"MCF-10A Cell:人正常乳腺上皮細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:乳腺;上皮細胞;自發(fā)永生;女性
MDAMB134細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT.T15細胞、Panc-10.05細胞、Nittby-Salford 1細胞
FHCRC-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Metastatic Variant-522細胞、SupT1細胞、NCI-H2227細胞
rUCMSCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK.EBNA細胞、SB細胞、ME16C細胞
H1341細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T47D:A細胞、TE354.T細胞、H-1666細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
MCF-10A Cell:人正常乳腺上皮細胞系
如何把細胞養(yǎng)的形態(tài)更好更漂亮。1.不同的細胞,喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個不僅僅是說培養(yǎng)基的不同,還有就是細胞生長的空間密度問題。有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應(yīng)該留很少量的細胞,這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應(yīng)該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。2.對于有些人總是會遇到養(yǎng)的細胞形態(tài)怎么都不好的問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞,如果細胞形態(tài)不好,(或者細胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進行預(yù)吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細胞我們只吹打,不消化的);其次,把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。我稱之為“二傳”。呵呵。如果一次效果還不理想,可重復(fù)多次。直到找到細胞完美形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。3.關(guān)于培養(yǎng)瓶內(nèi)加入培養(yǎng)基的量的問題。這個是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些細胞反而是培養(yǎng)基少一點相反細胞形態(tài)會長得比較好。(可能也是競爭很大,有優(yōu)勝劣汰吧。呵呵。)對于生長速度快的細胞,易生長的細胞加少一點培養(yǎng)基細胞形態(tài)會更好。但是要注意換液掌握。4.關(guān)于選擇培養(yǎng)瓶的問題。個人發(fā)現(xiàn)生長速度快的細胞在玻璃瓶內(nèi)生長的狀態(tài)會比一次性相對好一些。而對于同一種細胞,在其生長旺盛快速的時期在玻璃瓶內(nèi)的生長狀態(tài)也比內(nèi)好。這可能是因為比玻璃瓶更容易貼壁。生長速度快的細胞在這種相對“更安逸”的環(huán)境里反而長得狀態(tài)不如玻璃瓶好。所以對于生長速度慢的細胞如果想要更漂亮的細胞狀態(tài),比玻璃瓶會好,對于生長速度慢的細胞,玻璃瓶則會更好。同樣,對于同一種細胞,在其生長速度慢的時候,會好一點,比如剛剛復(fù)蘇的時候,或者原代培養(yǎng)的時候。而在其生長旺盛的時候,玻璃瓶則相對會好一點。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
JTC-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G 292 Clone A 141B1細胞、HSC2細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞
Clone 929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mv1Lu細胞、HET1A細胞、N1E-115細胞
H-526細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMEC-1細胞、GM05384細胞、Mono-Mac-1細胞
Hs695T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Basophilic Leukemia-1細胞、COLO320/DM細胞、SUPM2細胞
Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 540細胞、RMC細胞、P3-X63-Ag8-653細胞
細胞生長特性:貼壁
MCF-10A Cell:人正常乳腺上皮細胞系
細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進行傳代。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
NCI-HUT-596細胞系相關(guān)產(chǎn)品:675T細胞、A 253細胞、CWR22Rv1細胞
BLO-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-Swiss細胞、MCF 7B細胞、16HBE細胞
SK-N-FI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tb 1 Lu細胞、P3/X63/Ag8細胞、MCF 10A細胞
A 2058細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE2C細胞、G-292, clone A141B1細胞、LS 174 T細胞
AU-Mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKO-AS45-1細胞、B 95-8細胞、NCI-157細胞
THLE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞、EBC-1細胞、NPC-TW039細胞
Dysplastic Oral Keratinocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACC2細胞、SK-RC-42細胞、SKMEL1細胞
MCF-10A Cell:人正常乳腺上皮細胞系
BC-020細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-8161細胞、Vero E6細胞、B-16細胞
Simpson細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RERFLCMS細胞、TE-9細胞、UMRC-2細胞
NCI H2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-SF-21細胞、Human podocyte細胞、TE671/RD細胞
Mel526細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-MS細胞、KCL-22細胞、KRC/Y細胞
MAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH820細胞、TF1細胞、RBL細胞
Hs 940.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CoC1細胞、TE10細胞、MEF (CF-1)細胞
F36P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MiaPaCa-2細胞、WM-266-4細胞、373MG細胞
COLO 738細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T 98 G細胞、Hs 688(A).T細胞、P560細胞
NCIH1395細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C2-C12細胞、MH-S細胞、BJAB-1細胞
NCIH1395細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C2-C12細胞、MH-S細胞、BJAB-1細胞
H-2171細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2030細胞、MO59J細胞、HIT T-15細胞
