"PF-382 Cell:人T淋巴細胞瘤細胞系
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
細胞生長:懸浮
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
BXPC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARPE-19細胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細胞、H-7721細胞
NCI-H322T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rh30細胞、H-660細胞、BC-PAP細胞
HUC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H187細胞、Astrocyte type I clone細胞、TE-12細胞
SK.MEL.28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1770細胞、U-251細胞、Z138細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
PF-382 Cell:人T淋巴細胞瘤細胞系
如何把細胞養(yǎng)的形態(tài)更好更漂亮。1.不同的細胞,喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個不僅僅是說培養(yǎng)基的不同,還有就是細胞生長的空間密度問題。有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應該留很少量的細胞,這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。2.對于有些人總是會遇到養(yǎng)的細胞形態(tài)怎么都不好的問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞,如果細胞形態(tài)不好,(或者細胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進行預吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細胞我們只吹打,不消化的);其次,把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。我稱之為“二傳”。呵呵。如果一次效果還不理想,可重復多次。直到找到細胞完美形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。3.關(guān)于培養(yǎng)瓶內(nèi)加入培養(yǎng)基的量的問題。這個是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些細胞反而是培養(yǎng)基少一點相反細胞形態(tài)會長得比較好。(可能也是競爭很大,有優(yōu)勝劣汰吧。呵呵。)對于生長速度快的細胞,易生長的細胞加少一點培養(yǎng)基細胞形態(tài)會更好。但是要注意換液掌握。4.關(guān)于選擇培養(yǎng)瓶的問題。個人發(fā)現(xiàn)生長速度快的細胞在玻璃瓶內(nèi)生長的狀態(tài)會比一次性相對好一些。而對于同一種細胞,在其生長旺盛快速的時期在玻璃瓶內(nèi)的生長狀態(tài)也比內(nèi)好。這可能是因為比玻璃瓶更容易貼壁。生長速度快的細胞在這種相對“更安逸”的環(huán)境里反而長得狀態(tài)不如玻璃瓶好。所以對于生長速度慢的細胞如果想要更漂亮的細胞狀態(tài),比玻璃瓶會好,對于生長速度慢的細胞,玻璃瓶則會更好。同樣,對于同一種細胞,在其生長速度慢的時候,會好一點,比如剛剛復蘇的時候,或者原代培養(yǎng)的時候。而在其生長旺盛的時候,玻璃瓶則相對會好一點。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2傳代
培養(yǎng)細胞真的不難,最關(guān)鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數(shù),傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
WERI-Rb1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GCT細胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞、CAOV3細胞
KYSE-180細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM190細胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞、SKNBE(1)細胞
NCI-HUT-125細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos.2G6.4C10細胞、Jurkat E6細胞、C33細胞
NCIH64細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo-201細胞、HL-1細胞、HOP62細胞
NCIN87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1876細胞、NCIH841細胞、NCI-H2405細胞
細胞生長特性:懸浮生長
PF-382 Cell:人T淋巴細胞瘤細胞系
細胞復蘇相關(guān)注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間,轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇,結(jié)果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞形態(tài)特性:淋巴母細胞
NMCG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00215細胞、TE-32細胞、CAL 62細胞
Nittby-Salford 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FAK+/+細胞、H-1522細胞、Dx5細胞
WM115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NE1細胞、SN12PM6細胞、Jurkat FHCRC細胞
WEHI 231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tn 5B1-4細胞、H1793細胞、H647細胞
NCIH441細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ASH-3細胞、HA細胞、A-204細胞
WM-115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1944細胞、MHHCALL2細胞、SK-BR-3細胞
LTEP-a2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:S37細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞、WRL68細胞
PF-382 Cell:人T淋巴細胞瘤細胞系
GM03571細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fetal Rhesus Kidney-4細胞、HCC-1395細胞、SU86.86細胞
COLO684細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GP5d細胞、MDA134細胞、SNUC1細胞
H-526細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMEC-1細胞、GM05384細胞、Mono-Mac-1細胞
143TK-細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE(2)C細胞、SK Hep1細胞、WRL-68細胞
EOC-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-10細胞、KYSE-30細胞、MTC-TT細胞
TE354T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2008細胞、RPMI6666細胞、PANC 813細胞
TOV-112D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECGI10細胞、HEK293-H細胞、Hs68細胞
L cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMC3細胞、M619細胞、MKN 28細胞
KMST6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MH7A細胞、SUM102PT細胞、NB19-RIKEN細胞
