"KBM-5 Cell:人慢性髓白血病細胞系
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
細胞生長:懸浮
細胞背景資料:慢性髓白血病;女性
Z310細胞系相關產品:NCI660細胞、NCI-H2122細胞、TE354.T細胞
H508細胞系相關產品:ADR-RES細胞、U 138 MG細胞、H-1819細胞
ARPE-19細胞系相關產品:CoCL3細胞、TMK-1細胞、MDA 1386細胞
HR-8348細胞系相關產品:MV(4;11)細胞、NCI-H441細胞、PLC/PRF5細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
KBM-5 Cell:人慢性髓白血病細胞系
細胞培養(yǎng)過程中相關問題總結:懸浮性細胞應如何繼代處理?一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高,直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶,加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當濃度,重復前述步驟即可。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應為多少轉速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300xg(約1,000rpm),5-10分鐘,過高之轉速,將造成細胞死亡;細胞之接種密度為何?依照細胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長之一重要原因;細胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何?動物細胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原來細胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意:由于DMSO稀釋時會放出大量熱能,故不可將DMSO直接加入細胞液中,必須使用前先行配制完成;DMSO之等級和無菌過濾之方式為何?冷凍保存使用之DMSO等級,必須為Tissue culture grade之DMSO,其本身即為無菌狀況,次開瓶后應立即少量分裝于無菌試管中,保存于4°C,避免反復冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質,并可減少污染之機會。若要過濾DMSO,則須使用耐DMSO之Nylon材質濾膜;冷凍保存細胞之方法?冷凍保存方法一:冷凍管置于4°C 30~60分鐘→ (-20°C 30分鐘)→-80°C 16~18小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-20°C不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些;細胞欲冷凍保存時,細胞冷凍管內應有多少細胞濃度?冷凍管內細胞數(shù)目一般為1x10(6)cells/ml vial,融合瘤細胞則以5x10(6)cells/ml vial為宜;應如何避免細胞污染?細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術不當、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術、清潔的環(huán)境、與品質良好之細胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法;如果細胞發(fā)生微生物污染時,應如何處理?直接滅菌后丟棄之。
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
Normal Rat Kidney-52E細胞系相關產品:U-138-MG細胞、MDA-MB157細胞、Wayne State University-Head and Neck 13細胞
NCIH295R細胞系相關產品:TI-73細胞、NCIH1755細胞、NCI-H2591細胞
Alpha Mouse Liver 12細胞系相關產品:KTC-1細胞、COV-362細胞、EAhy 926細胞
MRC9細胞系相關產品:HLEB-3細胞、NCI-H226細胞、NCIH510細胞
SUDHL1細胞系相關產品:GC-1 spg細胞、ZR7530細胞、Huh 7.5.1細胞
細胞生長特性:懸浮
KBM-5 Cell:人慢性髓白血病細胞系
細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內形成單層,需要再次進行傳代。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
H-1581細胞系相關產品:NCI-H841細胞、HLE細胞、YH細胞
Hx147細胞系相關產品:343 MG細胞、BJAB細胞、COLO 394細胞
NCI-H157細胞系相關產品:Tu 212細胞、SUD4細胞、CAL 12T細胞
PANC 327細胞系相關產品:HepG2/C3A細胞、PC-3M IE8細胞、2E8細胞
Hs 688(A).T細胞系相關產品:SCC25細胞、E.G7-OVA細胞、SK LU 1細胞
MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞系相關產品:SHP-77細胞、JF305細胞、SKMEL28細胞
VP267細胞系相關產品:Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細胞、COV-434細胞、H2029細胞
KBM-5 Cell:人慢性髓白血病細胞系
SK-N-BE(1)n細胞系相關產品:NSC34細胞、H-2023細胞、EAHY-926細胞
LOUNH91細胞系相關產品:CCD-112 CoN細胞、HSC-T6細胞、Vx-2細胞
