"BEP2D Cell:人永生化支氣管上皮細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：支氣管；上皮細胞；HPV１８轉(zhuǎn)化
T98-G細胞系相關產(chǎn)品：H-28細胞、D341 Med細胞、OV1/P細胞
KYSE50細胞系相關產(chǎn)品：HMVEC細胞、OCI-Ly10細胞、EJ-1細胞
RL95細胞系相關產(chǎn)品：MMVECs細胞、P30/0HK細胞、OCI/AML-2細胞
EoL-1 cell細胞系相關產(chǎn)品：Hs746-T細胞、NGP細胞、143BTK-細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
BEP2D Cell:人永生化支氣管上皮細胞系
細胞消化過程總結(jié)：其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞（絕大部分１min不到）。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了（雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個時候應該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液（不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開）。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的（比如Calu-３細胞），吹打不超過２０次后（一般１０次即可），成小規(guī)模聚集（１０個細胞左右），是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞（潤洗方法５min還不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
培養(yǎng)細胞真的不難，最關鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
OCI-Ly 3細胞系相關產(chǎn)品：32Dc3細胞、LA 4細胞、SR-786細胞
RBL2H3細胞系相關產(chǎn)品：b.End3細胞、NCTC 929細胞、NCI-SNU-449細胞
NCI-SNU-119細胞系相關產(chǎn)品：NRK clone 49F細胞、MDAMB134細胞、H-2172細胞
4T1.2細胞系相關產(chǎn)品：SHG-44細胞、143 B細胞、Colon26細胞
TOV112細胞系相關產(chǎn)品：SKHEP-1細胞、DU145細胞、Hs683細胞
細胞生長特性：貼壁
BEP2D Cell:人永生化支氣管上皮細胞系
細胞復蘇相關注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
SKLMS-1細胞系相關產(chǎn)品：NTERA2D1細胞、ASPC1細胞、16-HBE14o細胞
HEK 293 c18細胞系相關產(chǎn)品：HBEpiC細胞、OVCAR 420細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞
Z138細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H520細胞、HeLa 229細胞、KATOIII細胞
NBL-3細胞系相關產(chǎn)品：RL952細胞、H-2085細胞、WSUDLCL2細胞
NCIH446細胞系相關產(chǎn)品：Medical University of Graz-Chordoma 1細胞、Ketr3細胞、HRA 19細胞
Chang liver細胞系相關產(chǎn)品：COS-7細胞、IB-RS2細胞、L-6TG細胞
HCC2185細胞系相關產(chǎn)品：BEL-7402細胞、CCD-33Co細胞、B16/F0細胞
BEP2D Cell:人永生化支氣管上皮細胞系
TSU-Pr1細胞系相關產(chǎn)品：H1568細胞、COLO-829細胞、R.K.13細胞
HPMEC細胞系相關產(chǎn)品：Hela-mock細胞、GEO細胞、FAK+/+細胞
MCF7ADR細胞系相關產(chǎn)品：SNU-5細胞、A549ATCC細胞、BrCL12細胞
GM03671C細胞系相關產(chǎn)品：JTC-28細胞、MCF7ADR細胞、U-118 MG細胞
NCI-H1395細胞系相關產(chǎn)品：NCI-HUT-520細胞、MESSA細胞、H-748細胞
NCI660細胞系相關產(chǎn)品：87 MG細胞、NCI-H23細胞、MV 4;11細胞
TE-671細胞系相關產(chǎn)品：LM8細胞、P3/NS1/Ag4-1細胞、ROS 17/28細胞
PLA801-95C細胞系相關產(chǎn)品：NCI-HUT-292細胞、SK Mel 1細胞、H841細胞
FRhK-4細胞系相關產(chǎn)品：IEC-18細胞、EA hy 926細胞、WEHI-164細胞
FRhK-4細胞系相關產(chǎn)品：IEC-18細胞、EA hy 926細胞、WEHI-164細胞
NGP細胞系相關產(chǎn)品：CEM-C1細胞、K299細胞、MRC-9細胞
HeLa細胞系相關產(chǎn)品：Panc2_03細胞、SK-N-SH細胞、PC-9S1細胞
3AO細胞系相關產(chǎn)品：TH1細胞、H711細胞、RN細胞
