"Evsa-T Cell:人乳腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞背景資料:乳腺癌;腹水轉(zhuǎn)移;女性
SNU-354細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK RC 20細(xì)胞、Ketr-3細(xì)胞、NCTC-1469細(xì)胞
U266 B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH727細(xì)胞、NHA細(xì)胞、H920細(xì)胞
P30-OHKUBO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB/3T3 (clone A31)細(xì)胞、SW13細(xì)胞、Renal Carcinoma細(xì)胞
Hs-578-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2196細(xì)胞、OKa-C-1細(xì)胞、H-2228細(xì)胞
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
Evsa-T Cell:人乳腺癌細(xì)胞系
因為細(xì)胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系,大部分的細(xì)胞都是要成片生長的,尤其是對于貼壁細(xì)胞,單個細(xì)胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細(xì)胞抱團(tuán)的話,傳代后細(xì)胞是不能貼壁的,這樣抱團(tuán)的細(xì)胞就會死亡。所以,消化傳代的時候一定要將細(xì)胞消化成單個單個的獨立狀態(tài),這個啊是非常考究你的功夫的!細(xì)胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個,因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細(xì)胞。所以必須要在細(xì)胞未脫落之前將其吹打開,受力點就是細(xì)胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴(yán)格控制好消化的程度啊,這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來,又不能太過,一吹就整片脫落,要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細(xì)胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細(xì)胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-2細(xì)胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點就是一定不能等到細(xì)胞長滿的時候才去消化傳代。要在細(xì)胞長到70%左右的時候就要傳代了,一旦發(fā)現(xiàn)細(xì)胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進(jìn)行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞,你在洗的時候如果是用無血清1640去洗細(xì)胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣,用1640培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話,可以用PBS來洗,洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的,對于有些細(xì)胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清,防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先,是很關(guān)鍵的一點。先補充這么多,還會后續(xù)更新。再補充一點:傳代時PBS洗是很重要的一步,最近發(fā)現(xiàn),用PBS就可以把細(xì)胞消化開來。加入PBS放置10-15分鐘,有些需要更長的時間,等到細(xì)胞一個個分離開來的時候,就可以直接吹打下來,但是和胰酶消化一樣,要控制好時間,不能時間太過了,要不然損傷細(xì)胞,細(xì)胞不容易成活,狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細(xì)胞是很管用的。有些細(xì)胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候,或者臨時沒有胰酶了,可以選用此方法。不過一定要試試,看是否適合你的細(xì)胞。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
常見細(xì)胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導(dǎo)致細(xì)胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細(xì)胞生長密度而定,或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換;3)購買的復(fù)蘇細(xì)胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性損傷,以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細(xì)胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Lewis-Lung細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH187細(xì)胞、CCRF細(xì)胞、HCC-1954細(xì)胞
MOPC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-294細(xì)胞、GM3570細(xì)胞、C57 Mouse Tumor 64細(xì)胞
SL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cates-1B細(xì)胞、NCI-H2347細(xì)胞、TFK1細(xì)胞
H-889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1930細(xì)胞、NS-I/1細(xì)胞、SCL-1細(xì)胞
SNU-1040細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL-2細(xì)胞、MSC細(xì)胞、SW-1353細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁
Evsa-T Cell:人乳腺癌細(xì)胞系
正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項:細(xì)胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細(xì)胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細(xì)胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細(xì)胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細(xì)胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長至70%單層時收獲細(xì)胞,計數(shù)活細(xì)胞數(shù),用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要;其實,細(xì)胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護(hù)目鏡;盡量降低DMSO對細(xì)胞的損傷等等。
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
CA922細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT4細(xì)胞、Mv.1.Lu細(xì)胞、SK-N-SH細(xì)胞
H-929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H/10T1/2 CL8細(xì)胞、ZR751細(xì)胞、NCI-H661細(xì)胞
WEHI 231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tn 5B1-4細(xì)胞、H1793細(xì)胞、H647細(xì)胞
D-324MED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF 539細(xì)胞、A-875細(xì)胞、OE-33細(xì)胞
Tu212細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FOX-NY細(xì)胞、RT4P細(xì)胞、H-1436細(xì)胞
H2591細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep G2-Luc細(xì)胞、SKOV-3細(xì)胞、CEMC7細(xì)胞
SKGT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEND細(xì)胞、HCC15細(xì)胞、CCRF SB細(xì)胞
Evsa-T Cell:人乳腺癌細(xì)胞系
SNU739細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CF-PAC1細(xì)胞、149 PT細(xì)胞、SNU-484細(xì)胞
BXPC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARPE-19細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細(xì)胞、H-7721細(xì)胞
HS-695T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCV29細(xì)胞、SCC 25細(xì)胞、L M (TK-)細(xì)胞
NF639細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN74細(xì)胞、MDAPCa-2b細(xì)胞、SJRH 30細(xì)胞
MM.1S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1419細(xì)胞、C-4I細(xì)胞、F36P細(xì)胞
HEK 293 c18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBEpiC細(xì)胞、OVCAR 420細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細(xì)胞