MC/9細胞系相關產品:A7r5細胞、H-1355細胞、CMEC/D3細胞
253J-BV細胞系相關產品:VK2/E6E7細胞、RPE-1細胞、Michigan Cancer Foundation-7細胞
2780CP細胞系相關產品:KOPN8細胞、TFH細胞、CHP-100細胞
CV 1細胞系相關產品:hADSCs細胞、BALL-1細胞、Z310細胞
NCI-SNU-119細胞系相關產品:NRK clone 49F細胞、MDAMB134細胞、H-2172細胞
MC 3T3-E1細胞系相關產品:SUNE1細胞、WBF344細胞、OE19細胞
Strain L-929細胞系相關產品:LED-WiDr細胞、H1915細胞、MT-4細胞
Strain L-929細胞系相關產品:LED-WiDr細胞、H1915細胞、MT-4細胞
MonoMac1細胞系相關產品:HSC-3細胞、95C細胞、C38細胞
BLO 11細胞系相關產品:COR-L105細胞、HEK-2細胞、MKN28細胞
NCI-H1755細胞系相關產品:BEAS2B細胞、Leukemia 1210細胞、LCLC103H細胞
HEK AD293細胞系相關產品:P3-X63.Ag8.653細胞、C918細胞、SF-767細胞
IPEC-1細胞系相關產品:P3 (Jiyoye)細胞、CCRF/CEM/0細胞、SKNO1細胞
CII細胞系相關產品:MLFC細胞、bEnd3細胞、HEL92.1.7細胞
LIPF178C細胞系相關產品:NEC8細胞、GM04154細胞、C41細胞
G519細胞系相關產品:NCI H747細胞、OVCAR-432細胞、GTL 16細胞
SW1990細胞系相關產品:SNU1040細胞、CACO2細胞、C-4I細胞
RBE細胞系相關產品:IGROV-1細胞、HEK 293 c18細胞、NS1-Ag4/1細胞
QGY 7701細胞系相關產品:NCI H23細胞、HOPC細胞、MS1細胞
QGY 7701細胞系相關產品:NCI H23細胞、HOPC細胞、MS1細胞
H1092細胞系相關產品:MM134細胞、C166細胞、MCF/Adr細胞
OVCAR-8/ADR細胞系相關產品:Psi2 DAP細胞、MDAMB134VI細胞、X63-Ag8-653細胞
NCI-H1915細胞系相關產品:NCIADRRES細胞、NCI-H2195細胞、SK-N-BE-2c細胞
U-138 MG細胞系相關產品:NCIH196細胞、A549/DDP細胞、VMRCRCZ細胞
SK-MEL2細胞系相關產品:COLO824細胞、NCIH2286細胞、NBL-2細胞
T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞系相關產品:Hs 766細胞、H-676細胞、RPVSMC細胞
HFLS-OA細胞系相關產品:HFF-1細胞、L5178-R細胞、COV 434細胞
50.B1細胞系相關產品:TOV21G細胞、WIL2 S細胞、SW579細胞
H82細胞系相關產品:FRTL-5細胞、H596細胞、OCM-1細胞
NCIH28細胞系相關產品:SJRH 30細胞、Tu 177細胞、3 LL細胞
HEK293S細胞系相關產品:Michigan Cancer Foundation-12A細胞、SUM149PT細胞、LNCaP.FGC細胞
YD-38細胞系相關產品:H64細胞、293-FT細胞、MS 751細胞
OAW 42細胞系相關產品:RMG-I細胞、ME-180細胞、RPMI no 8226細胞
NCI-H1648細胞系相關產品:CT26-clone 25細胞、UPCI:SCC154細胞、MSTO-211H細胞
BNL-CL.2細胞系相關產品:NW-MEL-38細胞、HSF細胞、P31-FUJ細胞
DrG細胞系相關產品:H1373細胞、OAW42細胞、JB6 clone 30, subclone 7b細胞
UACC-812細胞系相關產品:HT144-mel細胞、CL 1-5細胞、H69C細胞
Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞系相關產品:H9c2 (2-1)細胞、R1800[RA]細胞、M059K細胞
NCIH548細胞系相關產品:COLO 679細胞、HGC27細胞、NCI-H838細胞
SMMC-7721細胞系相關產品:CCD841CoN細胞、NCIH1651細胞、L Wnt-3A細胞
DMS 79細胞系相關產品:SH-SY5Y Parental細胞、Cates-1B細胞、HN6細胞
KBM-5 Cell:人慢性髓白血病細胞系
PC-9/GR細胞系相關產品:PC 61-5-3細胞、NCI-H2172細胞、MDA MB 134VI細胞
HCC38細胞系相關產品:NCI-H2171細胞、Hs 766.T細胞、MGC803細胞
CCD 19Lu細胞系相關產品:TE 671細胞、HCC1569細胞、H2198細胞
GLC-15細胞系相關產品:LLCMK2細胞、INS-1E細胞、He-La細胞
HSC/mHSC細胞系相關產品:Human Embryonic Kidney 293細胞、Danio rerio Gill細胞、hESC細胞
Sup T-1細胞系相關產品:NTERA-2 cl.D1細胞、MC116細胞、SK-MEL-MeWo細胞
MRC-5細胞系相關產品:Huh7.5細胞、SW 780細胞、ST2細胞
SKCO 1細胞系相關產品:TE32細胞、JJN3細胞、MDA-MB 231細胞
TCCPAN2細胞系相關產品:HLEC細胞、QGP-1細胞、OP9細胞
SW 480細胞系相關產品:Balb/c 3T3細胞、CAL120細胞、NCI/ADR-RES細胞
NFS60細胞系相關產品:HUT-125細胞、PLC PRF 5細胞、P1-Raji細胞
L細胞系相關產品:PMVEC細胞、MESSADX5細胞、Hs895.T細胞
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關鍵字: KBM-5 Cell:人慢性髓白血病細胞系
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