"AtT-20 Cell:小鼠垂體瘤細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
EVSAT細胞系相關產品：MB49細胞、HCC0044細胞、PVEC細胞
DHL-4細胞系相關產品：NTHY-ORI3.1細胞、Panc-813細胞、H2110細胞
OsACL細胞系相關產品：Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞、LU65細胞、SUM-159-PT細胞
HFB細胞系相關產品：SNU484細胞、SUSM-1細胞、BA/F3細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
AtT-20 Cell:小鼠垂體瘤細胞系
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系，大部分的細胞都是要成片生長的，尤其是對于貼壁細胞，單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話，傳代后細胞是不能貼壁的，這樣抱團的細胞就會死亡。所以，消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài)，這個啊是非?？季磕愕墓Ψ虻?！細胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個，因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開，受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊，這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來，又不能太過，一吹就整片脫落，要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-２細胞就是如此。另外關于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到７０%左右的時候就要傳代了，一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞，你在洗的時候如果是用無血清１６４０去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣，用１６４０培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話，可以用PBS來洗，洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的，對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清，防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先，是很關鍵的一點。先補充這么多，還會后續(xù)更新。再補充一點：傳代時PBS洗是很重要的一步，最近發(fā)現(xiàn)，用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置１０-１５分鐘，有些需要更長的時間，等到細胞一個個分離開來的時候，就可以直接吹打下來，但是和胰酶消化一樣，要控制好時間，不能時間太過了，要不然損傷細胞，細胞不容易成活，狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候，或者臨時沒有胰酶了，可以選用此方法。不過一定要試試，看是否適合你的細胞。
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代？體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當一個細胞被其他細胞包圍的時候，它就會停止生長，及時傳代后，細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染；試劑保存不當；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細胞濃度；讓細胞逐漸適應新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內用完;分離培養(yǎng)物，檢測支原體。冷凍管應如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺操作細胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預防冷凍管爆裂。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
HEK-293A細胞系相關產品：ECV-304細胞、U-373 MG細胞、KPL-4細胞
MC 3T3-E1細胞系相關產品：SUNE1細胞、WBF344細胞、OE19細胞
SKNDZ細胞系相關產品：751-NA-15細胞、HCC366細胞、PFSK-1細胞
MDA MB 175 VII細胞系相關產品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞、H-1623細胞、TO 175.T細胞
KYSE-450細胞系相關產品：MHHCALL2細胞、LA-N-1細胞、SW480細胞
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
AtT-20 Cell:小鼠垂體瘤細胞系
細胞凍存復蘇材料與方法步驟：常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時要注意以下幾點：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個月充氮一次。液氮溫度達-１９６℃，使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結構，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導，使液氮直達瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或專用細胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細胞分裝于安瓿或專用冷凍塑料管中，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數)。(４)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內;置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