KMST6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MH7A細胞、SUM102PT細胞、NB19-RIKEN細胞
NCI-H2110細胞系相關(guān)產(chǎn)品:E6-1細胞、G-292 clone A141B1細胞、Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞
HEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSA細胞、MPP 89細胞、MDAMB175VII細胞
KTC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMM39細胞、3T3 Swiss Albino細胞、HCC-94細胞
SW-756細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CD-18細胞、H250細胞、PTK2細胞
T 98 G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHs74Int細胞、MLA144細胞、MPC-83細胞
B6Tert-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM-0細胞、EL4細胞、SNT8細胞
NTC-200細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-05.04細胞、MDAMB-231細胞、K7M2 wt細胞
KP-N-YN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-954細胞、Bovine ENDometrial cells細胞、COV504細胞
CHAGOK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caov-3細胞、NCIH1417細胞、H322T細胞
OCILY19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hFOB 1.19細胞、NCIH2029細胞、Walker-256細胞
SuperTube細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1930細胞、TGW-I-nu細胞、LM6細胞
A10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL2細胞、alphaTC clone 6細胞、OV90細胞
L-WRN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-1細胞、NCIH1836細胞、CW-2細胞
PA-TU-8988S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2286細胞、OVCA 420細胞、MDA1386細胞
NCIH1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT26細胞、KYSE50細胞、MOVAS細胞
UCLA-SO-M14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C22細胞、NCIH1563細胞、MLE 12細胞
CEMC7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPDLF細胞、Jijoye細胞、H.Ep. #2細胞
Ball 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM-H2細胞、HMEC1細胞、GM03569B細胞
H23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC-GI細胞、HUSMC細胞、2T細胞
786-O細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-19細胞、Y3M細胞、KU812-F細胞
Caco-2 BBe細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 6666細胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞、Colo-678細胞
NCIH2286細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IHH-4細胞、Roswell Park Memorial Institute 8402細胞、HCT/Taxo1細胞
VMRCRCZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE(2)-C細胞、SL1細胞、NU-GC-3細胞
MDA-1386細胞系相關(guān)產(chǎn)品:786-0細胞、VMM-5A細胞、SK BR 03細胞
MOLM13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 85-1細胞、HCC-1954BL細胞、Hep-3B細胞
KMB 17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF10A細胞、COV362細胞、SNU216細胞
MV4:11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30OHK細胞、K1細胞、BXPC3細胞
BNL.CL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TFK-1細胞、MA-104細胞、NCIH244細胞
HuT-102細胞系相關(guān)產(chǎn)品:102PT細胞、SK-UT-1細胞、P3-X63Ag8細胞
MDA175細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL28細胞、HN6細胞、MDA-MB-435細胞
EPC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M059J細胞、SPCA1細胞、HCC1419細胞
Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan-1細胞、HIT.T15細胞、MB 157細胞
PG13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG-HOS細胞、MDST8細胞、FRTL-5細胞
PF-382 Cell:人T淋巴細胞瘤細胞系
RPMI no. 8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHT-101細胞、G292細胞、Rat Basophilic Leukemia-1細胞
T2(174 x CEM.T2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC.1細胞、H295R細胞、CNE2Z細胞
HSC 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P1-Raji細胞、YES2細胞、SNU368細胞
HPB/ALL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SP-2/0-AG14細胞、H-1299細胞、HGBEC細胞
LAN-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH460細胞、KMM1細胞、BTI-Tn5B14細胞
T-CAM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-52PE細胞、Clone Y1細胞、H1993細胞
VM-CUB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC4細胞、MSCs(mUCMSCs)細胞、SW-948細胞
BC-020細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-8161細胞、Vero E6細胞、B-16細胞
NCI-H889細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3 88 D1細胞、MCF.10A細胞、BCAP37細胞
SK-RC-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PE/CA-PJ34細胞、BT.549細胞、COR-L51細胞
D10.G4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP-126細胞、QGY-7703細胞、MDA-MB157細胞
MOLT 16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:R.K.13細胞、MFE 280細胞、OCI/AML-4細胞
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