"EFO-27 Cell:人卵巢腺癌細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
SNU475細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH661細胞、BEL7402細胞、SJRH30細胞
CTV1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞、NEC細胞、PANC.1細胞
H2286細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU-812F細胞、MUVEC細胞、SuDHL 8細胞
OVCAR 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nb-2細胞、MTC-TT細胞、SW527細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
EFO-27 Cell:人卵巢腺癌細胞系
細胞的凍存:目前,細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×10(6)~1×10(7)/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
培養(yǎng)細胞真的不難,最關(guān)鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數(shù),傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Panc-327細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCEC-12細胞、SN12C細胞、SNU-C2B細胞
KYSE 450細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Med 283細胞、WM239細胞、SNU354細胞
VSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hce8693細胞、Calu3細胞、IGROV 1細胞
TE85細胞系相關(guān)產(chǎn)品:tdott細胞、NCIH208細胞、Hs 840.T細胞
HEL 299細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2085細胞、MM.1S細胞、L-5178-Y細胞
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
EFO-27 Cell:人卵巢腺癌細胞系
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導(dǎo)致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間,轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇,結(jié)果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復(fù)蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
A20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNE2細胞、HME1細胞、95C細胞
H2023細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUPT-1細胞、Hmy.2 CIR細胞、H1651細胞
HELA-GFP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:251MG細胞、NCI-128細胞、HuPT4細胞
no-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MiaPaca.2細胞、KMB-17細胞、HRIF細胞
MDA-MB361細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS-53細胞、LA4細胞、Mouse Podocyte Clone-5細胞
CF-PAC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2452細胞、P30/Ohkubo細胞、NCC-IT細胞
Z-138細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H838細胞、LNCaP-FGC細胞、D283 Med細胞
EFO-27 Cell:人卵巢腺癌細胞系
RPTEC TERT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:786O細胞、H2591細胞、CF PAC-1細胞
HCC0070細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1395細胞、TO 175.T細胞、DHL-16細胞
M210B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-20細胞、NCIH358細胞、H-920細胞
NCI H23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-747細胞、C4-2B細胞、SCCVII細胞
RMS13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM115-mel細胞、P3 NS1 Ag4細胞、SP2細胞
COLO320DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC-1spg細胞、HFF細胞、HEL 92.1.7細胞
P 815細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SPCA1細胞、SNU354細胞、EU-3細胞
SW1990細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU1040細胞、CACO2細胞、C-4I細胞
RPMI-7951細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDQP1細胞、SBC-3細胞、TC-1 [Mouse lung]細胞
RPMI-7951細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDQP1細胞、SBC-3細胞、TC-1 [Mouse lung]細胞
CHG5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE2-M17細胞、OCI-Ly1細胞、UCLA-SO-M20細胞
253J-Bladder-V細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA 4細胞、KMST-6細胞、PAI細胞
HPAF-II/CD18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSC細胞、GM-346細胞、SUP-B15細胞
PLA-801D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:THP1細胞、PMVEC細胞、NCIH64細胞
A375細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LOUNH91細胞、NTC-200細胞、Lewis Lung Cancer細胞
H2330細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeT-5A細胞、OEC19細胞、hTERTHME1細胞
KU 19-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bovine Turbinate細胞、NCIH2141細胞、Caco-2BBe細胞
HUC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FK81細胞、HuT78細胞、OSK-1細胞
CG-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 4.03細胞、K562/ADP細胞、H647ell細胞
CMT 64細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGBC11T細胞、M20 [Human melanoma]細胞、NEC8細胞
EU-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC0203細胞、Vero 76細胞、DHL-5細胞
KYSE0520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caki-1細胞、RM-1細胞、S16細胞
KP-N-RT-BM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-116細胞、190PT細胞、VERO C 1008細胞
H2342細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGE細胞、3AA細胞、MC 3T3-E1細胞
Y79細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL-1細胞、MAVER細胞、NCI-H211細胞
SNU-398細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOZ細胞、LICR-HN-6細胞、NF639細胞
HCT 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KNS42細胞、P-388D1細胞、WEHI 231細胞
MARC-145細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-26細胞、HUVEC細胞、HOMEC細胞
HCC0095細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ha Fe細胞、L-1210細胞、VMRCLCD細胞
Hs683細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-F細胞、LK 2細胞、Line 697細胞
P30/Ohkubo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR 433細胞、SUM 149細胞、CEM T4細胞
P3X63 Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2291細胞、FCCH1024細胞、SU-DHL6細胞
EA.Hy926細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1770細胞、SCCVII細胞、P36細胞
SMA 560細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF-II細胞、H2444細胞、I90細胞
NCI-H441-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1975細胞、BNL.1ME A.7R.1細胞、Human Corneal Endothelial Cells-12細胞
E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRhK-4細胞、293 c18細胞、143 B細胞
NCM-460細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2227細胞、H-220細胞、Roswell Park Memorial Institute 8226細胞
NCI-SNU-182細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIC細胞、WEHI-231細胞、PNT1/A細胞
MDA468細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QSG-7701細胞、FHs74Int細胞、HFSF細胞
H2286細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU-812F細胞、MUVEC細胞、SuDHL 8細胞
NIH:OVCAR3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK 52E細胞、Epstein-Barr-2細胞、SR細胞
HPC-Y5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM02131A細胞、H1694細胞、IEC 6細胞
Panc203細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCH細胞、HCASMC細胞、Human podocyte細胞
EFO-27 Cell:人卵巢腺癌細胞系
Sol8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAW2647細胞、Oregon J-111細胞、U-118MG細胞
CAL-51細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI 164細胞、HMVEC細胞、MC3T3細胞
C3H-10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUTZ-3細胞、ATN1細胞、Hs 281.T細胞
Jurkat (clone E6-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW756細胞、CEM-CCRF (CAMR)細胞、MOLT-16細胞
H-3255細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1080細胞、RL95細胞、B16-F10--RED細胞
IPLB-Sf21-AE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU1細胞、H-1648細胞、MT-2J細胞
Me-Wo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM細胞、HO1-N-1細胞、SW837細胞
UMR 106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1990細胞、BSC1細胞、PC-3M-IE8細胞
P3 (Jiyoye)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hMSC-BM細胞、CCD-1095Sk細胞、B-95-8細胞
LA-795細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NR 8383細胞、HTori 3細胞、DHL6細胞
NRK 52E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR8細胞、Human Fetal Thymocyte-8810細胞、GC-1細胞
My-La 2059細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-266 AR1細胞、HCEC-12細胞、CCD-966SK細胞
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