"BEP2D Cell:人永生化支氣管上皮細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞背景資料：支氣管；上皮細(xì)胞；HPV１８轉(zhuǎn)化
T98-G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-28細(xì)胞、D341 Med細(xì)胞、OV1/P細(xì)胞
KYSE50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMVEC細(xì)胞、OCI-Ly10細(xì)胞、EJ-1細(xì)胞
RL95細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MMVECs細(xì)胞、P30/0HK細(xì)胞、OCI/AML-2細(xì)胞
EoL-1 cell細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs746-T細(xì)胞、NGP細(xì)胞、143BTK-細(xì)胞
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
BEP2D Cell:人永生化支氣管上皮細(xì)胞系
細(xì)胞消化過程總結(jié)：其實絕大部分細(xì)胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細(xì)胞（絕大部分１min不到）。對于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞，連續(xù)這樣傳代，對細(xì)胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細(xì)胞已經(jīng)獨立分布了（雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個時候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細(xì)胞就是完全成單個細(xì)胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，尤其是腫瘤細(xì)胞的一個特性，無論死活的細(xì)胞都是如此，你可以嘗試，準(zhǔn)備１００%的單個細(xì)胞懸液，貼壁后觀察細(xì)胞，仍然是幾個幾個細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細(xì)胞懸液（不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開）。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的（比如Calu-３細(xì)胞），吹打不超過２０次后（一般１０次即可），成小規(guī)模聚集（１０個細(xì)胞左右），是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細(xì)胞（潤洗方法５min還不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細(xì)胞，一般不超過５min，即可見細(xì)胞成片移動，就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會有難消化的時候，比如tsDC細(xì)胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細(xì)胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細(xì)胞的實驗穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開的時候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
OCI-Ly 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：32Dc3細(xì)胞、LA 4細(xì)胞、SR-786細(xì)胞
RBL2H3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：b.End3細(xì)胞、NCTC 929細(xì)胞、NCI-SNU-449細(xì)胞
NCI-SNU-119細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK clone 49F細(xì)胞、MDAMB134細(xì)胞、H-2172細(xì)胞
4T1.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHG-44細(xì)胞、143 B細(xì)胞、Colon26細(xì)胞
TOV112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKHEP-1細(xì)胞、DU145細(xì)胞、Hs683細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁
BEP2D Cell:人永生化支氣管上皮細(xì)胞系
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細(xì)胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細(xì)胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細(xì)胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細(xì)胞濃度過低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細(xì)胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
SKLMS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA2D1細(xì)胞、ASPC1細(xì)胞、16-HBE14o細(xì)胞
HEK 293 c18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBEpiC細(xì)胞、OVCAR 420細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細(xì)胞
Z138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H520細(xì)胞、HeLa 229細(xì)胞、KATOIII細(xì)胞
NBL-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL952細(xì)胞、H-2085細(xì)胞、WSUDLCL2細(xì)胞
NCIH446細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Medical University of Graz-Chordoma 1細(xì)胞、Ketr3細(xì)胞、HRA 19細(xì)胞
Chang liver細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COS-7細(xì)胞、IB-RS2細(xì)胞、L-6TG細(xì)胞
HCC2185細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL-7402細(xì)胞、CCD-33Co細(xì)胞、B16/F0細(xì)胞
BEP2D Cell:人永生化支氣管上皮細(xì)胞系
TSU-Pr1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1568細(xì)胞、COLO-829細(xì)胞、R.K.13細(xì)胞
HPMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hela-mock細(xì)胞、GEO細(xì)胞、FAK+/+細(xì)胞
MCF7ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-5細(xì)胞、A549ATCC細(xì)胞、BrCL12細(xì)胞
GM03671C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JTC-28細(xì)胞、MCF7ADR細(xì)胞、U-118 MG細(xì)胞
NCI-H1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-HUT-520細(xì)胞、MESSA細(xì)胞、H-748細(xì)胞
NCI660細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：87 MG細(xì)胞、NCI-H23細(xì)胞、MV 4;11細(xì)胞
TE-671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM8細(xì)胞、P3/NS1/Ag4-1細(xì)胞、ROS 17/28細(xì)胞
PLA801-95C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-HUT-292細(xì)胞、SK Mel 1細(xì)胞、H841細(xì)胞
FRhK-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IEC-18細(xì)胞、EA hy 926細(xì)胞、WEHI-164細(xì)胞
FRhK-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IEC-18細(xì)胞、EA hy 926細(xì)胞、WEHI-164細(xì)胞
