"LLC-WRC 256 Cell:Walker氏癌肉瘤256瘤細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：乳腺癌；雌性
HUVEC細胞系相關產(chǎn)品：QG-56細胞、HCC0078細胞、CL1-5細胞
CTLA4Ig-24細胞系相關產(chǎn)品：HEK293-H細胞、NCTC-929細胞、A2008細胞
RS4;11細胞系相關產(chǎn)品：KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細胞、Colo741細胞、D10G41細胞
RT-4細胞系相關產(chǎn)品：CCRFCEM細胞、HPDE6c7細胞、ASH-3細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
LLC-WRC 256 Cell:Walker氏癌肉瘤256瘤細胞系
細胞消化過程總結(jié)：其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞（絕大部分１min不到）。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了（雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個時候應該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液（不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開）。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的（比如Calu-３細胞），吹打不超過２０次后（一般１０次即可），成小規(guī)模聚集（１０個細胞左右），是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞（潤洗方法５min還不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞接收后的操作流程與注意事項：１)如果細胞為貼壁細胞，而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請將懸浮的細胞即時離心，加１５%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)３天；同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為１５%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)３天。３天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡，請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決；２)貼壁細胞生長緩慢；適當提高血清濃度(最高不能超過２０%)，或可根據(jù)該細胞生長密度，考慮胰酶消化后，轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)；３)生長不均：貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長，可將細胞進行消化，重懸打散細胞，加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
Co320細胞系相關產(chǎn)品：HOMEC細胞、H-508細胞、SU-DHL1細胞
PBL細胞系相關產(chǎn)品：H35細胞、RAW 264.7細胞、MA-782細胞
IBMF-7細胞系相關產(chǎn)品：HSC/mHSC細胞、SW954細胞、L5178-R細胞
SK-MEL-2細胞系相關產(chǎn)品：SNU638細胞、Mouse Bladder Tumor line-2細胞、CCD 841 CoN細胞
HCC941122細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1963細胞、Blotchy fibroblast-11細胞、H-1793細胞
細胞生長特性：貼壁
LLC-WRC 256 Cell:Walker氏癌肉瘤256瘤細胞系
貼壁消化難題：１，先用PBS 把細胞洗兩遍，使瓶內(nèi)沒有血清了，減少對胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在細胞有些消化下來時，拿著瓶口，運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體，這樣細胞很快就下來了，還不需要吹打，分散也均勻；２，成團、絮狀：消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象，血清可以終止胰酶的作用，如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清終止，如果消化液中加入了edta的話，就要將消化液倒干凈，如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話，一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基，加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢)，隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗，則不能棄去胰酶)，加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代，否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片)；消化過度：馬上用培養(yǎng)基中和，用吸管吹打細胞，收集全部的細胞到以無菌的離心管中８００RPM ３分鐘。棄上清，用全培重懸，換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)，狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落，在換液的時候可以清除掉！
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
LNCaP.FGC細胞系相關產(chǎn)品：NB-19細胞、B10BR細胞、SW-1417細胞
PANC 327細胞系相關產(chǎn)品：HepG2/C3A細胞、PC-3M IE8細胞、2E8細胞
JM-Jurkat細胞系相關產(chǎn)品：PFSK-1細胞、TE85細胞、Hs274T細胞
MCA 205細胞系相關產(chǎn)品：SW 1417細胞、Vero-E6細胞、SCL1細胞
Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞系相關產(chǎn)品：T-84細胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞、PA I細胞
SW 839細胞系相關產(chǎn)品：EL 4細胞、TT細胞、FU-97細胞
