"XWLC-05 Cell:人肺腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞背景資料：肺癌；女性
MDA-MB453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD966SK細(xì)胞、NCI-H1734細(xì)胞、NCIH2135細(xì)胞
MONO-MAC 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2135細(xì)胞、P30/OHK細(xì)胞、EOC 20細(xì)胞
GM06141B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGH-U1 (EJ)細(xì)胞、SN12-PM6細(xì)胞、H-719細(xì)胞
SN-12C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BRL 3A細(xì)胞、KM.12細(xì)胞、MCF7細(xì)胞
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
XWLC-05 Cell:人肺腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞培養(yǎng)過程中相關(guān)問題總結(jié)：懸浮性細(xì)胞應(yīng)如何繼代處理？一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細(xì)胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高，直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細(xì)胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶，加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當(dāng)濃度，重復(fù)前述步驟即可。欲將一般動物細(xì)胞離心下來，其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速？欲回收動物細(xì)胞，其離心速率一般為３００xg(約１,０００rpm)，５-１０分鐘，過高之轉(zhuǎn)速，將造成細(xì)胞死亡；細(xì)胞之接種密度為何？依照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細(xì)胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細(xì)胞無法生長之一重要原因；細(xì)胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何？動物細(xì)胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原來細(xì)胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意：由于DMSO稀釋時會放出大量熱能，故不可將DMSO直接加入細(xì)胞液中，必須使用前先行配制完成；DMSO之等級和無菌過濾之方式為何？冷凍保存使用之DMSO等級，必須為Tissue culture grade之DMSO，其本身即為無菌狀況，次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中，保存于４°C，避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì)，并可減少污染之機(jī)會。若要過濾DMSO，則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜；冷凍保存細(xì)胞之方法？冷凍保存方法一：冷凍管置于４°C ３０~６０分鐘→ (-２０°C ３０分鐘)→-８０°C １６~１８小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-２０°C不可超過１小時，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；細(xì)胞欲冷凍保存時，細(xì)胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細(xì)胞濃度？冷凍管內(nèi)細(xì)胞數(shù)目一般為１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤細(xì)胞則以５x１０(６)cells/ml vial為宜；應(yīng)如何避免細(xì)胞污染？細(xì)胞污染的種類可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因?yàn)闊o菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法；如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時，應(yīng)如何處理？直接滅菌后丟棄之。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時傳代？體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當(dāng)一個細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時候，它就會停止生長，及時傳代后，細(xì)胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染；試劑保存不當(dāng)；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度；讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補(bǔ)加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺操作細(xì)胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
TYKnu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1915細(xì)胞、OVSAHO細(xì)胞、Fortner's melanotic melanoma #3細(xì)胞
OCI-Ly 18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：8305C細(xì)胞、F81細(xì)胞、P-3J細(xì)胞
Hs739T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 7細(xì)胞、B-cell with DC Morphology細(xì)胞、H-2171細(xì)胞
KMBC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN-28細(xì)胞、TE 85 ClF-5細(xì)胞、Neukoplast細(xì)胞
H-2029細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC-929細(xì)胞、UM-UC3細(xì)胞、SK MES 1細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁
XWLC-05 Cell:人肺腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時要注意以下幾點(diǎn)：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個月充氮一次。液氮溫度達(dá)-１９６℃，使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達(dá)瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
NCI522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-kb2細(xì)胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細(xì)胞、OCI-LY-19細(xì)胞
SN-12C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BRL 3A細(xì)胞、KM.12細(xì)胞、MCF7細(xì)胞
GB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 680N細(xì)胞、HL1細(xì)胞、rUCMSCs細(xì)胞
D341 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A172細(xì)胞、ZR-75-30細(xì)胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).細(xì)胞
LA-N-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Merwin Plasma Cell tumor-11細(xì)胞、NIH:OVCAR-8細(xì)胞、LAD-2細(xì)胞
A-431細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL95-2細(xì)胞、Raji細(xì)胞、SKBR-3細(xì)胞
HCT.116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SO-Rb 50細(xì)胞、P3-X63-Ag8-653細(xì)胞、SHSY-5Y細(xì)胞
XWLC-05 Cell:人肺腺癌細(xì)胞系
RCS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375細(xì)胞、GM17219細(xì)胞、PANC3.27細(xì)胞
NCI-H1048細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 85.T細(xì)胞、CMT 167細(xì)胞、RAG細(xì)胞
MMAc-Serum Free細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly18細(xì)胞、TE-4細(xì)胞、KTCTL140細(xì)胞
HCC4006細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KAT-5細(xì)胞、HCC-94細(xì)胞、H-1184細(xì)胞
COLO-738細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 1846細(xì)胞、M3 Clone M-3細(xì)胞、GM05862細(xì)胞
KB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-ALL1細(xì)胞、H-2171細(xì)胞、SUM-159PT細(xì)胞
HEP3B2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hos TE-85細(xì)胞、H647細(xì)胞、HMSC細(xì)胞
