"CESS Cell:人急性髓系白血病細胞系
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣
細胞生長：懸浮
細胞背景資料：急性髓系白血??；男性
VMM5A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CX-1細胞、Fox/NY細胞、7860細胞
HMC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-1Sq細胞、CG-4細胞、HConEpic細胞
HSC/mHSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Embryonic Kidney 293細胞、Danio rerio Gill細胞、hESC細胞
MCA205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB-6細胞、COLO 320DM細胞、293c18細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
CESS Cell:人急性髓系白血病細胞系
細胞消化過程總結(jié)：其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞（絕大部分１min不到）。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了（雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個時候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液（不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開）。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的（比如Calu-３細胞），吹打不超過２０次后（一般１０次即可），成小規(guī)模聚集（１０個細胞左右），是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞（潤洗方法５min還不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通常控制在１-２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散；３)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細胞密度達到８０%以后重復(fù)１項操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
AtT 20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HN13細胞、A549/ATCC細胞、MCF7/WT細胞
IPAM-WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mink細胞、Hs 822.T細胞、BEND細胞
Colo741細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-410細胞、EnCa1細胞、TE671細胞
HT clone H9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AsPC-1細胞、KU-19-19細胞、NCI-H2081細胞
RIN-m細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM-13細胞、DMS 53細胞、BMU-S1細胞
細胞生長特性：懸浮
CESS Cell:人急性髓系白血病細胞系
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細胞施加胰酶選擇，因為總是貼壁不牢的細胞先脫落，對腫瘤細胞來說，這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點，直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積１/１０v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細胞！
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
U-251MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1116細胞、EC-GI-10細胞、P 3 HR 1細胞
NCIH208細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L6565細胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞、M-G63細胞
KYSE450細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NALM 6細胞、HEK293FT細胞、KMBC細胞
RMG-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMCB細胞、C3H-10T1/2細胞、293T/17細胞
MNNG/HOS Cl #5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Chinese Hamster Lung細胞、CHP-212細胞、Hs 895 T細胞
WiDr/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERI-Rb1細胞、MDCK (NBL-2)細胞、Hs-343-T細胞
Ramos (RA 1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hESC細胞、K7M2 wt細胞、SW-1990細胞
CESS Cell:人急性髓系白血病細胞系
Walker 256細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞、GBC-SD細胞、BHP 10-3細胞
OCI/AML5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACC3細胞、Panc 8.13細胞、B16 F10細胞
Rat podocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 239-A細胞、HCC2185細胞、CHL-1細胞
CEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞、HEK-293H細胞、H740細胞
A-1847細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SL-29細胞、HuTu-80細胞、6-T CEM細胞
Panc 10.05細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U373-MG細胞、CMT-93細胞、SNUC2A細胞
BC-020細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-8161細胞、Vero E6細胞、B-16細胞
MDAPC2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M07e細胞、H2106細胞、SF539細胞
CCD-33Co細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMC細胞、SKNEP-1細胞、SBC3細胞
CCD-33Co細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMC細胞、SKNEP-1細胞、SBC3細胞
NIT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPA 87細胞、Co-115細胞、HCC202細胞
HLEB3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：McA-RH 7777細胞、2780CP細胞、NRK-52E細胞
32Dcl3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH3T3細胞、A 2780 CP細胞、WPMY-1細胞
Tu212細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FOX-NY細胞、RT4P細胞、H-1436細胞
MPC11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GalK 1細胞、H1238細胞、CF-PAC1細胞
SW620細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Granta 519細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞、Vero-76細胞
Colon 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL-31細胞、Ls-174-T細胞、SkMel31細胞
Hs746T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEMC1細胞、TE-6細胞、U-87細胞
RH30SJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：End1/E6E7細胞、TCC-SUP細胞、HT22細胞
SMA 560細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF-II細胞、H2444細胞、I90細胞
ECV-304細胞系相關(guān)產(chǎn)品：National Medical Center-Glioma 1細胞、F56 [Human neoplasm]細胞、SDBMSC細胞
HL7702細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAFII細胞、MCAEC細胞、H-1373細胞
Immortalized Human Hepatocytes細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-7721細胞、H-774細胞、CaES-17細胞
W133細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HN 4細胞、UPCISCC090細胞、Sp2/0細胞
Human Fetal Thymocyte-8810細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1569細胞、H-69細胞、KATO III細胞
MDA-MB453細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD966SK細胞、NCI-H1734細胞、NCIH2135細胞
MDCKII-WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MMAc-SF細胞、HRGEC細胞、JVM2細胞
CMT 93細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FaDu細胞、Hs445細胞、P3/NS-1細胞
HCC0070細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1395細胞、TO 175.T細胞、DHL-16細胞
ECC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E1 Subclone 24細胞、GM-3573細胞、DKMG細胞
Farage Original Line細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE-Van細胞、HO1N1細胞、HEL 299細胞
MAVER1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-761細胞、HuNS1細胞、FF-WT-BJ細胞
U 937細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EAHY-926細胞、N1S1細胞、HBdSMC細胞
RPMI-7666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T HEECs細胞、NTERA-2/D1細胞、Hs281T細胞
HNSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCASMC細胞、MDAMB435S細胞、HEL細胞
Duck embryo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC12細胞、SCLC21H細胞、Sp 2817細胞
MKN-45細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHSY-5Y細胞、HPB/ALL細胞、MCF-7細胞
NIHOVCAR3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FL62891細胞、H2052細胞、MC-116細胞
RBMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：mRTEC細胞、Hs 729細胞、Ramos(RA1)細胞
MV522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-28細胞、MCF-10A細胞、JROECL 33細胞
MV522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-28細胞、MCF-10A細胞、JROECL 33細胞
DMS79細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL-1細胞、SK MES 1細胞、BGC-823細胞
J82COT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK MES 1細胞、P3-X63-Ag 8.653細胞、SJCRH30細胞
CESS Cell:人急性髓系白血病細胞系
R D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 120細胞、MDA-MB-175VII細胞、SUM 149細胞
EOC20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV-434細胞、AgC11x3A細胞、Madin-Darby Canine Kidney細胞
HMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE(2)-M17細胞、SKGT4細胞、QGP 1細胞
3T3 L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NL20SV細胞、IEC6細胞、NALM 6細胞
Hs-274-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GI-1細胞、HeLa S-3細胞、Pfeiffer細胞
CEM-CCRF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC-8024細胞、A7r5細胞、COLO 320HSR細胞
RCC-10RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco-2細胞、HCC0038細胞、NHLF細胞
TE-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat clone A3細胞、HOS (TE85)細胞、NRK細胞
U-118-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP4細胞、Hs611T細胞、NB-9細胞
HOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：S16細胞、COLO680N細胞、MIA-PaCa-2細胞
MDA1386細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-549細胞、CEM/C1細胞、MN-60細胞
AsPC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF12A細胞、Madin-Darby Bovine Kidney細胞、OCI/AML3細胞
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