WiDr/S細胞系相關產(chǎn)品：WERI-Rb1細胞、MDCK (NBL-2)細胞、Hs-343-T細胞
LLC-WRC 256 Cell:Walker氏癌肉瘤256瘤細胞系
WSU-DLCL2細胞系相關產(chǎn)品：RL-95-2細胞、MIO-M1細胞、CEM/C1細胞
ELD-1細胞系相關產(chǎn)品：SKNEP-1細胞、22Rv-1細胞、BT-483細胞
Buffalo Rat Liver-3A細胞系相關產(chǎn)品：VMRCLCD細胞、Hs940.T細胞、Verda reno細胞
OVCA 432細胞系相關產(chǎn)品：YES2細胞、NT-2細胞、HOC細胞
Fetal Bovine Heart Endothelial細胞系相關產(chǎn)品：HT22細胞、U 266細胞、PLCPRF5細胞
UMR106細胞系相關產(chǎn)品：TGW-nu細胞、Panc203細胞、Mouse INsulinoma 6細胞
L-1210細胞系相關產(chǎn)品：Cattle chondrocytes細胞、3T3J2細胞、MJ細胞
HOS (TE85)細胞系相關產(chǎn)品：H4-IIE-C3細胞、HT-1080細胞、PANC-08-13細胞
IEC6細胞系相關產(chǎn)品：HEK 293-EBNA細胞、COR-L23細胞、ME-180細胞
IEC6細胞系相關產(chǎn)品：HEK 293-EBNA細胞、COR-L23細胞、ME-180細胞
HO-8910細胞系相關產(chǎn)品：H2081細胞、LA-795細胞、SUM159PT細胞
Kit-225-K6細胞系相關產(chǎn)品：OVCA-420細胞、H4IIEC3細胞、ABE8.1/2細胞
WEHI3B細胞系相關產(chǎn)品：OS-732細胞、HepG2/C3A細胞、Madison細胞
SKRC20細胞系相關產(chǎn)品：C32 mel細胞、SV40-HCEC細胞、CCD-112CoN細胞
GLAG-66細胞系相關產(chǎn)品：Molm 13細胞、RPMI7666細胞、SV-HUC-1細胞
H378細胞系相關產(chǎn)品：McA-RH 8994細胞、H-929細胞、293H細胞
10RGB細胞系相關產(chǎn)品：OCM1A細胞、TKB-1細胞、CEM-T4細胞
RA-FLSs細胞系相關產(chǎn)品：HCC0044細胞、ZR75-30細胞、L6細胞
Vero from pool #76細胞系相關產(chǎn)品：TM-3細胞、DoTc2 4510細胞、HCE-2 [50.B1]細胞
Sci-1細胞系相關產(chǎn)品：Anip-973細胞、EC-9706細胞、ECC 10細胞
BEND細胞系相關產(chǎn)品：SJ-Rh 30細胞、HBMEC細胞、MOLP-2細胞
H-1568細胞系相關產(chǎn)品：HKC細胞、Me Wo細胞、NP69SV40T細胞
IGROV 1細胞系相關產(chǎn)品：HDF-a細胞、NCI-Hut 125細胞、OLN-93細胞
P3X63 AG8-653細胞系相關產(chǎn)品：T-CAM2細胞、HMEC細胞、HELF細胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞系相關產(chǎn)品：A 375細胞、RLE-6TN細胞、NCM-460細胞
T173細胞系相關產(chǎn)品：Hep-G2/C3A細胞、GOS3細胞、SUNE-1細胞
ROS17/28細胞系相關產(chǎn)品：Immortalized Human Hepatocytes細胞、MC57G細胞、IGROV-1細胞
MPC11細胞系相關產(chǎn)品：GalK 1細胞、H1238細胞、CF-PAC1細胞
Mel526細胞系相關產(chǎn)品：LC-MS細胞、KCL-22細胞、KRC/Y細胞
EST50細胞系相關產(chǎn)品：CCD-1095Sk細胞、GLRK 13細胞、SKES1細胞
Z310細胞系相關產(chǎn)品：NCI660細胞、NCI-H2122細胞、TE354.T細胞
Ramos G6.C10細胞系相關產(chǎn)品：SW-579細胞、T-ALL-1細胞、MDA-MB-175VII細胞
Human ErythroLeukemia細胞系相關產(chǎn)品：EBC-1細胞、LAN6細胞、GM3570細胞
HCC78細胞系相關產(chǎn)品：SK-N-SH細胞、SK-MEL2細胞、SW-837細胞
HCC827細胞系相關產(chǎn)品：CAL 148細胞、CHO-S細胞、NTERA-2/D1細胞
CAKI.1細胞系相關產(chǎn)品：SK-ChA1細胞、NKM1細胞、HGMC細胞
Hep 3B2_1-7細胞系相關產(chǎn)品：SMMC 7721細胞、QGP 1細胞、HEH2細胞
NS-20Y細胞系相關產(chǎn)品：CCRF CEM細胞、VK2細胞、U2932細胞
H-520細胞系相關產(chǎn)品：QGP-1細胞、UPCI-SCC090細胞、CPAE細胞
MAVER-1細胞系相關產(chǎn)品：AML-193細胞、NCI-H2170細胞、SNU-520細胞
U2-OS細胞系相關產(chǎn)品：bEnd3細胞、SK-RC-52細胞、OAW-42細胞
Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞系相關產(chǎn)品：SW-1088細胞、NK92-MI細胞、HAEC細胞
NCIH1693細胞系相關產(chǎn)品：C4-2 B細胞、Metastatic Variant-522細胞、COLO-320DM細胞
LLC-WRC 256 Cell:Walker氏癌肉瘤256瘤細胞系
HT-115細胞系相關產(chǎn)品：32D.3細胞、HSMC細胞、A-172 MG細胞
U138細胞系相關產(chǎn)品：EJ-1細胞、SW-1353細胞、EC-9706細胞
LAN6細胞系相關產(chǎn)品：TE-8細胞、AD-293細胞、U373細胞
HPAF-I細胞系相關產(chǎn)品：KM.12細胞、HC11 Mammary Epithelium細胞、Hs 832(C).T細胞
SU-DHL-8細胞系相關產(chǎn)品：CII細胞、HMrSV5細胞、MCA38細胞
RL95細胞系相關產(chǎn)品：MMVECs細胞、P30/0HK細胞、OCI/AML-2細胞
WSU-DLCL(2)細胞系相關產(chǎn)品：MDCK細胞、V 79-4細胞、HCV 29細胞
MRC-9細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1155細胞、Hep-3B細胞、SNU-C2A細胞
MC-3T3-E1細胞系相關產(chǎn)品：NUGC-4細胞、Mo 59J細胞、NCI-SNU-182細胞
ROS-17/2.8細胞系相關產(chǎn)品：MDA2B細胞、COLO 824細胞、GM03570E細胞
293E細胞系相關產(chǎn)品：INS-1E細胞、LS 174 T細胞、SHP77細胞
CCD841CoN細胞系相關產(chǎn)品：Molm 14細胞、GM03570細胞、NCIH208細胞
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關鍵字： LLC-WRC 256 Cell:Walker氏癌肉瘤256瘤細胞系
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