"KTA7 Cell:人肺腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞背景資料:肺腺癌
T2(174 x CEM.T2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC.1細(xì)胞、H295R細(xì)胞、CNE2Z細(xì)胞
Medical Research Council cell strain-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SupT1細(xì)胞、G 292 Clone A 141B1細(xì)胞、IR983F細(xì)胞
CSQT-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Blotchy fibroblast-11細(xì)胞、COR-L88細(xì)胞、BT-474細(xì)胞
HCC1428細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-388細(xì)胞、CTLL-2細(xì)胞、NR8383.1細(xì)胞
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
KTA7 Cell:人肺腺癌細(xì)胞系
因為細(xì)胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系,大部分的細(xì)胞都是要成片生長的,尤其是對于貼壁細(xì)胞,單個細(xì)胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細(xì)胞抱團(tuán)的話,傳代后細(xì)胞是不能貼壁的,這樣抱團(tuán)的細(xì)胞就會死亡。所以,消化傳代的時候一定要將細(xì)胞消化成單個單個的獨立狀態(tài),這個啊是非??季磕愕墓Ψ虻?!細(xì)胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個,因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細(xì)胞。所以必須要在細(xì)胞未脫落之前將其吹打開,受力點就是細(xì)胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴(yán)格控制好消化的程度啊,這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來,又不能太過,一吹就整片脫落,要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細(xì)胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細(xì)胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-2細(xì)胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點就是一定不能等到細(xì)胞長滿的時候才去消化傳代。要在細(xì)胞長到70%左右的時候就要傳代了,一旦發(fā)現(xiàn)細(xì)胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進(jìn)行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞,你在洗的時候如果是用無血清1640去洗細(xì)胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣,用1640培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話,可以用PBS來洗,洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的,對于有些細(xì)胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清,防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先,是很關(guān)鍵的一點。先補充這么多,還會后續(xù)更新。再補充一點:傳代時PBS洗是很重要的一步,最近發(fā)現(xiàn),用PBS就可以把細(xì)胞消化開來。加入PBS放置10-15分鐘,有些需要更長的時間,等到細(xì)胞一個個分離開來的時候,就可以直接吹打下來,但是和胰酶消化一樣,要控制好時間,不能時間太過了,要不然損傷細(xì)胞,細(xì)胞不容易成活,狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細(xì)胞是很管用的。有些細(xì)胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候,或者臨時沒有胰酶了,可以選用此方法。不過一定要試試,看是否適合你的細(xì)胞。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細(xì)胞后,應(yīng)該注意什么?客戶收到細(xì)胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,200X各一張),排除細(xì)胞本身污染的情況;收到細(xì)胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細(xì)胞多久能到,是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細(xì)胞前請確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟龋绻麣鉁氐陀冢炊鹊?,則采用郵寄凍存細(xì)胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細(xì)胞大都無法立即適應(yīng),造成細(xì)胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細(xì)胞無法存活。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HCC-1419細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Adeno 293細(xì)胞、MCFs細(xì)胞、INS-1E細(xì)胞
Mia PACA 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U118細(xì)胞、Ramos 1細(xì)胞、GM06141B細(xì)胞
MiaPaca.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGHU1細(xì)胞、L-428細(xì)胞、MDA-MB-330細(xì)胞
Rin-M-5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuP-T3細(xì)胞、HCC-1806細(xì)胞、EOC-20細(xì)胞
CPA47細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H10T1/2細(xì)胞、U251-MG細(xì)胞、AR4IP細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁
KTA7 Cell:人肺腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問題分析:總結(jié)1:復(fù)蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當(dāng)然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細(xì)胞沒問題??偨Y(jié)2:首先應(yīng)該懷疑凍存,實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細(xì)胞復(fù)蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復(fù)蘇的時候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細(xì)胞污染,你是否能很快看到,我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細(xì)胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細(xì)胞都污染一個細(xì)菌的話,這個細(xì)菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細(xì)菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當(dāng)會事。
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
TSUpr1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU761細(xì)胞、UCLA NPA871細(xì)胞、KG1細(xì)胞
HIT.T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M3 Clone M-3細(xì)胞、H7721細(xì)胞、Capan 1細(xì)胞
PBL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H35細(xì)胞、RAW 264.7細(xì)胞、MA-782細(xì)胞
JOSK-M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNO-1細(xì)胞、Colo699細(xì)胞、HcaF細(xì)胞
NCI-H1882細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOPC細(xì)胞、SEM細(xì)胞、SKCO-1細(xì)胞
F9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 8402細(xì)胞、NCI-H2052細(xì)胞、A-1847細(xì)胞
ROS-17/2.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA2B細(xì)胞、COLO 824細(xì)胞、GM03570E細(xì)胞
KTA7 Cell:人肺腺癌細(xì)胞系
Human ErythroLeukemia細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBC-1細(xì)胞、LAN6細(xì)胞、GM3570細(xì)胞
Institute for Medical Research-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CACO2細(xì)胞、NCIH2009細(xì)胞、NCI-H322T細(xì)胞
Clone 929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mv1Lu細(xì)胞、HET1A細(xì)胞、N1E-115細(xì)胞
HA1800細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUSMC細(xì)胞、SUDHL-10細(xì)胞、K7M2-WT細(xì)胞
