"RPMI-1846 Cell:人黑色素瘤細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
HLCL9B10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1599細胞、8402細胞、BSC40細胞
NOMO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:786-O細胞、CII細胞、HEK293T/17細胞
HFF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAEC細胞、HuH 6細胞、P3.653細胞
TNC-1B12B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pa18C細胞、G-402細胞、U373MG細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
RPMI-1846 Cell:人黑色素瘤細胞系
細胞消化過程總結(jié):其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準(zhǔn)備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學(xué)那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
H4-II-EC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-190細胞、SKRC-20細胞、T241細胞
NCI-747細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos-2G6-4C10細胞、CHG5細胞、FRO81-2細胞
Evsa-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-9S1細胞、C42細胞、NCI-H1703細胞
HCT GEO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ISHI細胞、Rainbow Trout Embryo細胞、T_T_細胞
766T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EnCa1細胞、ABC-1細胞、RS4-11細胞
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
RPMI-1846 Cell:人黑色素瘤細胞系
貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉!
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
HCC1833細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL-100細胞、NGEC細胞、HUT-125細胞
CMT 167細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC-PK(1)細胞、VERO76細胞、RL95-2細胞
Sp2/O細胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63-AG 8.653細胞、OUMS-23細胞、SCC4細胞
H-2073細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sf21細胞、KMB17細胞、Huh-7細胞
Tokyo Medical and Dental university 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEK細胞、HB 611細胞、FLC-7細胞
MCMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IB-RS2細胞、HUT28細胞、PC-3/M細胞
SW756細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA-SO-M14細胞、7860細胞、CAL120細胞
RPMI-1846 Cell:人黑色素瘤細胞系
526-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MMAc-Serum Free細胞、LLC-MK2細胞、JROECL 19細胞
NCIH548細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 679細胞、HGC27細胞、NCI-H838細胞
NRK clone 49F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H322T細胞、OVCA-420細胞、OE21細胞
L-WRN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-1細胞、NCIH1836細胞、CW-2細胞
SKNO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC-151細胞、IEC-18細胞、C32 [Human melanoma]細胞
SEG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H929細胞、MDA-435細胞、Jurkat E6細胞
Y3-Ag123細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4-1細胞、SK RC 20細胞、Hep-G2/C3A細胞
CAL51細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB231細胞、HEK/293細胞、HSC細胞
Capan 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAOV3細胞、BHP 10-3細胞、NCI-SNU-5細胞
Capan 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAOV3細胞、BHP 10-3細胞、NCI-SNU-5細胞
H69C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H522細胞、MEF (CF-1)細胞、Jurkat E6-1細胞
HME1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC 116細胞、LNCaP clone FGC細胞、NCIH1666細胞
C-643細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AD293細胞、RA.1細胞、Granta519細胞
Clone 929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mv1Lu細胞、HET1A細胞、N1E-115細胞
J 774A.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc4.03細胞、SKCol1細胞、KBM-5細胞
Colon-26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN 382細胞、PM6細胞、COLO 357細胞
SRA01/04 (HLE)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMO-1細胞、SBC3細胞、3-LL細胞
Y3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLN205細胞、MuM-2B細胞、hRMECs細胞
TCam-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMES-1細胞、NB-9細胞、HFF細胞
MA 104細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IHHA-1細胞、NCIH1876細胞、NCI-H1568細胞
RSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DH-L5細胞、TKB1細胞、UWB1.289細胞
COLO 16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM192C細胞、MSTO-211H細胞、MES23.5細胞
MDAMB134細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT.T15細胞、Panc-10.05細胞、Nittby-Salford 1細胞
LM8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECV 304細胞、PK-13細胞、Centre Antoine Lacassagne-62細胞
KNS-81細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1876細胞、RS1細胞、BRL 3A細胞
H345細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPC-TW039細胞、UMR106細胞、P3-X63-Ag8細胞
SK-OV-433細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-450細胞、WIL2S細胞、DMS 273細胞
LLC PK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U20S細胞、LTEP-s細胞、JTC-28細胞
MDAMB175VII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCV-29細胞、CT-26細胞、WM451細胞
NCI-H676B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J82細胞、CPAE細胞、A-427細胞
P3X63Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 48細胞、CMT-167細胞、Beta-TC-6細胞
Z138細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H520細胞、HeLa 229細胞、KATOIII細胞
Karpas-422細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon 38細胞、T.T細胞、Caco-2/ATCC細胞
CCD33Co細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-47D細胞、U118-MG細胞、Leukemia L1210細胞
CAL-148細胞系相關(guān)產(chǎn)品:253J-Bladder-V細胞、T-47-D細胞、COLO680N細胞
Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV1/P細胞、HFL細胞、RBSMC細胞
RPMI-8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Epithelioma-2細胞、CCRF-CEM細胞、Turbot Embryonic Cell line細胞
ID8/MOSEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGP1細胞、NCIN87細胞、ADR-RES細胞
SKOV-433細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1703細胞、Hs 729.T細胞、MC-26細胞
MES-23.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3J.HR1K細胞、TMD-8細胞、RT4細胞
DC 2.4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:526細胞、HFLS-OA細胞、NBL-S細胞
Panc 08.13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AZ 521細胞、HKF細胞、HSAS1細胞
RD細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB231細胞、Hs281T細胞、KYSE0410細胞
RPMI-1846 Cell:人黑色素瘤細胞系
HCC1954-BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-A細胞、SK-MEL-3細胞、MyLa 2059細胞
16HBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC38細胞、RASMC細胞、SNB.19細胞
KP-N-RT-BM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCIAML3細胞、KAT5細胞、578T細胞
OACP4C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、EOC 20細胞、NB-4細胞
HPAEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon-38細胞、IMR-90細胞、hRPTC細胞
CMT 167細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC-PK(1)細胞、VERO76細胞、RL95-2細胞
H716細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo16細胞、BRL 3A細胞、NCI-H1666細胞
KOSC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OAW42細胞、Mel-MeWo細胞、T-ALL-1細胞
373 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OEC19細胞、MAVER1細胞、NCIH295R細胞
CCC-HHM-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL40細胞、NCIH2171細胞、CCD19-Lu細胞
SUM 52細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA415細胞、SU86-86細胞、SKRC-20細胞
HSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB435S細胞、OVCAR3細胞、MC 3T3-E1細胞
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