"KBM-5 Cell:人慢性髓白血病細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng):懸浮
細(xì)胞背景資料:慢性髓白血?。慌?/span>
Z310細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI660細(xì)胞、NCI-H2122細(xì)胞、TE354.T細(xì)胞
H508細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ADR-RES細(xì)胞、U 138 MG細(xì)胞、H-1819細(xì)胞
ARPE-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CoCL3細(xì)胞、TMK-1細(xì)胞、MDA 1386細(xì)胞
HR-8348細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV(4;11)細(xì)胞、NCI-H441細(xì)胞、PLC/PRF5細(xì)胞
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
KBM-5 Cell:人慢性髓白血病細(xì)胞系
細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中相關(guān)問(wèn)題總結(jié):懸浮性細(xì)胞應(yīng)如何繼代處理?一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細(xì)胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時(shí),可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高,直到無(wú)法容納為止。分瓶時(shí)取出一部份含細(xì)胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶,加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當(dāng)濃度,重復(fù)前述步驟即可。欲將一般動(dòng)物細(xì)胞離心下來(lái),其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動(dòng)物細(xì)胞,其離心速率一般為300xg(約1,000rpm),5-10分鐘,過(guò)高之轉(zhuǎn)速,將造成細(xì)胞死亡;細(xì)胞之接種密度為何?依照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤(pán)之比例接種即可。細(xì)胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細(xì)胞無(wú)法生長(zhǎng)之一重要原因;細(xì)胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何?動(dòng)物細(xì)胞冷凍保存時(shí)最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原來(lái)細(xì)胞生長(zhǎng)用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意:由于DMSO稀釋時(shí)會(huì)放出大量熱能,故不可將DMSO直接加入細(xì)胞液中,必須使用前先行配制完成;DMSO之等級(jí)和無(wú)菌過(guò)濾之方式為何?冷凍保存使用之DMSO等級(jí),必須為T(mén)issue culture grade之DMSO,其本身即為無(wú)菌狀況,次開(kāi)瓶后應(yīng)立即少量分裝于無(wú)菌試管中,保存于4°C,避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì),并可減少污染之機(jī)會(huì)。若要過(guò)濾DMSO,則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜;冷凍保存細(xì)胞之方法?冷凍保存方法一:冷凍管置于4°C 30~60分鐘→ (-20°C 30分鐘)→-80°C 16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽vaporphase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。-20°C不可超過(guò)1小時(shí),以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些;細(xì)胞欲冷凍保存時(shí),細(xì)胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細(xì)胞濃度?冷凍管內(nèi)細(xì)胞數(shù)目一般為1x10(6)cells/ml vial,融合瘤細(xì)胞則以5x10(6)cells/ml vial為宜;應(yīng)如何避免細(xì)胞污染?細(xì)胞污染的種類可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因?yàn)闊o(wú)菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無(wú)菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來(lái)源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法;如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時(shí),應(yīng)如何處理?直接滅菌后丟棄之。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞凍存的步驟:1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來(lái)選擇;3)將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過(guò)夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過(guò)夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見(jiàn),凍存半年后,取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
Normal Rat Kidney-52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-138-MG細(xì)胞、MDA-MB157細(xì)胞、Wayne State University-Head and Neck 13細(xì)胞
NCIH295R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TI-73細(xì)胞、NCIH1755細(xì)胞、NCI-H2591細(xì)胞
Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KTC-1細(xì)胞、COV-362細(xì)胞、EAhy 926細(xì)胞
MRC9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEB-3細(xì)胞、NCI-H226細(xì)胞、NCIH510細(xì)胞
SUDHL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC-1 spg細(xì)胞、ZR7530細(xì)胞、Huh 7.5.1細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:懸浮
KBM-5 Cell:人慢性髓白血病細(xì)胞系