GCT0404細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS766T細胞、Roswell Park Memorial Institute 1788細胞、SL1細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCKII細胞、NCI-HUT-596細胞、SK-ES細胞
C-643細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AD293細胞、RA.1細胞、Granta519細胞
H1048細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGROV1細胞、HT55細胞、NL20細胞
OCI/AML3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hRMECs細胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細胞、PC.3細胞
NCI-H322T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rh30細胞、H-660細胞、BC-PAP細胞
10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BGC-823細胞、MT2細胞、NTERA2細胞
H-510細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-2 ad細胞、FHL124細胞、SK-BR3細胞
SK-Mel 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GMK,BSC-1細胞、YAC細胞、Tb 1 Lu細胞
SK HEP 01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HcaF細胞、Wien-133細胞、CAMA-1細胞
H-2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK;293細胞、KM932細胞、HS578細胞
Madin Darby Canine Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M20 [Human melanoma]細胞、SK-MEL5細胞、TM-4細胞
KYSE-50細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs604T細胞、Calu 3細胞、SW 620細胞
S16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MS751細胞、Hep 3B2細胞、BEL-7404細胞
ZYM-DIEC02細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPaSteC(HPSC)細胞、RPPVEC細胞、NL20SV細胞
MCF-7ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker-Ca.256細胞、KASUMI1細胞、EJ 138細胞
3T6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L cells細胞、alpha TC1-6細胞、OV 1063細胞
HS-683細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTori3細胞、OK-WT細胞、HCC 38細胞
B/C3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1672細胞、HMC細胞、HNE3細胞
TK.10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa/DDP細胞、ECV-304細胞、TOV112細胞
DSL6A/C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-4細胞、SW 900細胞、LK-2細胞
H2073細胞系相關(guān)產(chǎn)品:253J B-V細胞、CSQT-2細胞、McA-RH8994細胞
Balb/3T3-4-Cl31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL-5細胞、Tb1.Lu細胞、CHG5細胞
H250細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VM-CUB1細胞、RERF-LC-MS細胞、NU-GC-2細胞
RLE-6TN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H10T1/2CL8細胞、U-251MG細胞、RWPE-1細胞
KOPN8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC 94細胞、OE-19細胞、BS-C-1細胞
Homo sapiens No. 578, breast cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TMK-1細胞、Ramos.2G6.4C10細胞、COLO 206F細胞
HuT102細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA-801D細胞、RPMI-8226細胞、NCl-H157細胞
RAMOS2G64C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:McCoy細胞、MADB106細胞、U-87MG細胞
RAMOS2G64C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:McCoy細胞、MADB106細胞、U-87MG細胞
McG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3.AG.1.2.3細胞、HPDEC細胞、ECV-304細胞
WSU-DLCL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UWB1.289+BRCA1細胞、MuM-2C細胞、H.Ep.-2細胞
MCF-10A Cell:人正常乳腺上皮細胞系
J 774A.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc4.03細胞、SKCol1細胞、KBM-5細胞
NCIH548細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 679細胞、HGC27細胞、NCI-H838細胞
CT 26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI/ADR-RES細胞、CMT 64細胞、GM-346細胞
Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs600T細胞、NCI-SNU-182細胞、NRK clone 52E細胞
SKMES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:THLE2細胞、HcerEpic細胞、hFOB1.19細胞
MUTZ1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63Ag8細胞、Human Epithelioma-2細胞、HITT15細胞
PC.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-NM-C細胞、AZ 521細胞、SK-NM-C細胞
SKMEL28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 05.04細胞、Pt K1細胞、PC3M-1E8細胞
H-1105細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UWB1289細胞、Pt K2 (NBL-5)細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞
NIH3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGH-U1細胞、266 Bl細胞、TE-4細胞
H1437細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C918細胞、THP1細胞、HGC27細胞
HCC-1569細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WSUDLCL2細胞、KYSE 410細胞、Hs683細胞
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