NGP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-C1細(xì)胞、K299細(xì)胞、MRC-9細(xì)胞
HeLa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc2_03細(xì)胞、SK-N-SH細(xì)胞、PC-9S1細(xì)胞
3AO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TH1細(xì)胞、H711細(xì)胞、RN細(xì)胞
CAMA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL-7702細(xì)胞、MX-1細(xì)胞、2V6.11細(xì)胞
MILE SVEN 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN3 CA細(xì)胞、Ha Fe細(xì)胞、GM04154細(xì)胞
CD-18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16 melanoma F10細(xì)胞、NCIH1573細(xì)胞、RAEC細(xì)胞
NBLS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEF細(xì)胞、RT-BM 1細(xì)胞、RK 13細(xì)胞
NCI-H358細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI Ly3細(xì)胞、3T3F442A細(xì)胞、WPMY1細(xì)胞
SCH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP T1細(xì)胞、Metastatic Variant 522細(xì)胞、DoHH-2細(xì)胞
CMT 93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FaDu細(xì)胞、Hs445細(xì)胞、P3/NS-1細(xì)胞
H1666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 888.Lu細(xì)胞、H-2122細(xì)胞、LA795細(xì)胞
CV-1.K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVMANA細(xì)胞、Ku812F細(xì)胞、RH8994細(xì)胞
Panc-8_13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUV-EC-C細(xì)胞、KMST6細(xì)胞、NCIH838細(xì)胞
AMO1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO-AS-45-1細(xì)胞、MHCC 97-L細(xì)胞、OPM2細(xì)胞
BPH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U118MG細(xì)胞、MDA-MB-435-S細(xì)胞、Lewis lung carcinoma line 1細(xì)胞
Huh7.5.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H716細(xì)胞、MM96L細(xì)胞、LoMeT-ccRcc細(xì)胞
Rh30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 115細(xì)胞、Ramos.G6.C10細(xì)胞、JM-Jurkat細(xì)胞
H2172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：alphaTC clone 6細(xì)胞、Med 341細(xì)胞、MKN74細(xì)胞
WSU-DLCL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL-95-2細(xì)胞、MIO-M1細(xì)胞、CEM/C1細(xì)胞
Oka-C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-719細(xì)胞、NCI-H322細(xì)胞、HHFK細(xì)胞
3-LL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 966 SK細(xì)胞、SRS-82細(xì)胞、SW-954細(xì)胞
HEL-299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EoL-1細(xì)胞、TE3A細(xì)胞、NCIH810細(xì)胞
SBC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-M[TK-]細(xì)胞、RPE1細(xì)胞、WERI Rb-1細(xì)胞
KM933細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Psi-2 DAP細(xì)胞、SK-Mel1細(xì)胞、BT549細(xì)胞
L-Wnt-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E細(xì)胞、A-172細(xì)胞、RPMI-1788細(xì)胞
SO-RB50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U118-MG細(xì)胞、NP69SV40T細(xì)胞、H-660細(xì)胞
SUIT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：rRMECs細(xì)胞、PG-4(S+L-)細(xì)胞、CHO Lec1細(xì)胞
WILL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Baby Hamster Kidney from litter No. 21細(xì)胞、BMF細(xì)胞、NCIH2172細(xì)胞
NFS 60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO細(xì)胞、NCI-SNU-761細(xì)胞、Malme3M細(xì)胞
BC-028細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHC細(xì)胞、H446細(xì)胞、IAR20細(xì)胞
ROS17/2.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERI細(xì)胞、HOS TE 85細(xì)胞、SKNAS細(xì)胞
CX-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIA-Pa-Ca-2細(xì)胞、BV-2細(xì)胞、GM03320細(xì)胞
A 72細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AC29細(xì)胞、SW-579細(xì)胞、UPCISCC154細(xì)胞
BEP2D Cell:人永生化支氣管上皮細(xì)胞系
Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCLY8細(xì)胞、HCC-15細(xì)胞、HPAF細(xì)胞
MLE12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KATO 3細(xì)胞、Hs 606.T細(xì)胞、SK-ES1細(xì)胞
AG06814-M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774 A.1細(xì)胞、SNU-761細(xì)胞、Walker/LLC-WRC256細(xì)胞
RAG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFTF細(xì)胞、OSRC2細(xì)胞、CD18細(xì)胞
Hs940-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2228細(xì)胞、SNU-886細(xì)胞、DMS 79細(xì)胞
JB6 Cl 30-7b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-ALL-1細(xì)胞、Jurkat-77細(xì)胞、NCI-H2030細(xì)胞
SCCVII/St細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-327細(xì)胞、LNCaP-ATCC細(xì)胞、LS 180細(xì)胞
SK_N_BE2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSTO-211 H細(xì)胞、NCI-H865細(xì)胞、NCIH2126細(xì)胞
Mv 1 Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sf-21細(xì)胞、C4-1細(xì)胞、RL-65細(xì)胞
COLO 684細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-620細(xì)胞、AtT-20細(xì)胞、SKMEL2細(xì)胞
RGC-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI7666細(xì)胞、RKO-AS45-1細(xì)胞、RCC10 RGB細(xì)胞
MDAPC2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M07e細(xì)胞、R1800[RA]細(xì)胞、SuDHL 5細(xì)胞
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