"SG231 Cell:人膽管上皮癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞背景資料:肝內(nèi)膽管癌;男性
PTK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JIII細(xì)胞、OVCAR3細(xì)胞、MDA-MB-435 S細(xì)胞
NCI-H292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FC33細(xì)胞、GM04671細(xì)胞、Eca-109細(xì)胞
Hs940.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 HEK細(xì)胞、UMNSAH-DF 1細(xì)胞、IGROV細(xì)胞
HCC0078細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT144細(xì)胞、OVCAR-4細(xì)胞、HRCEC細(xì)胞
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
SG231 Cell:人膽管上皮癌細(xì)胞系
細(xì)胞消化過(guò)程總結(jié):其實(shí)絕大部分細(xì)胞消化的時(shí)候是只要用胰酶潤(rùn)洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無(wú)法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細(xì)胞(絕大部分1min不到)。對(duì)于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞,連續(xù)這樣傳代,對(duì)細(xì)胞傷害很大。簡(jiǎn)單的程序是PBS潤(rùn)洗吸去,胰酶潤(rùn)洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層,只要能移動(dòng)了,多半呈沙壯移動(dòng),其實(shí)已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞,這是沒(méi)有必要的。一般能移動(dòng)了,說(shuō)明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了(雖然沒(méi)有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個(gè)時(shí)候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細(xì)胞就是完全成單個(gè)細(xì)胞懸液,之后在貼壁的過(guò)程中仍然會(huì)聚集,這個(gè)是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,尤其是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)特性,無(wú)論死活的細(xì)胞都是如此,你可以嘗試,準(zhǔn)備100%的單個(gè)細(xì)胞懸液,貼壁后觀察細(xì)胞,仍然是幾個(gè)幾個(gè)細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過(guò)幾個(gè)小時(shí)就拿出來(lái)吹打成單細(xì)胞懸液(不要笑,這個(gè)是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯(cuò)誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個(gè)一個(gè)分開(kāi))。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來(lái),這個(gè)時(shí)候即使是成片的(比如Calu-3細(xì)胞),吹打不超過(guò)20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個(gè)細(xì)胞左右),是正常的,不要試圖再去延長(zhǎng)消化時(shí)間,或者像有的同學(xué)那樣吹打1h,等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細(xì)胞(潤(rùn)洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細(xì)胞,一般不超過(guò)5min,即可見(jiàn)細(xì)胞成片移動(dòng),就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候,比如tsDC細(xì)胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見(jiàn)問(wèn)題總結(jié):1)一般客戶拿到細(xì)胞后,應(yīng)該注意什么?客戶收到細(xì)胞后先不開(kāi)蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,200X各一張),排除細(xì)胞本身污染的情況;收到細(xì)胞未開(kāi)封,出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時(shí)如無(wú)異常情況,請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過(guò)80%匯合度時(shí),將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過(guò)80%匯合度時(shí),請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細(xì)胞多久能到,是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細(xì)胞前請(qǐng)確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細(xì)胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細(xì)胞大都無(wú)法立即適應(yīng),造成細(xì)胞無(wú)法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源,所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來(lái)自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無(wú)法存活。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
Hs 688(A).T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC25細(xì)胞、E.G7-OVA細(xì)胞、SK LU 1細(xì)胞
MILE SVEN 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AN3 CA細(xì)胞、Ha Fe細(xì)胞、GM04154細(xì)胞
Hs 729T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA175細(xì)胞、3T3-F442A細(xì)胞、SW1463細(xì)胞
8305C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN28細(xì)胞、NCI-H719細(xì)胞、SK-MEL2細(xì)胞
Biologics Standards-Cercopithecus-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-810細(xì)胞、KAT-5細(xì)胞、MB39細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁
