"EB3 [Human Burkitt lymphoma] Cell:人伯基特淋巴瘤細胞系
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
細胞生長:懸浮
細胞背景資料:該細胞源自一名3歲患有Burkitt's淋巴瘤的黑人男孩的B淋巴細胞,EBNA陽性。
Hs 294T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2 clone D1細胞、OVCAR.5細胞、CHL細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB361細胞、SW-837細胞、Cloudman M3細胞
RCC10 RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1187細胞、HEC-1B細胞、Rat Skin 1細胞
Hs-606-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKES1細胞、NCIH1838細胞、LP-1細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
EB3 [Human Burkitt lymphoma] Cell:人伯基特淋巴瘤細胞系
細胞培養(yǎng)過程中相關(guān)問題總結(jié):懸浮性細胞應(yīng)如何繼代處理?一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高,直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶,加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當濃度,重復前述步驟即可。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300xg(約1,000rpm),5-10分鐘,過高之轉(zhuǎn)速,將造成細胞死亡;細胞之接種密度為何?依照細胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長之一重要原因;細胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何?動物細胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原來細胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意:由于DMSO稀釋時會放出大量熱能,故不可將DMSO直接加入細胞液中,必須使用前先行配制完成;DMSO之等級和無菌過濾之方式為何?冷凍保存使用之DMSO等級,必須為Tissue culture grade之DMSO,其本身即為無菌狀況,次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中,保存于4°C,避免反復冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì),并可減少污染之機會。若要過濾DMSO,則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜;冷凍保存細胞之方法?冷凍保存方法一:冷凍管置于4°C 30~60分鐘→ (-20°C 30分鐘)→-80°C 16~18小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-20°C不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些;細胞欲冷凍保存時,細胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細胞濃度?冷凍管內(nèi)細胞數(shù)目一般為1x10(6)cells/ml vial,融合瘤細胞則以5x10(6)cells/ml vial為宜;應(yīng)如何避免細胞污染?細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術(shù)不當、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法;如果細胞發(fā)生微生物污染時,應(yīng)如何處理?直接滅菌后丟棄之。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:4傳代,每周2-3次。
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢!
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
PC9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE1細胞、HME-1細胞、SU-DHL-6細胞
HUT 125細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP a2細胞、TPC1細胞、SW260細胞
CORL23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DoTc2細胞、Madin Darby Bovine Kidney細胞、RF/6A細胞
3 LL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-UC14細胞、NCI-H1954細胞、GM03671細胞
H1238細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Dysplastic Oral Keratinocyte細胞、PC-3M-IE8細胞、A549-Taxol細胞
細胞生長特性:懸浮生長
EB3 [Human Burkitt lymphoma] Cell:人伯基特淋巴瘤細胞系
貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。
細胞形態(tài)特性:淋巴母細胞樣
MCAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM15452細胞、293T細胞、McA-RH 7777細胞
COLO_320DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HANK-1細胞、SUDHL-8細胞、H22細胞
MES-SA Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs294細胞、HSC6細胞、C-33 A細胞
OVCA-432細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC-5細胞、NCI-H209細胞、SCC90細胞
EFM-192A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H524細胞、Anip 973細胞、Mv1Lu細胞
HTSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIM-1215細胞、Ej138細胞、HTori-3細胞
NU-GC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TK-1細胞、Ramos G6.C10細胞、BERH-2細胞
EB3 [Human Burkitt lymphoma] Cell:人伯基特淋巴瘤細胞系
BGC823細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM12SM細胞、Hep G2/C3A細胞、MLMA細胞
RK 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2405細胞、HNE3細胞、SNU601細胞
N2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPP89細胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細胞、SNU16細胞
RS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 144細胞、MSTO-211細胞、Namalwa細胞
HBL 100細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKOE6細胞、HCT 8細胞、ZR751細胞
SK-N-BE(2)-M17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAntle cell VERona-1細胞、Mono-Mac-1細胞、J111細胞
SU-DHL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SL-1細胞、H2227細胞、B-CPAP細胞
BT20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV-90細胞、MDAMB361細胞、PANC-04-03細胞
BXPC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARPE-19細胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細胞、H-7721細胞
