"3T3-L1 Cell:小鼠前脂肪胚胎成纖維細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞背景資料：３T３-L１是從３T３細(xì)胞（Swissalbino）中經(jīng)克隆分離得到的連續(xù)傳代的亞系。該細(xì)胞從快速分裂到匯合和接觸性抑制狀態(tài)經(jīng)歷了前脂肪細(xì)胞到脂肪樣細(xì)胞的轉(zhuǎn)變。該細(xì)胞鼠痘病毒陰性；可產(chǎn)生甘油三酯，高濃度血清可增強(qiáng)細(xì)胞內(nèi)脂肪堆積。
HCC1500細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OEC33細(xì)胞、HTR-8/SV neo細(xì)胞、H1417細(xì)胞
CCD 19Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 671細(xì)胞、HCC1569細(xì)胞、H2198細(xì)胞
BNL-CL.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NW-MEL-38細(xì)胞、HSF細(xì)胞、P31-FUJ細(xì)胞
H-735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30/Ohkubo細(xì)胞、LS 1034細(xì)胞、IPAM-WT細(xì)胞
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
3T3-L1 Cell:小鼠前脂肪胚胎成纖維細(xì)胞系
細(xì)胞消化過程總結(jié)：其實(shí)絕大部分細(xì)胞消化的時(shí)候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細(xì)胞（絕大部分１min不到）。對于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞，連續(xù)這樣傳代，對細(xì)胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實(shí)已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了（雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個(gè)時(shí)候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細(xì)胞就是完全成單個(gè)細(xì)胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個(gè)是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，尤其是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)特性，無論死活的細(xì)胞都是如此，你可以嘗試，準(zhǔn)備１００%的單個(gè)細(xì)胞懸液，貼壁后觀察細(xì)胞，仍然是幾個(gè)幾個(gè)細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個(gè)小時(shí)就拿出來吹打成單細(xì)胞懸液（不要笑，這個(gè)是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯(cuò)誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個(gè)一個(gè)分開）。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個(gè)時(shí)候即使是成片的（比如Calu-３細(xì)胞），吹打不超過２０次后（一般１０次即可），成小規(guī)模聚集（１０個(gè)細(xì)胞左右），是正常的，不要試圖再去延長消化時(shí)間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細(xì)胞（潤洗方法５min還不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細(xì)胞，一般不超過５min，即可見細(xì)胞成片移動，就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會有難消化的時(shí)候，比如tsDC細(xì)胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時(shí)間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時(shí)候是傳代的原因；３)有時(shí)間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長曲線，不會臨時(shí)要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時(shí)間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時(shí)間，也不會耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
CFSC-2G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2405細(xì)胞、CCD-18Co細(xì)胞、NK 10a細(xì)胞
NCIH889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS180細(xì)胞、SK-HEP-1細(xì)胞、FHL 124細(xì)胞
NCIH1734細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-1細(xì)胞、NCI-H1395細(xì)胞、SW-403細(xì)胞
MC 116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM06141細(xì)胞、KFB細(xì)胞、MH-S細(xì)胞
Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KTC-1細(xì)胞、COV-362細(xì)胞、EAhy 926細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
3T3-L1 Cell:小鼠前脂肪胚胎成纖維細(xì)胞系
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細(xì)胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細(xì)胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè)，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細(xì)胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時(shí)１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細(xì)胞濃度過低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細(xì)胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響，還有一個(gè)說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細(xì)胞形態(tài)特性：成纖維細(xì)胞樣
RWPE-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C 643細(xì)胞、SF-539細(xì)胞、NT2D1細(xì)胞
HuH28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IHH4細(xì)胞、LS 513細(xì)胞、PTK-2細(xì)胞
GS-9L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-028細(xì)胞、Neukoplast細(xì)胞、OAW42細(xì)胞
C3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCC-SUP細(xì)胞、GAK細(xì)胞、CII細(xì)胞
HO8910/PM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bac12F5細(xì)胞、U-118-MG細(xì)胞、MUS-M1細(xì)胞
NCIH1781細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jijoye細(xì)胞、NRK52E細(xì)胞、Sarcoma OSteogenic-2細(xì)胞
Okayama University Medical School-23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OC-316細(xì)胞、H-2108細(xì)胞、ELD-1細(xì)胞
3T3-L1 Cell:小鼠前脂肪胚胎成纖維細(xì)胞系
KYSE410細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK-1細(xì)胞、HOS (TE85, Clone F5)細(xì)胞、WPE-int細(xì)胞
Hs 578.Bst細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2107細(xì)胞、MPC-5細(xì)胞、HL-60細(xì)胞
HIMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-157細(xì)胞、2V6.11細(xì)胞、SCL-2細(xì)胞
L02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1651細(xì)胞、NCI-H1435細(xì)胞、B958細(xì)胞
Balb/3T3-4-Cl31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL-5細(xì)胞、Tb1.Lu細(xì)胞、CHG5細(xì)胞
MDAMB436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1990細(xì)胞、UMR-106細(xì)胞、SJRH-30細(xì)胞
UM-UC-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CF-1 MEF細(xì)胞、GL261細(xì)胞、ZYM-DIEC02細(xì)胞