細(xì)胞傳代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn):體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞,并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后,由于密度過(guò)大生存空間不足而引起營(yíng)養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細(xì)胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中,細(xì)胞培增3~6次。細(xì)胞傳代后,一般經(jīng)過(guò)三個(gè)階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度,即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/100個(gè)細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細(xì)胞可達(dá)3~5%;細(xì)胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時(shí)期,稱指數(shù)增生期(對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期),適宜進(jìn)行各種試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)步驟:1.將長(zhǎng)成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺(tái)中倒掉瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞,如果細(xì)胞變圓,相互之間不再連接成片,這時(shí)應(yīng)立即在超凈臺(tái)中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細(xì)胞懸液。3.將細(xì)胞懸液吸出2ml左右,加到另一個(gè)培養(yǎng)瓶中并向每個(gè)瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細(xì)胞在2小時(shí)左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶?jī)?nèi)形成單層,需要再次進(jìn)行傳代。
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
H-1581細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H841細(xì)胞、HLE細(xì)胞、YH細(xì)胞
Hx147細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:343 MG細(xì)胞、BJAB細(xì)胞、COLO 394細(xì)胞
NCI-H157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tu 212細(xì)胞、SUD4細(xì)胞、CAL 12T細(xì)胞
PANC 327細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HepG2/C3A細(xì)胞、PC-3M IE8細(xì)胞、2E8細(xì)胞
Hs 688(A).T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC25細(xì)胞、E.G7-OVA細(xì)胞、SK LU 1細(xì)胞
MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHP-77細(xì)胞、JF305細(xì)胞、SKMEL28細(xì)胞
VP267細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細(xì)胞、COV-434細(xì)胞、H2029細(xì)胞
KBM-5 Cell:人慢性髓白血病細(xì)胞系
SK-N-BE(1)n細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NSC34細(xì)胞、H-2023細(xì)胞、EAHY-926細(xì)胞
LOUNH91細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-112 CoN細(xì)胞、HSC-T6細(xì)胞、Vx-2細(xì)胞
MC/9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A7r5細(xì)胞、H-1355細(xì)胞、CMEC/D3細(xì)胞
253J-BV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VK2/E6E7細(xì)胞、RPE-1細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-7細(xì)胞
2780CP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KOPN8細(xì)胞、TFH細(xì)胞、CHP-100細(xì)胞
CV 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hADSCs細(xì)胞、BALL-1細(xì)胞、Z310細(xì)胞
NCI-SNU-119細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK clone 49F細(xì)胞、MDAMB134細(xì)胞、H-2172細(xì)胞
MC 3T3-E1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUNE1細(xì)胞、WBF344細(xì)胞、OE19細(xì)胞
Strain L-929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LED-WiDr細(xì)胞、H1915細(xì)胞、MT-4細(xì)胞
Strain L-929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LED-WiDr細(xì)胞、H1915細(xì)胞、MT-4細(xì)胞
MonoMac1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-3細(xì)胞、95C細(xì)胞、C38細(xì)胞
BLO 11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L105細(xì)胞、HEK-2細(xì)胞、MKN28細(xì)胞
NCI-H1755細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEAS2B細(xì)胞、Leukemia 1210細(xì)胞、LCLC103H細(xì)胞
HEK AD293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63.Ag8.653細(xì)胞、C918細(xì)胞、SF-767細(xì)胞
IPEC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3 (Jiyoye)細(xì)胞、CCRF/CEM/0細(xì)胞、SKNO1細(xì)胞
CII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLFC細(xì)胞、bEnd3細(xì)胞、HEL92.1.7細(xì)胞
LIPF178C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NEC8細(xì)胞、GM04154細(xì)胞、C41細(xì)胞
G519細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H747細(xì)胞、OVCAR-432細(xì)胞、GTL 16細(xì)胞
SW1990細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU1040細(xì)胞、CACO2細(xì)胞、C-4I細(xì)胞
RBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGROV-1細(xì)胞、HEK 293 c18細(xì)胞、NS1-Ag4/1細(xì)胞
QGY 7701細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H23細(xì)胞、HOPC細(xì)胞、MS1細(xì)胞
QGY 7701細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H23細(xì)胞、HOPC細(xì)胞、MS1細(xì)胞
H1092細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM134細(xì)胞、C166細(xì)胞、MCF/Adr細(xì)胞
OVCAR-8/ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Psi2 DAP細(xì)胞、MDAMB134VI細(xì)胞、X63-Ag8-653細(xì)胞
NCI-H1915細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIADRRES細(xì)胞、NCI-H2195細(xì)胞、SK-N-BE-2c細(xì)胞
U-138 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH196細(xì)胞、A549/DDP細(xì)胞、VMRCRCZ細(xì)胞
SK-MEL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO824細(xì)胞、NCIH2286細(xì)胞、NBL-2細(xì)胞
T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 766細(xì)胞、H-676細(xì)胞、RPVSMC細(xì)胞
HFLS-OA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFF-1細(xì)胞、L5178-R細(xì)胞、COV 434細(xì)胞
50.B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOV21G細(xì)胞、WIL2 S細(xì)胞、SW579細(xì)胞
H82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRTL-5細(xì)胞、H596細(xì)胞、OCM-1細(xì)胞
NCIH28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJRH 30細(xì)胞、Tu 177細(xì)胞、3 LL細(xì)胞
HEK293S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-12A細(xì)胞、SUM149PT細(xì)胞、LNCaP.FGC細(xì)胞
YD-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H64細(xì)胞、293-FT細(xì)胞、MS 751細(xì)胞
OAW 42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMG-I細(xì)胞、ME-180細(xì)胞、RPMI no 8226細(xì)胞
NCI-H1648細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT26-clone 25細(xì)胞、UPCI:SCC154細(xì)胞、MSTO-211H細(xì)胞
BNL-CL.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NW-MEL-38細(xì)胞、HSF細(xì)胞、P31-FUJ細(xì)胞
DrG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1373細(xì)胞、OAW42細(xì)胞、JB6 clone 30, subclone 7b細(xì)胞
UACC-812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT144-mel細(xì)胞、CL 1-5細(xì)胞、H69C細(xì)胞
Shadyside Hospital Pittsburgh-77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H9c2 (2-1)細(xì)胞、R1800[RA]細(xì)胞、M059K細(xì)胞
NCIH548細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 679細(xì)胞、HGC27細(xì)胞、NCI-H838細(xì)胞
SMMC-7721細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD841CoN細(xì)胞、NCIH1651細(xì)胞、L Wnt-3A細(xì)胞
DMS 79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SH-SY5Y Parental細(xì)胞、Cates-1B細(xì)胞、HN6細(xì)胞
KBM-5 Cell:人慢性髓白血病細(xì)胞系
PC-9/GR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC 61-5-3細(xì)胞、NCI-H2172細(xì)胞、MDA MB 134VI細(xì)胞
HCC38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2171細(xì)胞、Hs 766.T細(xì)胞、MGC803細(xì)胞
CCD 19Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE 671細(xì)胞、HCC1569細(xì)胞、H2198細(xì)胞
GLC-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLCMK2細(xì)胞、INS-1E細(xì)胞、He-La細(xì)胞
HSC/mHSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Embryonic Kidney 293細(xì)胞、Danio rerio Gill細(xì)胞、hESC細(xì)胞
Sup T-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2 cl.D1細(xì)胞、MC116細(xì)胞、SK-MEL-MeWo細(xì)胞
MRC-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh7.5細(xì)胞、SW 780細(xì)胞、ST2細(xì)胞
SKCO 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE32細(xì)胞、JJN3細(xì)胞、MDA-MB 231細(xì)胞
TCCPAN2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEC細(xì)胞、QGP-1細(xì)胞、OP9細(xì)胞
SW 480細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Balb/c 3T3細(xì)胞、CAL120細(xì)胞、NCI/ADR-RES細(xì)胞
NFS60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT-125細(xì)胞、PLC PRF 5細(xì)胞、P1-Raji細(xì)胞
L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PMVEC細(xì)胞、MESSADX5細(xì)胞、Hs895.T細(xì)胞
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