CMK細胞系相關產品：LS-411細胞、CV-1細胞、NCI-H128細胞
Med 341細胞系相關產品：373MG細胞、HG2855細胞、U-87 MG細胞
GM00215A細胞系相關產品：HOSEpiC細胞、H2122細胞、GM02219D細胞
JurkatE6-1細胞系相關產品：Walker-256-TC細胞、NR8383.1細胞、28SC細胞
HELF細胞系相關產品：BAR-T細胞、MBT-2細胞、CAL-120細胞
SW-780細胞系相關產品：U-251 MG細胞、Kasumi 1細胞、ID8細胞
MIA-Pa-Ca-2細胞系相關產品：451-LU細胞、JEG-3細胞、Panc 08.13細胞
AtT-20 Cell:小鼠垂體瘤細胞系
Capan 1細胞系相關產品：CAOV3細胞、BHP 10-3細胞、NCI-SNU-5細胞
Walker256細胞系相關產品：NCI-H1993細胞、kms 11細胞、624mel細胞
H-650細胞系相關產品：LCLC103H細胞、ARO 81-1細胞、AtT 20細胞
Capan-2細胞系相關產品：H-1341細胞、NOR 10細胞、NG10815細胞
MC-3T3細胞系相關產品：CESS細胞、A-172MG細胞、RFL 6細胞
MDA-MB-453細胞系相關產品：H-2444細胞、C57 Mouse Tumor 64細胞、HS-729細胞
RGM1細胞系相關產品：C1R細胞、HT-29細胞、SKMel-28細胞
Mv.1.Lu細胞系相關產品：YAC細胞、BC-027細胞、LICCF細胞
HCC-827細胞系相關產品：MCF-7B細胞、NCI-H1341細胞、SW 527細胞
HCC-827細胞系相關產品：MCF-7B細胞、NCI-H1341細胞、SW 527細胞
KMM-1細胞系相關產品：MCF12F細胞、RPMI 2650細胞、CCRFCEM細胞
OB2細胞系相關產品：Lieming Xu-2細胞、OCI/AML4細胞、A2780細胞
TI-73細胞系相關產品：Hep 3B2.1-7細胞、KS-SLK細胞、P3J.HR1K細胞
MUTZ-3細胞系相關產品：H1915細胞、NCIH1734細胞、DV-90細胞
SKUT-1細胞系相關產品：H-498細胞、Kit225細胞、Ra #1細胞
NCI-H2172細胞系相關產品：Pt K1細胞、NPC-TW 039細胞、Detroit 562細胞
KU1919細胞系相關產品：MC9細胞、NMC-G1細胞、Panc 04.03細胞
NK-10A細胞系相關產品：X63細胞、EFO 27細胞、LL/2(LLc1)細胞
IOSE-Van細胞系相關產品：VM Cub 1細胞、Potorous tridactylus Kidney 1細胞、HMO6細胞
JCA-1細胞系相關產品：NTC-200細胞、H-1975細胞、Fox/NY細胞
H1672細胞系相關產品：MIHA細胞、H-1437細胞、HS-695T細胞
KMS-26細胞系相關產品：ARH-77細胞、H-2110細胞、HME1細胞
WEHI231細胞系相關產品：LICR-HN6細胞、McA-RH 7777細胞、VMRC-RCZ細胞
MDA-468細胞系相關產品：HOC-1細胞、SO-Rb 50細胞、TCCPAN2細胞
MN-60細胞系相關產品：Wien133細胞、H-838細胞、HCC1599細胞
H35細胞系相關產品：OV 2008細胞、6T-CEM細胞、OVCAR8細胞
bEND.3細胞系相關產品：ATDC5細胞、KP-N-NS細胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞
H1618細胞系相關產品：TE-12細胞、TCMK-1細胞、H810細胞
SK-MEL 28細胞系相關產品：NS1-Ag4細胞、OSC19細胞、IHC-ST1細胞
DMS-114細胞系相關產品：MDAMB-231細胞、253J細胞、293AD細胞
A 375細胞系相關產品：Hs 746T細胞、MCF-7/ADR細胞、451Lu細胞
LM TK negative細胞系相關產品：SW1088細胞、P3J細胞、HR1K細胞
VP303細胞系相關產品：Huh-7細胞、COLO 205細胞、MOLP-8細胞
MCF7-GFP細胞系相關產品：P3/NS-1細胞、SW 1353細胞、CCRF-CEM C1細胞
52PE細胞系相關產品：Panc04.03細胞、BT-20細胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞
H.Ep. No. 2細胞系相關產品：RBL 2H3細胞、Immortalized Human Hepatocytes細胞、OVCAR8/ADR細胞
293S細胞系相關產品：CL-34細胞、LC1sq細胞、RBL-2H3細胞
SuDHL 5細胞系相關產品：Hs 578.Bst細胞、LS-411細胞、ChaGo K-1細胞
786O細胞系相關產品：OCI-Ly 1細胞、NCI/ADR-RES細胞、NCI-H441-4細胞
H522細胞系相關產品：HUASMC細胞、JHH-2細胞、Daudi細胞
H-358細胞系相關產品：PC-3M細胞、H-2126細胞、MG-63細胞
102PT細胞系相關產品：KMH2細胞、COLO 16細胞、C2C12細胞
NCI-H1819細胞系相關產品：NCIH2110細胞、KYSE 510細胞、CNE1細胞
AtT-20 Cell:小鼠垂體瘤細胞系
U-hth74細胞系相關產品：MEL-526細胞、HuT-78細胞、P3HR1細胞
H-1522細胞系相關產品：KNS-42細胞、CAL-78細胞、Hs 766.T細胞
L5178-R細胞系相關產品：Karpas-299細胞、GM3190細胞、P3X63-Ag8.653細胞
P388-D1細胞系相關產品：SCL-I細胞、SU8686細胞、CoCL3細胞
Hs819T細胞系相關產品：HS-766-T細胞、U2OS細胞、INS1-E細胞
CCK-81細胞系相關產品：H6c7細胞、MA-c細胞、Mouse Colon 38細胞
KMS18細胞系相關產品：NS20-Y細胞、UCLA NPA-87-1細胞、JHH-7細胞
MCM細胞系相關產品：P-36細胞、C3H 10T1/2細胞、MFE280細胞
NCIH1734細胞系相關產品：SUDHL-1細胞、NCI-H1395細胞、SW-403細胞
SW-1990細胞系相關產品：H-2342細胞、NB19-RIKEN細胞、SKNEP細胞
UC-3細胞系相關產品：HCFB（HCF）細胞、NCIH650細胞、DH-82細胞
Clone 15 HL-60細胞系相關產品：Hs-578Bst細胞、PCI:SG231細胞、MDA MB 436細胞
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關鍵字： AtT-20 Cell:小鼠垂體瘤細胞系
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