LS 123細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS1034細(xì)胞、GRSL細(xì)胞、YTMLC-90細(xì)胞
SN12-PM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc08.13細(xì)胞、CNE-1細(xì)胞、108CC15細(xì)胞
LTEP-a2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:S37細(xì)胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細(xì)胞、WRL68細(xì)胞
OCI AML4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF細(xì)胞、H-1770細(xì)胞、T-HEECs細(xì)胞
HCMEC(BL12-H)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR10細(xì)胞、NCI-H1404細(xì)胞、AMO-1細(xì)胞
L-WRN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-1細(xì)胞、NCIH1836細(xì)胞、CW-2細(xì)胞
Rat Skin 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA SO M21細(xì)胞、B16BL-6細(xì)胞、CAL39細(xì)胞
H-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV522細(xì)胞、EOC20細(xì)胞、RBL 1細(xì)胞
EVSA/T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML-5細(xì)胞、NCI-H196細(xì)胞、A9細(xì)胞
L5178-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Karpas-299細(xì)胞、GM3190細(xì)胞、P3X63-Ag8.653細(xì)胞
HFE-145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VSMC細(xì)胞、H1876細(xì)胞、T 84細(xì)胞
MMQ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Potorous tridactylus Kidney 2細(xì)胞、PANC0504細(xì)胞、EBTr (NBL-4)細(xì)胞
MC3T3E1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc10.05細(xì)胞、RH7777細(xì)胞、UT7細(xì)胞
H2066細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H889細(xì)胞、T-84細(xì)胞、PLA802細(xì)胞
SF-539細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCCVII細(xì)胞、HCC4006細(xì)胞、UMR 106細(xì)胞
HCT 116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1694細(xì)胞、MOLT-16細(xì)胞、Metastatic Variant-522細(xì)胞
JROECL19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC1/Sq細(xì)胞、U118細(xì)胞、BT483細(xì)胞
COLO 680N細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVG(P12)細(xì)胞、J45.01細(xì)胞、5637細(xì)胞
GCT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BRL-3A細(xì)胞、M1細(xì)胞、EFM-192B細(xì)胞
KE-37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KE39細(xì)胞、6-T CEM細(xì)胞、HM1900細(xì)胞
SKNAS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNK-6細(xì)胞、Super Tube細(xì)胞、NIH:OVCAR4細(xì)胞
HCT116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat podocyte細(xì)胞、MKN 45細(xì)胞、SK-N-BE(2)C細(xì)胞
Kit 225細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCC-IT細(xì)胞、MC3T3-L1細(xì)胞、NFHIOSE-29細(xì)胞
SNU-638細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hu-P-T4細(xì)胞、VeroC1008細(xì)胞、Anip[973]細(xì)胞
WiDr/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERI-Rb1細(xì)胞、MDCK (NBL-2)細(xì)胞、Hs-343-T細(xì)胞
Tokyo Medical and Dental university 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEK細(xì)胞、HB 611細(xì)胞、FLC-7細(xì)胞
COLO206F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TC7細(xì)胞、INS1細(xì)胞、MonoMac6細(xì)胞
KOPN8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC 94細(xì)胞、OE-19細(xì)胞、BS-C-1細(xì)胞
MA-104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rin-M-5F細(xì)胞、RT4-D6P2T細(xì)胞、UMR106細(xì)胞
MRC 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE2-C細(xì)胞、PE CA PJ34細(xì)胞、RC-4B細(xì)胞
OV1/P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CA46細(xì)胞、MDAMB435細(xì)胞、CCD18細(xì)胞
PANC-03-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT-HME-1細(xì)胞、G 401細(xì)胞、HEK.EBNA細(xì)胞
Tregs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Epstein-Barr-3細(xì)胞、SCC9細(xì)胞、SKNBE2細(xì)胞
LU451細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J82 COT細(xì)胞、NCI-H1238細(xì)胞、MRC 5細(xì)胞
CCD19-Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCD-MLA-144細(xì)胞、NG 108-15細(xì)胞、AAV-293細(xì)胞
NTERA-2 clone D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H226細(xì)胞、H-226細(xì)胞、C81-61細(xì)胞
GM03571細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fetal Rhesus Kidney-4細(xì)胞、HCC-1395細(xì)胞、SU86.86細(xì)胞
Panc 3.27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774細(xì)胞、P3JHR-1細(xì)胞、HS852.T細(xì)胞
ESC-410細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS-143B細(xì)胞、FOXNY細(xì)胞、HANK-1細(xì)胞
KTA7 Cell:人肺腺癌細(xì)胞系
U-251MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1116細(xì)胞、EC-GI-10細(xì)胞、P 3 HR 1細(xì)胞
HEC-251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM17346細(xì)胞、SV40-MES13細(xì)胞、MDA-MB361細(xì)胞
L-M[TK-]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRTL 5細(xì)胞、H2286細(xì)胞、C57 Mouse Tumor 93細(xì)胞
NCI-H69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H735細(xì)胞、PL 45細(xì)胞、MHCC 97-H細(xì)胞
PK136細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NFS60細(xì)胞、Vero-76細(xì)胞、Institute for Medical Research-90細(xì)胞
Hopkins-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKBr3細(xì)胞、H1650細(xì)胞、Panc 4.03細(xì)胞
TJ905細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HEL-1細(xì)胞、SNU-407細(xì)胞、Pa017C細(xì)胞
ZR75-30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1522細(xì)胞、SCC VII細(xì)胞、HEC1-B細(xì)胞
Caki-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-Mel 1細(xì)胞、B16-F10-BL6細(xì)胞、MPVECs細(xì)胞
CL 1-0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFT-8810細(xì)胞、U373-MG細(xì)胞、NCI-H292細(xì)胞
Karpas299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DAN-G細(xì)胞、PL-11細(xì)胞、MDAPCa2b細(xì)胞
EAHY-926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCCPAN2細(xì)胞、WM-239細(xì)胞、SUM-190細(xì)胞
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