"Ku812F Cell:人外周血嗜堿性白血病細胞系
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
細胞生長:懸浮
細胞背景資料:慢性粒細胞白血??;男性
MCF 10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly01細胞、HBdSMC細胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞
H1819細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL細胞、NCI-H446細胞、NCI-H1395細胞
H596細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10(Clone 4)細胞、CCD 19Lu細胞、Dakiki細胞
A72細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JROECL19細胞、P3/NS1/1-Ag4.1細胞、PF382細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
Ku812F Cell:人外周血嗜堿性白血病細胞系
如何把細胞養(yǎng)的形態(tài)更好更漂亮。1.不同的細胞,喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個不僅僅是說培養(yǎng)基的不同,還有就是細胞生長的空間密度問題。有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應(yīng)該留很少量的細胞,這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應(yīng)該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。2.對于有些人總是會遇到養(yǎng)的細胞形態(tài)怎么都不好的問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞,如果細胞形態(tài)不好,(或者細胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進行預(yù)吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細胞我們只吹打,不消化的);其次,把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。我稱之為“二傳”。呵呵。如果一次效果還不理想,可重復(fù)多次。直到找到細胞完美形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。3.關(guān)于培養(yǎng)瓶內(nèi)加入培養(yǎng)基的量的問題。這個是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些細胞反而是培養(yǎng)基少一點相反細胞形態(tài)會長得比較好。(可能也是競爭很大,有優(yōu)勝劣汰吧。呵呵。)對于生長速度快的細胞,易生長的細胞加少一點培養(yǎng)基細胞形態(tài)會更好。但是要注意換液掌握。4.關(guān)于選擇培養(yǎng)瓶的問題。個人發(fā)現(xiàn)生長速度快的細胞在玻璃瓶內(nèi)生長的狀態(tài)會比一次性相對好一些。而對于同一種細胞,在其生長旺盛快速的時期在玻璃瓶內(nèi)的生長狀態(tài)也比內(nèi)好。這可能是因為比玻璃瓶更容易貼壁。生長速度快的細胞在這種相對“更安逸”的環(huán)境里反而長得狀態(tài)不如玻璃瓶好。所以對于生長速度慢的細胞如果想要更漂亮的細胞狀態(tài),比玻璃瓶會好,對于生長速度慢的細胞,玻璃瓶則會更好。同樣,對于同一種細胞,在其生長速度慢的時候,會好一點,比如剛剛復(fù)蘇的時候,或者原代培養(yǎng)的時候。而在其生長旺盛的時候,玻璃瓶則相對會好一點。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
培養(yǎng)細胞真的不難,最關(guān)鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數(shù),傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
EMT6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NT-2細胞、OVCAR 4細胞、P3-X63-Ag 8.653細胞
KYSE-140細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-453細胞、PCI-SG231細胞、BV-2細胞
NCI-H64細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HepaRG細胞、D-324 Med細胞、McA-RH7777細胞
MOLP-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H157細胞、H-510A細胞、HCC-2935細胞
R 1610細胞系相關(guān)產(chǎn)品:E0771細胞、PA1細胞、MLE12細胞
細胞生長特性:懸浮
Ku812F Cell:人外周血嗜堿性白血病細胞系
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導(dǎo)致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間,轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇,結(jié)果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復(fù)蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
HIBEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293A細胞、Normal Rat Kidney-52E細胞、H2107細胞
BpRc1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT-HME1細胞、H1048細胞、IM-9細胞
SNU484細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs819T細胞、NCIH64細胞、OV-2008細胞
HTR-8/SV-neo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T24細胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞、H1666_DA細胞
H-1688細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA330細胞、LLC-PK-1細胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞
VMM39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A498細胞、SK-ML2細胞、KCL22細胞
GB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 680N細胞、HL1細胞、rUCMSCs細胞
Ku812F Cell:人外周血嗜堿性白血病細胞系
UO31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHH-CALL-2細胞、MV-4:11細胞、293 HEK細胞
Hca-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARO81細胞、RASMCs細胞、SK Mel 2細胞
CAMA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 51細胞、TSU-Pr1細胞、H929細胞
HCC827細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 148細胞、CHO-S細胞、NTERA-2/D1細胞
OCI-LY-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKO007細胞、NCI-H2591細胞、HOP-62細胞
CLL-CII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW13細胞、H-441細胞、D341Med細胞
HSC/mHSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Embryonic Kidney 293細胞、Danio rerio Gill細胞、hESC細胞
WM 115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FU-OV-1細胞、N-2a細胞、BT325細胞
H1836細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1581細胞、MUGCHOR1細胞、GM00215A細胞