IPI-2I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-N-RT-BM-1細(xì)胞、Hs870T細(xì)胞、TE-14細(xì)胞
C-33A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH740細(xì)胞、CEM-T4細(xì)胞、PC3M-IE8細(xì)胞
CAL 33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO1-N1細(xì)胞、HOP 92細(xì)胞、KM932細(xì)胞
CAL 33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO1-N1細(xì)胞、HOP 92細(xì)胞、KM932細(xì)胞
TOV21G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細(xì)胞、PANC-1細(xì)胞、SNU398細(xì)胞
T2 (174 x CEM.T2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bowes melanoma cells細(xì)胞、NCIH2347細(xì)胞、GP2d細(xì)胞
RD-ES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BSC1細(xì)胞、H-810細(xì)胞、OCI-AML-4細(xì)胞
NTERA2-cloneD1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GL-261細(xì)胞、MB49細(xì)胞、SUNE 1細(xì)胞
NTERA-2cl.D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHBE細(xì)胞、MDA PCa 2b細(xì)胞、KCL22S細(xì)胞
HuPT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-38細(xì)胞、Loucy細(xì)胞、SJSA1細(xì)胞
CAL-78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1435細(xì)胞、COLO 680N細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細(xì)胞
NPC-TW 01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-OV-3細(xì)胞、V79-4細(xì)胞、BLO11細(xì)胞
L132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 579細(xì)胞、UCLA SO M14細(xì)胞、SK-LMS-1細(xì)胞
RT-BM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL6細(xì)胞、H-740細(xì)胞、OKAC1細(xì)胞
LUDLU1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY3細(xì)胞、CT-26 WT細(xì)胞、K562細(xì)胞
BALL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Wien 133細(xì)胞、HEH2細(xì)胞、UCLA-SO-M21細(xì)胞
MUTZ-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKM1細(xì)胞、HEK293-EBNA細(xì)胞、HIT-T15細(xì)胞
HuNS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HHFK細(xì)胞、MPASMC細(xì)胞、ACHN細(xì)胞
Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UACC 893細(xì)胞、JVM2細(xì)胞、LS-411N細(xì)胞
H1563細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00346細(xì)胞、T98細(xì)胞、MT2細(xì)胞
MiaPaCa-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TW-039細(xì)胞、FET細(xì)胞、Potorous tridactylus Kidney 1細(xì)胞
Karpas299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DAN-G細(xì)胞、PL-11細(xì)胞、MDAPCa2b細(xì)胞
Hep 3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Factor Dependent Continuous-Paterson 1細(xì)胞、SNGM細(xì)胞、HEK 293 c18細(xì)胞
MS751細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:INS1細(xì)胞、EJ 138細(xì)胞、HEK-293 c18細(xì)胞
C-Lu-65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT-167細(xì)胞、AU565細(xì)胞、RH7777細(xì)胞
GA10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-322細(xì)胞、HCT116/L細(xì)胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞
HM06.A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H847細(xì)胞、H2029細(xì)胞、Calf Pulmonary Artery Endothelial細(xì)胞
P3/NS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3LL細(xì)胞、SUM-102PT細(xì)胞、IPLB-Sf21細(xì)胞
Hs695細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB4細(xì)胞、C-33-A細(xì)胞、M109細(xì)胞
KHYG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3細(xì)胞、GM00346細(xì)胞、BALB 3T3 clone A31細(xì)胞
SHI-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T24(ECV304)細(xì)胞、C32r細(xì)胞、A 172細(xì)胞
SUDHL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-10 Attached細(xì)胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細(xì)胞、RGC-5細(xì)胞
SR786細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOR-10細(xì)胞、NCIH1944細(xì)胞、639-V細(xì)胞
LTPA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH244細(xì)胞、HT-55細(xì)胞、NCIH1299細(xì)胞
LTPA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH244細(xì)胞、HT-55細(xì)胞、NCIH1299細(xì)胞
HAC-84細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-3_27細(xì)胞、KNS62細(xì)胞、Hs-729-T細(xì)胞
Hce8693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI-SCC-154細(xì)胞、ME-1 [Human leukemia]細(xì)胞、CMT-167細(xì)胞
Evsa-T Cell:人乳腺癌細(xì)胞系
Hepatoma 22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03190A細(xì)胞、NCI-H1563細(xì)胞、OCILY-19細(xì)胞
L1210細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCA-7細(xì)胞、SVG p12細(xì)胞、TE9細(xì)胞
FRH-0201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP-Clone-FGC細(xì)胞、H-125細(xì)胞、SCLC-21H細(xì)胞
SW 579細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ATN-1細(xì)胞、WM 115細(xì)胞、EPC細(xì)胞
F81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI-SCC-90細(xì)胞、Natural Killer-92細(xì)胞、BHK21細(xì)胞
Panc 05.04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMST6細(xì)胞、CMEC/D3細(xì)胞、NUGC-4細(xì)胞
P30-OHK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA468細(xì)胞、KU812-F細(xì)胞、H441細(xì)胞
GM2131細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT-112細(xì)胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細(xì)胞、PIEC細(xì)胞
H87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP-ATCC細(xì)胞、HEK293F細(xì)胞、RC-2細(xì)胞
NCI747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:N87細(xì)胞、KYSE0520細(xì)胞、NCI-H735細(xì)胞
Sp2/mIL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAPCa2b細(xì)胞、WM239A細(xì)胞、UCLA RO-81-A-1細(xì)胞
AAV293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COS1細(xì)胞、JIMT-1細(xì)胞、PASMCS細(xì)胞
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