SG231 Cell:人膽管上皮癌細(xì)胞系
細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問(wèn)題分析:總結(jié)1:復(fù)蘇過(guò)程沒(méi)有問(wèn)題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當(dāng)然也需要考慮血清問(wèn)題,還有確信拿來(lái)的細(xì)胞沒(méi)問(wèn)題??偨Y(jié)2:首先應(yīng)該懷疑凍存,實(shí)際上復(fù)蘇出問(wèn)題的可能非常小,因?yàn)椴僮骱?jiǎn)單,而且死板。1、你凍存的時(shí)候是不是消化的時(shí)間過(guò)長(zhǎng),這是一般人所注意不到的,即使書(shū)上也不講這個(gè)問(wèn)題,太長(zhǎng)的消化時(shí)間會(huì)讓細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復(fù)蘇的時(shí)候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會(huì)死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過(guò)7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時(shí)候是不是把DMSO混均勻,這個(gè)有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格,很多人容易忘卻這個(gè)事情,因?yàn)檫@個(gè)東西流程長(zhǎng)。6、如果你細(xì)胞污染,你是否能很快看到,我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個(gè)角度講建議去除離心這步。7、你的細(xì)胞在凍存前是否過(guò)密。還有,不贊成孵箱污染這個(gè)概念的,所有在一個(gè)孵箱里的細(xì)胞都污染一個(gè)細(xì)菌的話,這個(gè)細(xì)菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因?yàn)榉跸錈o(wú)論你如何處理都有大量的細(xì)菌,問(wèn)題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問(wèn)題,這個(gè)很重要,不能靠猜,否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題,這個(gè)見(jiàn)得太多了,別不當(dāng)會(huì)事。
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
OVCAR-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:578T細(xì)胞、Epstein-Barr-1細(xì)胞、BJA-B1細(xì)胞
CO115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK.MEL.5細(xì)胞、PECAPJ34細(xì)胞、MADB-106細(xì)胞
MCF7/WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB134VI細(xì)胞、MMAc-Serum Free細(xì)胞、C26細(xì)胞
OKT 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-638細(xì)胞、ROS17/2.8細(xì)胞、SK-N-BE(2)-M17細(xì)胞
Hep II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1581細(xì)胞、Anglne細(xì)胞、MHCCLM3細(xì)胞
HOMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MES細(xì)胞、KYSE-510細(xì)胞、BEL 7404細(xì)胞
H9c2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU_145細(xì)胞、HOS(TE85)細(xì)胞、FOX-NY細(xì)胞
SG231 Cell:人膽管上皮癌細(xì)胞系
SNU-719細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HcerEpic細(xì)胞、P36細(xì)胞、Sp2/0-Ag14細(xì)胞
HTR8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JHH2細(xì)胞、Farage OL細(xì)胞、HDQP1細(xì)胞
DMS114細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LL/2細(xì)胞、Nb 2細(xì)胞、HCC-9204細(xì)胞
TW01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI3B細(xì)胞、CCD966SK細(xì)胞、SKRC-39細(xì)胞
NCIH1993細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3AA細(xì)胞、KPL4細(xì)胞、HUV-EC-C細(xì)胞
Pro-5WgaRI3C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-423細(xì)胞、NCIH69細(xì)胞、Hs 934.T細(xì)胞
58F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL CL2細(xì)胞、H1395細(xì)胞、NCI-H2135細(xì)胞
3T6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L cells細(xì)胞、alpha TC1-6細(xì)胞、OV 1063細(xì)胞
Colo-201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-92 MI細(xì)胞、BEL 7404細(xì)胞、Ha Fe細(xì)胞
Colo-201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-92 MI細(xì)胞、BEL 7404細(xì)胞、Ha Fe細(xì)胞
AA-Mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1463細(xì)胞、L 929細(xì)胞、HT-1080細(xì)胞
NHRF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-341 Med細(xì)胞、MB 157細(xì)胞、IOSE 29細(xì)胞
293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WC00044細(xì)胞、A-2058細(xì)胞、4175細(xì)胞
SU8686細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BRL3A細(xì)胞、PANC-28細(xì)胞、LuCL4細(xì)胞
C-33 A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ST2細(xì)胞、KRC-Y細(xì)胞、VP 229細(xì)胞
SVEC 4-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-711細(xì)胞、RMG-1細(xì)胞、GLC-82細(xì)胞
Ca759細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:130T細(xì)胞、C3H10T1/2CL8細(xì)胞、OAC-P4C細(xì)胞
NMCG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00215細(xì)胞、TE-32細(xì)胞、CAL 62細(xì)胞
SKNMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU812-F細(xì)胞、BC-028細(xì)胞、CAL 39細(xì)胞
ST-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 756細(xì)胞、HEK-293-H細(xì)胞、JOSK-M細(xì)胞
T47D:A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL-45細(xì)胞、FLC7細(xì)胞、OACP4 C細(xì)胞
A704細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP229細(xì)胞、HFLS細(xì)胞、Hs606細(xì)胞
OS-RC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC2細(xì)胞、SF-767細(xì)胞、3T6細(xì)胞
NCTC 3960細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-157細(xì)胞、HOS/MNNG細(xì)胞、JAR細(xì)胞
MRC-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh7.5細(xì)胞、SW 780細(xì)胞、ST2細(xì)胞
LAN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCE細(xì)胞、SKG-IIIa細(xì)胞、Mac-1細(xì)胞
KYSE270細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:2780CP細(xì)胞、P3JHR1細(xì)胞、BALB/3T3細(xì)胞
ECV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:S91細(xì)胞、NCIH522細(xì)胞、H1954細(xì)胞
EAhy926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs.27細(xì)胞、C-33 A細(xì)胞、NCI-322細(xì)胞
SCL-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-266-4細(xì)胞、UCLA-SO-M20細(xì)胞、NCI-H647細(xì)胞
SRA01/04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-149PT細(xì)胞、MAEC細(xì)胞、Colo-201細(xì)胞
NCIH847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUPM2細(xì)胞、Pa16C細(xì)胞、H23細(xì)胞
HOS-TE85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SkMel31細(xì)胞、MS1細(xì)胞、OCI/AML-4細(xì)胞
WM35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-172細(xì)胞、293F細(xì)胞、H-2286細(xì)胞
Kupffer細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-729-T細(xì)胞、HN 4細(xì)胞、SUM 190PT細(xì)胞
A549/ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU-4475細(xì)胞、ReNcell CX細(xì)胞、CCD-841CoTr細(xì)胞
KYSE-70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK/293細(xì)胞、NCI-H82細(xì)胞、Nthy-ori 3.1細(xì)胞
MPP-89細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Adeno-293細(xì)胞、COLO 738細(xì)胞、IBRS2細(xì)胞
CCC-HPF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:rHSC-99細(xì)胞、COLO-205細(xì)胞、U138-MG細(xì)胞
MCAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM15452細(xì)胞、293T細(xì)胞、McA-RH 7777細(xì)胞
87MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJA-B-1細(xì)胞、SK-RC 42細(xì)胞、GA10細(xì)胞
RPMI1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE50細(xì)胞、RSC-96細(xì)胞、HASMC細(xì)胞
NCI-H1105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1694細(xì)胞、RKO-E6細(xì)胞、Sup T-1細(xì)胞
SG231 Cell:人膽管上皮癌細(xì)胞系
BT.549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1755細(xì)胞、KU19-19細(xì)胞、DV90細(xì)胞
COLO 320 DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1197.T細(xì)胞、WPMY1細(xì)胞、SK-MEL-2-LUC細(xì)胞
Earle's L cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGECs細(xì)胞、NCI-SNU-620細(xì)胞、JHH7細(xì)胞
C1498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EB-3細(xì)胞、BJA-B1細(xì)胞、Mono Mac 1細(xì)胞
OsACL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Instituto Biologico-Rim Suino-2細(xì)胞、LU65細(xì)胞、SUM-159-PT細(xì)胞
T98 G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon38細(xì)胞、MMQ細(xì)胞、32D.cl3細(xì)胞
NCI H929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 159細(xì)胞、J82COT細(xì)胞、CCRF-CEM細(xì)胞
V79-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM96L細(xì)胞、Capan1細(xì)胞、HEY-A8細(xì)胞
UACC 812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL-952細(xì)胞、VMM5細(xì)胞、Tu212細(xì)胞
LY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H7721細(xì)胞、H35 Reuber細(xì)胞、Karpas-422細(xì)胞
H23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC-GI細(xì)胞、HUSMC細(xì)胞、2T細(xì)胞
H-460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLC-82細(xì)胞、RMG-1細(xì)胞、MH-S細(xì)胞
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