BXPC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARPE-19細胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細胞、H-7721細胞
LUDLU 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC9204細胞、CCD841CoTr細胞、NPC-TW-039細胞
624-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞、aNK細胞、NUGC-2細胞
NCI-H28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nittby-Salford 1細胞、L929(NCTC)細胞、H774細胞
T 98 G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHs74Int細胞、MLA144細胞、MPC-83細胞
Metastatic Variant 522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR-75-30細胞、MV3細胞、MKN-74細胞
NCI-H520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs888T細胞、DC2.4細胞、HIEC-6細胞
Hs 578.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OUMS-23細胞、CT26WT細胞、UMUC-14細胞
HRA 19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞、NCI-H2444細胞、L02細胞
H69細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-50細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞、PG [Human lung carcinoma]細胞
OVCAR.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero C1008細胞、SKNEP1細胞、Madin Darby Canine Kidney細胞
TOV-112D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECGI10細胞、HEK293-H細胞、Hs68細胞
SUDHL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-10 Attached細胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞、RGC-5細胞
TE6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEF細胞、Hs 274.T細胞、DLM8細胞
ARH-77細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RFL-6細胞、NCI-N87細胞、HEK/EBNA細胞
H2126細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMC-HN-8細胞、NCI-HUT-520細胞、K562/ADP細胞
HA1800細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUSMC細胞、SUDHL-10細胞、K7M2-WT細胞
Sc-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS 4;11細胞、SCI1細胞、D283MED細胞
MM1-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NR8383細胞、L-M (TK-)細胞、UMRC2細胞
Tu 212細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-187細胞、769P細胞、ssMCF7細胞
Clone 166細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-33Co細胞、COLO 320F細胞、SV40 MES 13細胞
T/G HA-VSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-433細胞、PLC/PRF5細胞、NCI-H1563細胞
beta-TC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCPAP細胞、TE3細胞、Normal Rat Kidney-52E細胞
B95.8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-3-H-I細胞、HT29細胞、Kit-225-K6細胞
HT115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML-5細胞、SNU5細胞、SKMEL3細胞
RCF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HA細胞、Malme-3 M細胞、MRASMC細胞
REC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H-82細胞、MDA-MB 361細胞、SY5Y細胞
801-D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPEC1細胞、Panc02細胞、PANC0813細胞
NCI-H1993細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PTK 1細胞、HuH-6細胞、P3/NS1/Ag4-1細胞
LTEP-s細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IEC6細胞、CCRF-CEM/S細胞、TR 146細胞
OVCAR-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE10細胞、SW1417細胞、LN-382細胞
Hep II細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1581細胞、Anglne細胞、MHCCLM3細胞
LY-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EJ1細胞、A498細胞、Colon-26細胞
M059J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Reuber-H-35 hepatoma細胞、RPE D407細胞、CFSC-8B細胞
EB3 [Human Burkitt lymphoma] Cell:人伯基特淋巴瘤細胞系
Jurkat (clone E6-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW756細胞、CEM-CCRF (CAMR)細胞、MOLT-16細胞
22Rv-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC7901細胞、HCC-70細胞、Monomac-1細胞
NOR 10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan1細胞、CTX TNA2細胞、Hut292細胞
MZ-CRC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2030細胞、KM933細胞、SUM 102細胞
Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FU-97細胞、OCM-1細胞、WM-451Lu細胞
MOLT 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H676B細胞、NBLAN5T細胞、TMK-1細胞
LP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW480細胞、HCC 94細胞、AML12細胞
SJCRH30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SBC-3細胞、RCC-10RGB細胞、NCI660細胞
SF 539細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU739細胞、HTR-8/SV-neo細胞、NH6細胞
SW1116細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE0520細胞、HT-1197細胞、NCI-H719細胞
C-33-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PVEC細胞、293c18細胞、NCI-H2107細胞
MV(4;11)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC12(高分化)細胞、BT20細胞、H-II-E-C3細胞
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