"WI-38 Cell:人胚肺成纖維細胞系
細胞形態(tài):成纖維細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:LeonardHayflick建系;有限傳代細胞系;壽命為50±10代(倍增時間24h);來自妊娠3個月的正常胚胎肺組織。該細胞系是個用于人制備的人二倍體細胞;培養(yǎng)基中添加TNFα可以加快細胞生長。
F442-A細胞系相關產(chǎn)品:MOLT-16細胞、DH 82細胞、UCLA-SO-M14細胞
SKMEL-24細胞系相關產(chǎn)品:MDA-134細胞、AE 1201細胞、MV4II細胞
NCI-H1618細胞系相關產(chǎn)品:3396細胞、H-1417細胞、SNU-1細胞
WM 239-A細胞系相關產(chǎn)品:BCP1細胞、H-2106細胞、TE353.SK細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
WI-38 Cell:人胚肺成纖維細胞系
如何把細胞養(yǎng)的形態(tài)更好更漂亮。1.不同的細胞,喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個不僅僅是說培養(yǎng)基的不同,還有就是細胞生長的空間密度問題。有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應該留很少量的細胞,這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。2.對于有些人總是會遇到養(yǎng)的細胞形態(tài)怎么都不好的問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞,如果細胞形態(tài)不好,(或者細胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進行預吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細胞我們只吹打,不消化的);其次,把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內,培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內培養(yǎng),按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。我稱之為“二傳”。呵呵。如果一次效果還不理想,可重復多次。直到找到細胞完美形態(tài)。其中要注意,結合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。3.關于培養(yǎng)瓶內加入培養(yǎng)基的量的問題。這個是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些細胞反而是培養(yǎng)基少一點相反細胞形態(tài)會長得比較好。(可能也是競爭很大,有優(yōu)勝劣汰吧。呵呵。)對于生長速度快的細胞,易生長的細胞加少一點培養(yǎng)基細胞形態(tài)會更好。但是要注意換液掌握。4.關于選擇培養(yǎng)瓶的問題。個人發(fā)現(xiàn)生長速度快的細胞在玻璃瓶內生長的狀態(tài)會比一次性相對好一些。而對于同一種細胞,在其生長旺盛快速的時期在玻璃瓶內的生長狀態(tài)也比內好。這可能是因為比玻璃瓶更容易貼壁。生長速度快的細胞在這種相對“更安逸”的環(huán)境里反而長得狀態(tài)不如玻璃瓶好。所以對于生長速度慢的細胞如果想要更漂亮的細胞狀態(tài),比玻璃瓶會好,對于生長速度慢的細胞,玻璃瓶則會更好。同樣,對于同一種細胞,在其生長速度慢的時候,會好一點,比如剛剛復蘇的時候,或者原代培養(yǎng)的時候。而在其生長旺盛的時候,玻璃瓶則相對會好一點。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:4傳代;2-3天換液1次
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結:1)一般客戶拿到細胞后,應該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
16HBE14o-細胞系相關產(chǎn)品:Panc 3.27細胞、SGC7901細胞、HeLa/S3細胞
NPA-87細胞系相關產(chǎn)品:RC92A細胞、H-4細胞、SUPT-1細胞
HS-940-T細胞系相關產(chǎn)品:Hs940-T細胞、WILL-2細胞、HSF2細胞
Pfeiffer細胞系相關產(chǎn)品:L-Wnt-3A細胞、OCILY7細胞、MFHL-2細胞
P388-D1細胞系相關產(chǎn)品:SCL-I細胞、SU8686細胞、CoCL3細胞
細胞生長特性:貼壁生長
WI-38 Cell:人胚肺成纖維細胞系
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結1:復蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y2:首先應該懷疑凍存,實際上復蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。
細胞形態(tài)特性:成纖維細胞樣
KLM-1細胞系相關產(chǎn)品:RPE1細胞、KALS1細胞、MEL細胞
Colon38細胞系相關產(chǎn)品:H125細胞、RC13細胞、JF305細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞系相關產(chǎn)品:Tsup-1細胞、P3X63Ag8細胞、HTori-3.1細胞
MeSoTheliOma-211H細胞系相關產(chǎn)品:BIU-87細胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞、SU-DHL-1細胞
AC16 [Human hybrid]細胞系相關產(chǎn)品:SU86.86細胞、L2細胞、L23/P細胞
Pt-K1細胞系相關產(chǎn)品:HCC0070細胞、Kasumi-6細胞、NCI-H1373細胞
SKRC 39細胞系相關產(chǎn)品:JM1細胞、HOCF細胞、NCI H69細胞
WI-38 Cell:人胚肺成纖維細胞系
Pt K1細胞系相關產(chǎn)品:Ly18細胞、PZ-HPV-7細胞、H2452細胞
HET-1A細胞系相關產(chǎn)品:GM3190細胞、Caco2-BBE細胞、LX-2細胞
MB 157細胞系相關產(chǎn)品:UPCI:SCC090細胞、Z-138細胞、Hepatoma 22細胞
X63Ag8.653細胞系相關產(chǎn)品:HT144mel細胞、Leydig細胞、SW-962細胞