VA-ES-BJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-Col-1細胞、SW480細胞、H.Ep. No. 2細胞
KYSE 410細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR7530細胞、Dysplastic Oral Keratinocyte細胞、786.O細胞
CoC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D324細胞、L540細胞、74Int細胞
ARPE-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CoCL3細胞、TMK-1細胞、MDA 1386細胞
Tn5 B1-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL51細胞、UCLA-RO 81細胞、B-3細胞
Hca-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARO81細胞、RASMCs細胞、SK Mel 2細胞
HO1N1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Case 3細胞、Clone M-3細胞、VMM5A細胞
H-1734細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JM-1細胞、3T3NIH細胞、HBL-100細胞
HT-1080細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMJ2C8細胞、Capan-2細胞、U266細胞
PLB985細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pro-5WgaRI3C細胞、P30-OHKUBO細胞、Panc-05.04細胞
H-748細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mel624細胞、MARC 145細胞、SK-RC 39細胞
NCI-HUT-125細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos.2G6.4C10細胞、Jurkat E6細胞、C33細胞
Caov-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IR983F細胞、Cor L51細胞、SW13細胞
Tu-212細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-475細胞、NCI-H526細胞、V79-4細胞
T-98細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKml2細胞、MKN-28細胞、MDCK Type II細胞
HCM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-AD293細胞、AG 9細胞、WIL2-S細胞
RCC10 RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1187細胞、HEC-1B細胞、Rat Skin 1細胞
BALL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HepG2細胞、SACC-LM細胞、LCLC-103H細胞
Hs-611-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-202細胞、H-1618細胞、Sol8細胞
A375SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PBMC細胞、MKN-7細胞、SLMT1細胞
SW-1116細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL1細胞、Transformed Human Liver Epithelial-3細胞、MODE-K細胞
NCI-H2591細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML 12細胞、MC38細胞、Tu 212細胞
KOSC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TALL-104細胞、SU-DHL2細胞、HGF-1細胞
MM-1S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C12細胞、Human Embryonic Skin細胞、G 292 Clone A 141B1細胞
PL45細胞系相關(guān)產(chǎn)品:4T1細胞、NHDF細胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細胞
HNE3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM04678細胞、KYSE-410細胞、LM-TK-細胞
Pa16C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:F9細胞、Panc02-H0細胞、HO-8910 PM細胞
MARC-145細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-26細胞、HUVEC細胞、HOMEC細胞
Hela-Ap-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-2/ad細胞、HSKMC細胞、MKN1細胞
NALM 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-1386細胞、BT-549細胞、EC-109細胞
JIMT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMel-28細胞、CL40細胞、Calu-6細胞
HuT78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3J HR1-K細胞、MHCC 97細胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞
697細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC3細胞、CCD 841 CoN細胞、NCI-H841細胞
RPMI-1788細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1693細胞、LK2細胞、SCC-1395細胞
Ku812F Cell:人外周血嗜堿性白血病細胞系
SK-ML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR L279細胞、Sp2/0-Ag14細胞、J 111細胞
SUSM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2073細胞、Hs604T細胞、MKN45細胞
COLO-HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H.Ep. #2細胞、HOC1細胞、rRTEC細胞
HR-8348細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV(4;11)細胞、NCI-H441細胞、PLC/PRF5細胞
GT38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOG細胞、CoCL3細胞、Mv 1 Lu細胞
COLO-205細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1105細胞、COV 434細胞、NMCG-1細胞
SCaBER細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY7703細胞、RGC6細胞、L 428細胞
Human Pancreatic Duct Epithelial細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293H細胞、MDA415細胞、HPAC細胞
CRFK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCC-PAN2細胞、JVM3細胞、NCI.H522細胞
NG10815細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30-OHK細胞、B78細胞、IOSE-80細胞
HCEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HARAB細胞、VSC4.1細胞、B104 [Rat neuroblastoma]細胞
G361-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KBM-5細胞、SKCol1細胞、K7M2細胞
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