"A7r5 Cell:大鼠主動脈平滑肌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞背景資料：培養(yǎng)到穩(wěn)定期后細(xì)胞表現(xiàn)出長高的肌激酶和肌酸激酶活性(CPK)。 細(xì)胞分裂終止后合成骨肉型CPK。
NCI-H1563細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO-8910PM細(xì)胞、U87MG細(xì)胞、FHCRC-11細(xì)胞
NCIH460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc02-H0細(xì)胞、COLO-357細(xì)胞、NCIH292細(xì)胞
3D4/21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D CL3細(xì)胞、MNNG/HOS Cl #5細(xì)胞、TFH細(xì)胞
HCC-1438細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN229細(xì)胞、PA I細(xì)胞、BpRcl細(xì)胞
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
A7r5 Cell:大鼠主動脈平滑肌細(xì)胞系
細(xì)胞傳代時消化的問題：可以這樣說，對于需要消化傳代的細(xì)胞，每一次的消化都是對這個細(xì)胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細(xì)胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細(xì)胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細(xì)胞消化同樣的時間對細(xì)胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進(jìn)行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細(xì)胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對比觀察看誰長的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細(xì)胞間隙明顯，細(xì)胞獨(dú)立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實(shí)際情況你自己把握）。這是第四步。其實(shí)還可以有第五步，對于特別難消化的細(xì)胞和對胰酶特別敏感的細(xì)胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對細(xì)胞的損傷降到最低，保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了，如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實(shí)驗(yàn)中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細(xì)胞時把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細(xì)胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實(shí)驗(yàn)的開展。將細(xì)胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對細(xì)胞的損傷之外，還有一個更重要的作用就是，可以程度地把細(xì)胞吹打成單個單個的狀態(tài)，不成片不連體。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開的時候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
U343細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK AD293細(xì)胞、FO [Mouse myeloma]細(xì)胞、SKNBE(2)細(xì)胞
N-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK15細(xì)胞、MSF細(xì)胞、CG4細(xì)胞
U-2932細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 839.T細(xì)胞、P3HR1細(xì)胞、NRK52E細(xì)胞
HCM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-AD293細(xì)胞、AG 9細(xì)胞、WIL2-S細(xì)胞
C2A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HaCaT細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-435細(xì)胞、Hs445細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
A7r5 Cell:大鼠主動脈平滑肌細(xì)胞系
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細(xì)胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細(xì)胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細(xì)胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細(xì)胞濃度過低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細(xì)胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細(xì)胞形態(tài)特性：成纖維細(xì)胞
ACCM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Skin 1細(xì)胞、143B細(xì)胞、SW626細(xì)胞
NCIH1435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHG-5細(xì)胞、293-GP細(xì)胞、JIII細(xì)胞
H69C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H522細(xì)胞、MEF (CF-1)細(xì)胞、Jurkat E6-1細(xì)胞
UCLA NPA-87-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-16細(xì)胞、MHCC97-L細(xì)胞、HCC78細(xì)胞
H-920細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JVM3細(xì)胞、SNU475細(xì)胞、NCIH2052細(xì)胞
NCI-H920細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLEC-B3細(xì)胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis細(xì)胞、CORL279細(xì)胞
OCI/AML-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EC-GI-10細(xì)胞、253J-Bladder-V細(xì)胞、MHCC97-H細(xì)胞
A7r5 Cell:大鼠主動脈平滑肌細(xì)胞系
MESSA Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PASMCS細(xì)胞、CCD19-Lu細(xì)胞、U251細(xì)胞
PAI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCISCC090細(xì)胞、MS751細(xì)胞、H1404細(xì)胞
NCI-H23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-92細(xì)胞、H676細(xì)胞、VSMC細(xì)胞
Case 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2106細(xì)胞、BGC823細(xì)胞、H1666細(xì)胞
EBNA-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE(1)細(xì)胞、QBC(939)細(xì)胞、GP5d細(xì)胞
CMT.64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv.1.Lu細(xì)胞、NCI-H2135細(xì)胞、Mel-RM細(xì)胞
SGC 7901細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-2932細(xì)胞、UK Pan-1細(xì)胞、P30/0HK細(xì)胞
SNU-878細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HR8348細(xì)胞、OCI-Ly 1細(xì)胞、NCI-SNU-878細(xì)胞
LAN5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1463細(xì)胞、293GP細(xì)胞、H295細(xì)胞
LAN5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1463細(xì)胞、293GP細(xì)胞、H295細(xì)胞
MCF-7B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat E6.1細(xì)胞、TFK-1細(xì)胞、NCIH1703細(xì)胞