CAMA1細胞系相關產(chǎn)品：HL-7702細胞、MX-1細胞、2V6.11細胞
MILE SVEN 1細胞系相關產(chǎn)品：AN3 CA細胞、Ha Fe細胞、GM04154細胞
CD-18細胞系相關產(chǎn)品：B16 melanoma F10細胞、NCIH1573細胞、RAEC細胞
NBLS細胞系相關產(chǎn)品：CEF細胞、RT-BM 1細胞、RK 13細胞
NCI-H358細胞系相關產(chǎn)品：OCI Ly3細胞、3T3F442A細胞、WPMY1細胞
SCH細胞系相關產(chǎn)品：SUP T1細胞、Metastatic Variant 522細胞、DoHH-2細胞
CMT 93細胞系相關產(chǎn)品：FaDu細胞、Hs445細胞、P3/NS-1細胞
H1666細胞系相關產(chǎn)品：Hs 888.Lu細胞、H-2122細胞、LA795細胞
CV-1.K細胞系相關產(chǎn)品：OVMANA細胞、Ku812F細胞、RH8994細胞
Panc-8_13細胞系相關產(chǎn)品：HUV-EC-C細胞、KMST6細胞、NCIH838細胞
AMO1細胞系相關產(chǎn)品：RKO-AS-45-1細胞、MHCC 97-L細胞、OPM2細胞
BPH1細胞系相關產(chǎn)品：U118MG細胞、MDA-MB-435-S細胞、Lewis lung carcinoma line 1細胞
Huh7.5.1細胞系相關產(chǎn)品：H716細胞、MM96L細胞、LoMeT-ccRcc細胞
Rh30細胞系相關產(chǎn)品：HT 115細胞、Ramos.G6.C10細胞、JM-Jurkat細胞
H2172細胞系相關產(chǎn)品：alphaTC clone 6細胞、Med 341細胞、MKN74細胞
WSU-DLCL2細胞系相關產(chǎn)品：RL-95-2細胞、MIO-M1細胞、CEM/C1細胞
Oka-C1細胞系相關產(chǎn)品：H-719細胞、NCI-H322細胞、HHFK細胞
3-LL細胞系相關產(chǎn)品：CCD 966 SK細胞、SRS-82細胞、SW-954細胞
HEL-299細胞系相關產(chǎn)品：EoL-1細胞、TE3A細胞、NCIH810細胞
SBC3細胞系相關產(chǎn)品：L-M[TK-]細胞、RPE1細胞、WERI Rb-1細胞
KM933細胞系相關產(chǎn)品：Psi-2 DAP細胞、SK-Mel1細胞、BT549細胞
L-Wnt-3A細胞系相關產(chǎn)品：MC3T3-E細胞、A-172細胞、RPMI-1788細胞
SO-RB50細胞系相關產(chǎn)品：U118-MG細胞、NP69SV40T細胞、H-660細胞
SUIT2細胞系相關產(chǎn)品：rRMECs細胞、PG-4(S+L-)細胞、CHO Lec1細胞
WILL-2細胞系相關產(chǎn)品：Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞、BMF細胞、NCIH2172細胞
NFS 60細胞系相關產(chǎn)品：CHO細胞、NCI-SNU-761細胞、Malme3M細胞
BC-028細胞系相關產(chǎn)品：FHC細胞、H446細胞、IAR20細胞
ROS17/2.8細胞系相關產(chǎn)品：WERI細胞、HOS TE 85細胞、SKNAS細胞
CX-1細胞系相關產(chǎn)品：MIA-Pa-Ca-2細胞、BV-2細胞、GM03320細胞
A 72細胞系相關產(chǎn)品：AC29細胞、SW-579細胞、UPCISCC154細胞
BEP2D Cell:人永生化支氣管上皮細胞系
Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞系相關產(chǎn)品：OCLY8細胞、HCC-15細胞、HPAF細胞
MLE12細胞系相關產(chǎn)品：KATO 3細胞、Hs 606.T細胞、SK-ES1細胞
AG06814-M細胞系相關產(chǎn)品：J774 A.1細胞、SNU-761細胞、Walker/LLC-WRC256細胞
RAG細胞系相關產(chǎn)品：HFTF細胞、OSRC2細胞、CD18細胞
Hs940-T細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2228細胞、SNU-886細胞、DMS 79細胞
JB6 Cl 30-7b細胞系相關產(chǎn)品：T-ALL-1細胞、Jurkat-77細胞、NCI-H2030細胞
SCCVII/St細胞系相關產(chǎn)品：Panc-327細胞、LNCaP-ATCC細胞、LS 180細胞
SK_N_BE2C細胞系相關產(chǎn)品：MSTO-211 H細胞、NCI-H865細胞、NCIH2126細胞
Mv 1 Lu細胞系相關產(chǎn)品：Sf-21細胞、C4-1細胞、RL-65細胞
COLO 684細胞系相關產(chǎn)品：NCI-SNU-620細胞、AtT-20細胞、SKMEL2細胞
RGC-6細胞系相關產(chǎn)品：RPMI7666細胞、RKO-AS45-1細胞、RCC10 RGB細胞
MDAPC2B細胞系相關產(chǎn)品：M07e細胞、R1800[RA]細胞、SuDHL 5細胞
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關鍵字： BEP2D Cell:人永生化支氣管上皮細胞系
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