Molm 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA2-cloneD1細(xì)胞、PNT1/A細(xì)胞、SK-NSH細(xì)胞
YTMLC-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ONS76細(xì)胞、CEM.C1細(xì)胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細(xì)胞
YTMLC-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ONS76細(xì)胞、CEM.C1細(xì)胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細(xì)胞
Hs 832(C).T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2085細(xì)胞、NW38細(xì)胞、HCC-202細(xì)胞
X63Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT144mel細(xì)胞、Leydig細(xì)胞、SW-962細(xì)胞
ID8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPI-2I細(xì)胞、RA 1細(xì)胞、FHs 74 Int細(xì)胞
HSF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H10T1/2 clone8細(xì)胞、MGECs細(xì)胞、NCIH2106細(xì)胞
UMUC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JJN3細(xì)胞、hTERT-RPE1細(xì)胞、Rat Lung-65細(xì)胞
2T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293A細(xì)胞、rUCMSCs細(xì)胞、NCM460細(xì)胞
Baby Hamster Kidney 21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2087細(xì)胞、DHBE細(xì)胞、H520細(xì)胞
T-ALL 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR75-30細(xì)胞、NUGC-3細(xì)胞、OCI-Ly 19細(xì)胞
D-341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHA細(xì)胞、COLO684細(xì)胞、BE2-M17細(xì)胞
SK-BR3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN-74細(xì)胞、DMS-114細(xì)胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1細(xì)胞
IOSE 80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2330細(xì)胞、NALM-6細(xì)胞、FHC細(xì)胞
H2085細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Epstein-Barr-1細(xì)胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞、H1618細(xì)胞
BT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 19細(xì)胞、SHP-77細(xì)胞、SCC25細(xì)胞
M07e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BS-C-1細(xì)胞、SW 1271細(xì)胞、LTEPsm細(xì)胞
McCoy B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU16細(xì)胞、NCIH1373細(xì)胞、BEL-7405細(xì)胞
AsPC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF12A細(xì)胞、HCT-8/V細(xì)胞、LSECs細(xì)胞
NCTC clone 1469細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 729T細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-27細(xì)胞、WM 239細(xì)胞
CCC-HIE-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293EBNA細(xì)胞、293 H細(xì)胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細(xì)胞
3T3-Swiss albino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPTEC/TERT1細(xì)胞、SVG(P12)細(xì)胞、ANA-1細(xì)胞
SUM 52PE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OKa-C-1細(xì)胞、HT 1376細(xì)胞、NCI-H2198細(xì)胞
LC-MS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1963細(xì)胞、SNU601細(xì)胞、NCI-H2170細(xì)胞
NCI-H345細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOVAS-1細(xì)胞、MAC1細(xì)胞、K-1735細(xì)胞
RAW-264.7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1937細(xì)胞、G361細(xì)胞、NCIH2029細(xì)胞
SKNBE(2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：786-0WT細(xì)胞、HEL細(xì)胞、MDCK-2細(xì)胞
C3H10T1/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1573細(xì)胞、PCI-04B細(xì)胞、HCEpiC細(xì)胞
GM03671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-3A細(xì)胞、NCI-H295R細(xì)胞、E304細(xì)胞
H1944細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Giant Cell Tumor細(xì)胞、HFF1細(xì)胞、8505C細(xì)胞
RA 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC 1469細(xì)胞、A549 ATCC細(xì)胞、A-704細(xì)胞
RKO-AS45-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0827細(xì)胞、MDA-MB-468-RED細(xì)胞、OCI Ly19細(xì)胞
HHL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL 5細(xì)胞、NCI-H1963細(xì)胞、LAD2細(xì)胞
HHL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL 5細(xì)胞、NCI-H1963細(xì)胞、LAD2細(xì)胞
Transformed Human Liver Epithelial-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRCC細(xì)胞、TE-1細(xì)胞、S.B.細(xì)胞
CT26-clone 25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRCV細(xì)胞、Hce8693細(xì)胞、SF 539細(xì)胞
XWLC-05 Cell:人肺腺癌細(xì)胞系
NCI-H865細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-6細(xì)胞、AZ-521細(xì)胞、SU-DHL-2細(xì)胞
RPE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞、H-1793細(xì)胞、HFLS細(xì)胞
QGP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H220細(xì)胞、MT-2J細(xì)胞、LS-180細(xì)胞
H-2227細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT1197細(xì)胞、HUT 125細(xì)胞、J.E6-1細(xì)胞
NK-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WPMY1細(xì)胞、CAL-62細(xì)胞、MDA-MB-361細(xì)胞
Chang liver細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COS-7細(xì)胞、IB-RS2細(xì)胞、L-6TG細(xì)胞
Michigan Cancer Foundation-12A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-12細(xì)胞、HSC/mHSC細(xì)胞、CAL27細(xì)胞
PFSK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DC 2.4細(xì)胞、Hs-274-T細(xì)胞、TK 10細(xì)胞
MV4;11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Transformed Human Liver Epithelial-2細(xì)胞、LICR-HN6細(xì)胞、PA1細(xì)胞
NS-I/1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3J2細(xì)胞、WRL-68細(xì)胞、SNUC2B細(xì)胞
NCIH460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc02-H0細(xì)胞、COLO-357細(xì)胞、NCIH292細(xì)胞
HS 445T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA.MB.435細(xì)胞、HTori:3細(xì)胞、HL7702細(xì)胞
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