H1184細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV-CA 432細(xì)胞、KCL22S細(xì)胞、YAC細(xì)胞
OVSAHO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-266-mel細(xì)胞、Hs683T細(xì)胞、UWB1.289+BRCA1細(xì)胞
OVSAHO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-266-mel細(xì)胞、Hs683T細(xì)胞、UWB1.289+BRCA1細(xì)胞
Caco-2BBe細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 954細(xì)胞、SCC-9細(xì)胞、NCI-H2141細(xì)胞
UMRC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL細(xì)胞、NCI-H740細(xì)胞、CMT-93細(xì)胞
EM-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERI-Rb-1細(xì)胞、SUP T1細(xì)胞、CNE-2細(xì)胞
MC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUIT2細(xì)胞、PTK-2細(xì)胞、CAL-85-1細(xì)胞
MDA-MB-436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF/CEM/0細(xì)胞、MRASMC細(xì)胞、SCC090細(xì)胞
CEM-T4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB 468細(xì)胞、OCI-AML-2細(xì)胞、MDCK (NBL-2)細(xì)胞
RBL.2H3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT20細(xì)胞、HCC 70細(xì)胞、GM346細(xì)胞
MV(4;11)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC12(高分化)細(xì)胞、WISH細(xì)胞、451-LU細(xì)胞
WBF344細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1428細(xì)胞、TF-1細(xì)胞、WRL 68細(xì)胞
Cloudman S91 melanoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 206細(xì)胞、CAL39細(xì)胞、NCI-522細(xì)胞
343 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUD6細(xì)胞、alpha-TC1.6細(xì)胞、H-747細(xì)胞
J.E6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL 33細(xì)胞、SU86_86細(xì)胞、18G3.cl 1細(xì)胞
NCI-HUT-460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TR-146細(xì)胞、ECV 304細(xì)胞、H-1869細(xì)胞
MOVAS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM159PT細(xì)胞、KHYG細(xì)胞、M-O7e細(xì)胞
SW-579細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML3細(xì)胞、M-G63細(xì)胞、MAVER細(xì)胞
ACC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU.86細(xì)胞、Detroit562細(xì)胞、OC-316細(xì)胞
BRL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293細(xì)胞、LAD 2細(xì)胞、Hs 445細(xì)胞
RT4P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep 3B2細(xì)胞、DMS153細(xì)胞、FRhK-4細(xì)胞
Rat Chondrosarcoma Swarm細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL1細(xì)胞、HEK-293A細(xì)胞、MES 23.5細(xì)胞
NCI-H1963細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR-90細(xì)胞、MSB1細(xì)胞、OsA-CL細(xì)胞
TFK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNT1A細(xì)胞、MES-SA-Dx5細(xì)胞、MDA PCa 2b細(xì)胞
SY5Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DBTRG-05MG細(xì)胞、BHT-101細(xì)胞、TE11細(xì)胞
NCI-H1105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1694細(xì)胞、RKO-E6細(xì)胞、Sup T-1細(xì)胞
293-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI/ADRRES細(xì)胞、SKNAS細(xì)胞、Vero E-6細(xì)胞
SNU368細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB-4細(xì)胞、GM02219細(xì)胞、Detroit562細(xì)胞
L428細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 2650細(xì)胞、MCF-7/AdrR細(xì)胞、H82細(xì)胞
SKMel-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WC00097細(xì)胞、Hepatoma-22細(xì)胞、HL-1細(xì)胞
LP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE520細(xì)胞、Colon26細(xì)胞、HIBEC細(xì)胞
HCC1171細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wistar Institute-38細(xì)胞、MiaPaCa-2細(xì)胞、DSL-6A/C1細(xì)胞
D407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-3細(xì)胞、IB-RS-2細(xì)胞、Panc5.04細(xì)胞
32Dc3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-M(TK-)細(xì)胞、BMSCs（mBMSCs）細(xì)胞、BE(2)M-17細(xì)胞
NPA87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU 145細(xì)胞、Sc-1細(xì)胞、SHEP1細(xì)胞
451-LU細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-138 MG細(xì)胞、LY-R細(xì)胞、HOP92細(xì)胞
3T3-L1 Cell:小鼠前脂肪胚胎成纖維細(xì)胞系
SF295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2081細(xì)胞、Lu-165細(xì)胞、PK136細(xì)胞
SKNEP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuLEC-5a細(xì)胞、KM-12細(xì)胞、786-O細(xì)胞
B16/F1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H345細(xì)胞、HEK293E細(xì)胞、NCIH1648細(xì)胞
Hela-mock細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-123細(xì)胞、HCV 29細(xì)胞、Hs 578.Bst細(xì)胞
Hs863T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1836細(xì)胞、LC-1細(xì)胞、RDES-1細(xì)胞
Mv 1 Lu (NBL-7)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCaP 37細(xì)胞、H-1944細(xì)胞、NCI-UMC-11細(xì)胞
0V-1063細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780S細(xì)胞、QGY 7701細(xì)胞、JB 6細(xì)胞
H1838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DCS細(xì)胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細(xì)胞、MDAMB157細(xì)胞
SU-DHL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SL-1細(xì)胞、H2227細(xì)胞、B-CPAP細(xì)胞
PECAPJ34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT細(xì)胞、C518細(xì)胞、Hs611T細(xì)胞
EB3 [Human Burkitt lymphoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Okayama University Medical School-27細(xì)胞、H929細(xì)胞、SW480E細(xì)胞
RT112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS4;11細(xì)胞、LAN5細(xì)胞、WERI-Rb1細(xì)胞
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