BALL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wien 133細(xì)胞、HEH2細(xì)胞、UCLA-SO-M21細(xì)胞
MC-26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1428細(xì)胞、C3A細(xì)胞、Hs 683細(xì)胞
MESSA Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PASMCS細(xì)胞、CCD19-Lu細(xì)胞、U251細(xì)胞
LLC-PK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KHYG細(xì)胞、INS-1細(xì)胞、HEK293EBNA細(xì)胞
MDA-MB435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHK-21細(xì)胞、Me-Wo細(xì)胞、NCI-H1238細(xì)胞
SW-837細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3HR-1細(xì)胞、WM451Lu細(xì)胞、TCam-2細(xì)胞
ROS1728細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T_T_細(xì)胞、SW962細(xì)胞、SW 954細(xì)胞
RPMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RA-FLSs細(xì)胞、NeHepLxHT細(xì)胞、H2286細(xì)胞
WM451Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS 1.Tes細(xì)胞、U-138 MG細(xì)胞、NK10a細(xì)胞
SK-OV-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-239-A細(xì)胞、TCMK1細(xì)胞、NCIH2405細(xì)胞
EAhy 926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU86_86細(xì)胞、SK-MES-1細(xì)胞、huH 1細(xì)胞
MFM-223細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKLU-1細(xì)胞、KM12-SM細(xì)胞、P3X63Ag8-6-5-3細(xì)胞
KP-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ES-2細(xì)胞、IR983F細(xì)胞、P-19細(xì)胞
RKO_AS45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCL-H548細(xì)胞、X63-Ag8.653細(xì)胞、Saos2細(xì)胞
P3-NS1/1-Ag4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHLF細(xì)胞、NCI-H524細(xì)胞、Caco 2細(xì)胞
HSC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMC細(xì)胞、COLO 679細(xì)胞、SK-N-BE細(xì)胞
SUDHL-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCC-MSB-1細(xì)胞、HPAC細(xì)胞、MDA-MB415細(xì)胞
SNU449細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL 1MEA.7R.1細(xì)胞、NCI-H1975細(xì)胞、HUC-1細(xì)胞
TOV21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1563細(xì)胞、MDA-231細(xì)胞、OCI-Ly18細(xì)胞
MESSA Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PASMCS細(xì)胞、CCD19-Lu細(xì)胞、U251細(xì)胞
NCI.H226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC1-B細(xì)胞、5-8F細(xì)胞、NCI H508細(xì)胞
OVCAR432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LU-65M細(xì)胞、Malme-3M細(xì)胞、H-2030細(xì)胞
LM TK negative細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1088細(xì)胞、P3J細(xì)胞、HR1K細(xì)胞
HCT-GEO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF 126細(xì)胞、H460細(xì)胞、NALM6細(xì)胞
TNC-1B12B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pa18C細(xì)胞、G-402細(xì)胞、U373MG細(xì)胞
639-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA-TU-8988S細(xì)胞、CAL27細(xì)胞、NCI-H1435細(xì)胞
H-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV522細(xì)胞、EOC20細(xì)胞、RBL 1細(xì)胞
IR983F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK-92細(xì)胞、32D clone 3細(xì)胞、EL-4細(xì)胞
HEK-293H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC7901/DDP細(xì)胞、H1650_CO細(xì)胞、10T1/2細(xì)胞
D324 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFL細(xì)胞、FHCRC-11細(xì)胞、PANC0504細(xì)胞
UCH-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC10RGB細(xì)胞、LA-N-5細(xì)胞、H1944細(xì)胞
KE39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFT8810細(xì)胞、ChaGo K-1細(xì)胞、HBE 135-E6/E7細(xì)胞
A7r5 Cell:大鼠主動脈平滑肌細(xì)胞系
SUD-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHOK1細(xì)胞、H4-II-E-C3細(xì)胞、CHL-IU細(xì)胞
LTEP-a2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：S37細(xì)胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細(xì)胞、WRL68細(xì)胞
KYSE70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TF-1細(xì)胞、H-1838細(xì)胞、52PE細(xì)胞
CV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVISE細(xì)胞、HSC細(xì)胞、H-2110細(xì)胞
GCT0404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS766T細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 1788細(xì)胞、SL1細(xì)胞
Ly18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH28細(xì)胞、TC-1 [Mouse lung]細(xì)胞、P3.times.63 Ag8.653細(xì)胞
HCASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NR-8383細(xì)胞、J-774細(xì)胞、MA-104細(xì)胞
UPCI-SCC-090細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U20-S細(xì)胞、R3/1細(xì)胞、OVMANA細(xì)胞
Panc-03.27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320F細(xì)胞、NKT細(xì)胞、B16-BL6細(xì)胞
U118-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV-HUC細(xì)胞、brain-derived Endothelial cells.3細(xì)胞、GH 3細(xì)胞
NCI-H1703細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC1sq細(xì)胞、NH-6細(xì)胞、OVCAR3細(xì)胞
B16BL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MMQ細(xì)胞、RN細(xì)胞、SVEC4-10細(xì)胞
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關(guān)鍵字： A7r5 Cell:大鼠主動脈平滑肌細(xì)胞系
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