HMC3細胞系相關產(chǎn)品:LC-1Sq細胞、CG-4細胞、HConEpic細胞
G361細胞系相關產(chǎn)品:EBNA-293細胞、H-1755細胞、Ly10細胞
SUP-T1細胞系相關產(chǎn)品:N-2a細胞、A-431細胞、SN12C細胞
HCCC-9810細胞系相關產(chǎn)品:ES2細胞、CAL-148細胞、MDA-MB-231細胞
PC2細胞系相關產(chǎn)品:Nb2細胞、HOP92細胞、HLEB3細胞
PC2細胞系相關產(chǎn)品:Nb2細胞、HOP92細胞、HLEB3細胞
H-446細胞系相關產(chǎn)品:U251-MG細胞、Hs 888.T細胞、A9(Hamprecht)細胞
NCIH727細胞系相關產(chǎn)品:NCI-N87細胞、TN5B14細胞、SW1573細胞
Giant Cell Tumor細胞系相關產(chǎn)品:L- cell細胞、NCI-H69細胞、E.L.4細胞
hTERT-RPE1細胞系相關產(chǎn)品:Hs821T細胞、STTG1細胞、DR2R 1610細胞
hs 68細胞系相關產(chǎn)品:MSB1細胞、MOLP-2細胞、RBL2H3細胞
MEC-1細胞系相關產(chǎn)品:HPAF-I細胞、HCC-2935細胞、NCI-H889細胞
T-47-D細胞系相關產(chǎn)品:BTI-TN5B1-4細胞、Panc_08_13細胞、KMST6細胞
SNU-449細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H2347細胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞、TPC1細胞
SW-620細胞系相關產(chǎn)品:COR-L51細胞、CHO/dhFr-細胞、SW1088細胞
NCI-H2081細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H102細胞、Mouse podocyte細胞、Evsa-T細胞
LAN1細胞系相關產(chǎn)品:HCE細胞、SKG-IIIa細胞、Mac-1細胞
TM-3細胞系相關產(chǎn)品:LS174細胞、3T3-A31細胞、746T細胞
HEK-EBNA細胞系相關產(chǎn)品:SK-ES細胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞
UPCISCC090細胞系相關產(chǎn)品:LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞、2PK-3細胞、3T3F442A細胞
SKG3A細胞系相關產(chǎn)品:IOSE29細胞、B-3細胞、SW-48細胞
BNL.CL2細胞系相關產(chǎn)品:TFK-1細胞、MA-104細胞、NCIH244細胞
UPCI-SCC-090細胞系相關產(chǎn)品:U20-S細胞、R3/1細胞、OVMANA細胞
MT-2細胞系相關產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞、SKNO-1細胞、RPTEC TERT1細胞
Human Liver-7702細胞系相關產(chǎn)品:JiyoyeP-2003細胞、ATDC5細胞、LICR-HN-6細胞
ARIP細胞系相關產(chǎn)品:AR4-2J細胞、H1666細胞、CFSC-2G細胞
JJN3細胞系相關產(chǎn)品:DrG細胞、SK-RC 39細胞、MiaPaca.2細胞
MFE 296細胞系相關產(chǎn)品:SK UT 1細胞、RPMI-7666細胞、NCI-SNU-1040細胞
C4-2B細胞系相關產(chǎn)品:H-II-E-C3細胞、FRO81-2細胞、LCD細胞
SK-MEL-2細胞系相關產(chǎn)品:SNU638細胞、Mouse Bladder Tumor line-2細胞、CCD 841 CoN細胞
MC9細胞系相關產(chǎn)品:CCD1112Sk細胞、KYSE-180細胞、0V-1063細胞
TE-10細胞系相關產(chǎn)品:NGEC細胞、SK-N-BE(2)-C細胞、SUPB-15細胞
293-EBNA細胞系相關產(chǎn)品:Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞、NRK49F細胞、CBRH-7919細胞
Kasumi-1細胞系相關產(chǎn)品:NCIH1623細胞、HL-60 Clone 15細胞、NCI-H1155細胞
SUNE1細胞系相關產(chǎn)品:GM06141B細胞、NCIH1930細胞、NCIH446細胞
MDA-MB-134細胞系相關產(chǎn)品:OVCA432細胞、Tu212細胞、624-mel細胞
HCC38細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H2171細胞、Hs 766.T細胞、MGC803細胞
KYSE450細胞系相關產(chǎn)品:NALM 6細胞、HEK293FT細胞、KMBC細胞
Caco-2/BBe細胞系相關產(chǎn)品:TB-1 Lu細胞、NB4細胞、TE 671細胞
WI-38 Cell:人胚肺成纖維細胞系
OE-19細胞系相關產(chǎn)品:Nthy-ori 3.1細胞、CTLA4Ig-24細胞、JM-1細胞
RPMI-2650細胞系相關產(chǎn)品:BC-021細胞、NHLF細胞、H-1648細胞
B-3細胞系相關產(chǎn)品:COLO-738細胞、Hs578Bst細胞、H-2452細胞
Hep 3B2_1-7細胞系相關產(chǎn)品:SMMC 7721細胞、QGP 1細胞、HEH2細胞
Balb/3T3-4-Cl31細胞系相關產(chǎn)品:PL-5細胞、Tb1.Lu細胞、CHG5細胞
MESSA-DX5細胞系相關產(chǎn)品:GLC-15細胞、PLA801D細胞、OCI-AML2細胞
RSC-364細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H-128細胞、KMBC細胞、MES-SA細胞
Colo741細胞系相關產(chǎn)品:KYSE-410細胞、EnCa1細胞、TE671細胞
KATOIII細胞系相關產(chǎn)品:NCI-841細胞、Z310細胞、NIH:OVCAR-4細胞
PLC/PRF5細胞系相關產(chǎn)品:KYSE 510細胞、SUPB15細胞、LC1sq細胞
H526細胞系相關產(chǎn)品:PLCPRF5細胞、HMy2.CIR細胞、GTL-16細胞
A431細胞系相關產(chǎn)品:HS688AT細胞、HEC-1-A細胞、DH 82細胞
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關鍵字: WI-38 Cell:人胚肺成纖維細胞系
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