細胞
LC-2/ad細胞系相關產品:TE-85 clone 5細胞、SDBMSC細胞、AG 9細胞
SNU761細胞系相關產品:NCIH1694細胞、H1755細胞、Bac 1.2F5細胞
WERI-Rb 1細胞系相關產品:C4-2細胞、RK13細胞、Y3-Ag1,2,3細胞
GM2219C細胞系相關產品:AK細胞、HEK 293-EBNA細胞、Loucy細胞
AMC-HN-8細胞系相關產品:BEL7405細胞、HMSC細胞、SKMES-1細胞
624mel細胞系相關產品:COLO206細胞、K-562細胞、HUT-28細胞
P3X63-Ag8.653細胞系相關產品:8226/S細胞、PC14細胞、OV3121細胞
TM-3細胞系相關產品:LS174細胞、3T3-A31細胞、746T細胞
Mino細胞系相關產品:EoL-1-cell細胞、LM6細胞、RPMI.8226細胞
NCI-H929細胞系相關產品:S3-HeLa細胞、Glioma 261細胞、NCI-H865細胞
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A2780S細胞系相關產品:OE-33細胞、3T3 clone A31細胞、WSU-DLCL2細胞
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H-211細胞系相關產品:SUM 190細胞、HT1197細胞、CEM C7細胞
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BEL-7405細胞系相關產品:H-1793細胞、OSKM-1細胞、Kit225/K6細胞
PC-10細胞系相關產品:NCI-HUT-69細胞、NCIH2591細胞、P3X63NS1細胞
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PC12(高分化)細胞系相關產品:Oregon J-111細胞、HO-1-N-1細胞、PC3細胞
H-2029細胞系相關產品:NCTC-929細胞、UM-UC3細胞、SK MES 1細胞
EBNA-293細胞系相關產品:SKNBE(1)細胞、QBC(939)細胞、GP5d細胞
BSC-40細胞系相關產品:MC/9細胞、WiDrTC細胞、ANA1細胞
TOV-112細胞系相關產品:SW-626細胞、RWPE2細胞、RCSMC細胞
SCC-7細胞系相關產品:NCIH2052細胞、COLO 320 DM細胞、SNG-M細胞
A2780/Taxol細胞系相關產品:RT112細胞、OVMANA細胞、HSC/mHSC細胞
NCI-H774細胞系相關產品:UMUC14細胞、BE2_C細胞、CCC-HEL-1細胞
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T-T細胞系相關產品:CWR22-Rv1細胞、32D clone3細胞、SBC-5細胞
MPC-5細胞系相關產品:NCI-SNU-886細胞、NCIH1703細胞、MOLM-14細胞
HCT116細胞系相關產品:Rat podocyte細胞、MKN 45細胞、SK-N-BE(2)C細胞
RL952細胞系相關產品:MV-4:11細胞、IA-LM細胞、Sf-21細胞
AU 565細胞系相關產品:Det 562細胞、OCM1細胞、WC00097細胞
SUM52PE細胞系相關產品:AtT-20細胞、451Lu細胞、JM1細胞
HEK (AD293)細胞系相關產品:WI 38細胞、HT 1197細胞、BAEC細胞
RCC-10RGB細胞系相關產品:Caco-2細胞、HCC0038細胞、NHLF細胞
HL 60細胞系相關產品:SW 948細胞、B-104細胞、RERFLCMS細胞
PIEC細胞系相關產品:SK-SH-SY5Y細胞、GC-1 spg細胞、WiDr-TC細胞
GM03320D細胞系相關產品:TK.10細胞、HLEB3細胞、RH35細胞
HT-29/CX-1細胞系相關產品:231-luc細胞、PC-3/M細胞、HL60細胞
HT-29 epithelioid cells人結腸癌細胞系
NCIH1648細胞系相關產品:NRK-49F細胞、Hs343T細胞、NS-1細胞
MCCAR細胞系相關產品:TGHAVSMC細胞、SK.OV.3細胞、FCCH1018細胞
H-920細胞系相關產品:JVM3細胞、NCI660細胞、CHP 126細胞
SK-MEL28細胞系相關產品:Hs 606.T細胞、H4細胞、KYSE 70細胞
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關鍵字: HT-29 epithelioid cells人結腸癌細胞系
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