"KG-1a Cell:人急性骨髓白血病細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣
細(xì)胞生長:懸浮
細(xì)胞背景資料:急性髓系白血病;男性
H2085細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Epstein-Barr-1細(xì)胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞、H1618細(xì)胞
CL 1-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-1細(xì)胞、H-1563細(xì)胞、IBMF-7細(xì)胞
SW780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOV-21G細(xì)胞、EB3 [Human Burkitt lymphoma]細(xì)胞、Vero E6細(xì)胞
SK MEL-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mv 1 Lu細(xì)胞、SK-ChA1細(xì)胞、RGCs細(xì)胞
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
KG-1a Cell:人急性骨髓白血病細(xì)胞系
細(xì)胞消化過程總結(jié):其實(shí)絕大部分細(xì)胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細(xì)胞(絕大部分1min不到)。對于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞,連續(xù)這樣傳代,對細(xì)胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實(shí)已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細(xì)胞就是完全成單個細(xì)胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,尤其是腫瘤細(xì)胞的一個特性,無論死活的細(xì)胞都是如此,你可以嘗試,準(zhǔn)備100%的單個細(xì)胞懸液,貼壁后觀察細(xì)胞,仍然是幾個幾個細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細(xì)胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細(xì)胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細(xì)胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學(xué)那樣吹打1h,等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細(xì)胞(潤洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細(xì)胞,一般不超過5min,即可見細(xì)胞成片移動,就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會有難消化的時候,比如tsDC細(xì)胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難,最關(guān)鍵幾點(diǎn):1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的,真的很難相信你會把細(xì)胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細(xì)胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細(xì)胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細(xì)胞計數(shù),傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細(xì)胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實(shí)驗(yàn);5)個人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人,避免相互干擾。每天對待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細(xì)胞時有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?1)嚴(yán)格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準(zhǔn)備一套;3)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進(jìn)去);5)晚上離開的時候給傳代細(xì)胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
PC 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-2650細(xì)胞、RPMI 6666細(xì)胞、SKN-SH細(xì)胞
Embryonic Bovine Tracheal cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCM460細(xì)胞、HNE2細(xì)胞、DMS 153細(xì)胞
PG-4 S+L-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLMVEC細(xì)胞、SW-780細(xì)胞、HSC-3細(xì)胞
SW 837細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2122細(xì)胞、NCM-460細(xì)胞、Kasumi-1細(xì)胞
MAVER1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-761細(xì)胞、HuNS1細(xì)胞、FF-WT-BJ細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:懸浮
KG-1a Cell:人急性骨髓白血病細(xì)胞系
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項:1.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套,護(hù)目鏡。此項尤為重要,細(xì)胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導(dǎo)致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細(xì)胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細(xì)胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢,會造成細(xì)胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細(xì)胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng),第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細(xì)胞,這個是標(biāo)準(zhǔn)流程,但對一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間,轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少,細(xì)胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細(xì)胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇,結(jié)果無異常。5.細(xì)胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時1ml細(xì)胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。6.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題:試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇1管細(xì)胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細(xì)胞濃度過低,不利于細(xì)胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細(xì)胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
UPCI:SCC90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat (clone E6-1)細(xì)胞、NCIH1155細(xì)胞、GM00637B細(xì)胞
D-341Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MT2細(xì)胞、hTERT-HPNE細(xì)胞、RPMI #8226細(xì)胞
BMU-S1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco 2細(xì)胞、NCI-H1781細(xì)胞、SW 982細(xì)胞
OVCA5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-10-05細(xì)胞、ML2細(xì)胞、MDA-MB-134-VI細(xì)胞
MFE280細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBC1細(xì)胞、MG-63細(xì)胞、BaF3細(xì)胞
CAL78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFE-296細(xì)胞、Hs 737.T細(xì)胞、OEC19細(xì)胞
MCF-7ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker-Ca.256細(xì)胞、KASUMI1細(xì)胞、EJ 138細(xì)胞
KG-1a Cell:人急性骨髓白血病細(xì)胞系
HMO6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NG 108-15細(xì)胞、CNE2Z細(xì)胞、H-378細(xì)胞
RIN-m5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIN87細(xì)胞、CCC-HHM-2細(xì)胞、639V細(xì)胞
EBC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 04.03細(xì)胞、NK 10a細(xì)胞、KNS-62細(xì)胞
SKMel-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WC00097細(xì)胞、Hepatoma-22細(xì)胞、HL-1細(xì)胞
PAI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCISCC090細(xì)胞、MS751細(xì)胞、H1404細(xì)胞
HIT clone T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NL20細(xì)胞、SVEC4-10細(xì)胞、NW-38細(xì)胞
3396細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 361細(xì)胞、Panc 05.04細(xì)胞、PC-3M-2B4細(xì)胞
TEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL.CL2細(xì)胞、SK Mel 2細(xì)胞、LM3細(xì)胞
Bovine Turbinate細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MARC-145細(xì)胞、TCC-PAN2細(xì)胞、RPMI-1846細(xì)胞
Bovine Turbinate細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MARC-145細(xì)胞、TCC-PAN2細(xì)胞、RPMI-1846細(xì)胞
H-920細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JVM3細(xì)胞、SNU475細(xì)胞、NCIH2052細(xì)胞
RT-BM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL6細(xì)胞、H-740細(xì)胞、OKAC1細(xì)胞
2B4-L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNF1細(xì)胞、Hs 343.T細(xì)胞、GM04680細(xì)胞
SW-1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDBK (NBL-1)細(xì)胞、IM 9細(xì)胞、NR 8383細(xì)胞
SkMel31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CWR22R-V1細(xì)胞、LS-174細(xì)胞、32D:cl3細(xì)胞
NCIH596細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tu-212細(xì)胞、NCIH2066細(xì)胞、CL1細(xì)胞
LN-382細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:W256細(xì)胞、SVGp12細(xì)胞、U-266細(xì)胞
HPMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hela-mock細(xì)胞、GEO細(xì)胞、FAK+/+細(xì)胞
HCGC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC3H-1細(xì)胞、PG-BE1細(xì)胞、OCUM-1細(xì)胞
NCIH747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Mel 1細(xì)胞、RFL-6細(xì)胞、U266BL細(xì)胞
KOSC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OAW42細(xì)胞、Mel-MeWo細(xì)胞、T-ALL-1細(xì)胞
NCI-441細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC-996細(xì)胞、HCC-1569細(xì)胞、A 253細(xì)胞
Bac1 2F5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63Ag8.653細(xì)胞、PanC1細(xì)胞、Hu-P-T4細(xì)胞
ML-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAMA細(xì)胞、H2452細(xì)胞、NCIH508細(xì)胞
HO-8910PM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T6細(xì)胞、TYKnu細(xì)胞、T98G細(xì)胞
HCC-366細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2591細(xì)胞、A 549細(xì)胞、LC-1細(xì)胞
Bac1 2F5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63Ag8.653細(xì)胞、PanC1細(xì)胞、Hu-P-T4細(xì)胞
NCIH2171細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-148細(xì)胞、NCI-H2073細(xì)胞、LICR-LON-HN6細(xì)胞
Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 540細(xì)胞、RMC細(xì)胞、P3-X63-Ag8-653細(xì)胞
R 1610細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:E0771細(xì)胞、PA1細(xì)胞、MLE12細(xì)胞
HNE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKN-AS細(xì)胞、Panc-05.04細(xì)胞、HPAEC細(xì)胞
HCC1588細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-211細(xì)胞、MDA-kb2細(xì)胞、H-3255細(xì)胞
SG231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:K7M2細(xì)胞、32Dc3細(xì)胞、MRMT-1細(xì)胞
Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1838細(xì)胞、H157細(xì)胞、SK 1細(xì)胞
Soleus clone 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Glomerular Endothelial細(xì)胞、HT 1080細(xì)胞、OCI-LY-10細(xì)胞
MHCCLM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0095細(xì)胞、H2110細(xì)胞、SNU-719細(xì)胞
RBL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MMAc.SF細(xì)胞、NK92MI細(xì)胞、H747細(xì)胞
HGC27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK BR 03細(xì)胞、MDA-134細(xì)胞、Hep G2細(xì)胞
KY180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1353細(xì)胞、SW 1088細(xì)胞、RKO-E6細(xì)胞
MDA1386細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-549細(xì)胞、CEM/C1細(xì)胞、MN-60細(xì)胞
MS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1522細(xì)胞、MS-751細(xì)胞、YES-2細(xì)胞
BE(2)M17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mhh-Call 2細(xì)胞、MPP-89細(xì)胞、Normal Rat, August 3, 1983細(xì)胞
PLC PRF 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RLE-6TN細(xì)胞、U-2932細(xì)胞、DMS-53細(xì)胞
KG-1a Cell:人急性骨髓白血病細(xì)胞系
JIMT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TFK1細(xì)胞、H-1568細(xì)胞、BJA-B細(xì)胞
HTori-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM6細(xì)胞、Hs 746T細(xì)胞、MUG-Chor1細(xì)胞
C4-2 B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR41P細(xì)胞、EB-3細(xì)胞、Panc-813細(xì)胞
QBC(939)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC(Human Schwann)細(xì)胞、ARPE-19細(xì)胞、MuM-2C細(xì)胞
SCC25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-940細(xì)胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細(xì)胞、P3-Jiyoye細(xì)胞
KM12 SM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madin Darby Bovine Kidney細(xì)胞、SCH細(xì)胞、GAK細(xì)胞
293EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM-3573細(xì)胞、A375-MEL細(xì)胞、Hs-281-T細(xì)胞
OVCAR.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero C1008細(xì)胞、SKNEP1細(xì)胞、Madin Darby Canine Kidney細(xì)胞
EL 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178Y細(xì)胞、Hs 294T細(xì)胞、HuH-28細(xì)胞
NCI-H295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2141細(xì)胞、HUC-1細(xì)胞、Keio University-19-19細(xì)胞
CAL-148細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:253J-Bladder-V細(xì)胞、T-47-D細(xì)胞、COLO680N細(xì)胞
Pfeiffer細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-Wnt-3A細(xì)胞、Melan-a細(xì)胞、HT clone H9細(xì)胞
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關(guān)鍵字: KG-1a Cell:人急性骨髓白血病細(xì)胞系
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