"Super Tube Cell:狗腎細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
CNE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6Cl30細胞、SP-2細胞、MC26細胞
UACC-812細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT144-mel細胞、CL 1-5細胞、H69C細胞
HTh74細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1568細胞、KG1A細胞、KY-50細胞
RPTC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES13細胞、293A細胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
Super Tube Cell:狗腎細胞系
細胞培養(yǎng)過程中相關(guān)問題總結(jié)：懸浮性細胞應(yīng)如何繼代處理？一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高，直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶，加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當(dāng)濃度，重復(fù)前述步驟即可。欲將一般動物細胞離心下來，其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速？欲回收動物細胞，其離心速率一般為３００xg(約１,０００rpm)，５-１０分鐘，過高之轉(zhuǎn)速，將造成細胞死亡；細胞之接種密度為何？依照細胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長之一重要原因；細胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何？動物細胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原來細胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意：由于DMSO稀釋時會放出大量熱能，故不可將DMSO直接加入細胞液中，必須使用前先行配制完成；DMSO之等級和無菌過濾之方式為何？冷凍保存使用之DMSO等級，必須為Tissue culture grade之DMSO，其本身即為無菌狀況，次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中，保存于４°C，避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì)，并可減少污染之機會。若要過濾DMSO，則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜；冷凍保存細胞之方法？冷凍保存方法一：冷凍管置于４°C ３０~６０分鐘→ (-２０°C ３０分鐘)→-８０°C １６~１８小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-２０°C不可超過１小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；細胞欲冷凍保存時，細胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細胞濃度？冷凍管內(nèi)細胞數(shù)目一般為１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤細胞則以５x１０(６)cells/ml vial為宜；應(yīng)如何避免細胞污染？細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法；如果細胞發(fā)生微生物污染時，應(yīng)如何處理？直接滅菌后丟棄之。
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代？體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當(dāng)一個細胞被其他細胞包圍的時候，它就會停止生長，及時傳代后，細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染；試劑保存不當(dāng)；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細胞濃度；讓細胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺操作細胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HEL 92.1.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MA104細胞、MSTO-211 H細胞、T-24細胞
HUVEC-C[HUVEC]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N1S1細胞、M-07e細胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞
SK N SH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCC MSB1細胞、Hopkins-92細胞、H-1341細胞
A-427細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D407細胞、Centre Antoine Lacassagne-62細胞、SL-1細胞
0V-1063細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780S細胞、QGY 7701細胞、JB 6細胞
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
Super Tube Cell:狗腎細胞系
細胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時要注意以下幾點：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個月充氮一次。液氮溫度達-１９６℃，使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉毎麅龃婀?、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
SKRC 39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JM1細胞、HOCF細胞、NCI H69細胞
TE354.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：S.B.細胞、HCC44細胞、RS1細胞
HemECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Beta-TC-6細胞、H-1184細胞、COS-7細胞
AZ-521細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MADISON LUNG TA-109細胞、MOLT.4細胞、T98-G細胞
P3/NSI/1-AG4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1088細胞、Alexander細胞、CAL-148細胞
WERI Rb-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LY細胞、SW1116細胞、U-343 MG細胞
MADB-106細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG/HOS Clone F-5細胞、MUTZ-1細胞、Caov-3細胞
Super Tube Cell:狗腎細胞系
NCIH1869細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2.35細胞、NCI-H345細胞、NCI-H-295細胞
MB157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-1細胞、18G3.cl 1細胞、SK-ChA-1細胞
Kit 225 K6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1385細胞、251 MG細胞、VMM5細胞
NCIH250細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH322細胞、8305-C細胞、SNU-761細胞
A-172MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLEpiC細胞、SKG IIIa細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞
H125細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM16細胞、LLC-WRC 256細胞、RPPVEC細胞
RDES-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT 78細胞、U-373-MG細胞、C-Lu-65細胞
H-661細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI-4M細胞、MKN7細胞、HCC1359細胞
MCF-12A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LSC-1細胞、SKHEP-1細胞、EB-2細胞
CAOV4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G-292, clone A141B1細胞、Hs 766細胞、Panc08.13細胞
RK13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCLP1細胞、AMJ2C8細胞、H-2444細胞
RC-K8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-FT細胞、Molm 14細胞、KLN205細胞
SW 837細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2122細胞、NCM-460細胞、Kasumi-1細胞
MM1-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NR8383細胞、L-M (TK-)細胞、UMRC2細胞
RPMI2650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H747細胞、HEC-1-A細胞、HS688AT細胞
ZR-75-30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBC-1/original細胞、SiHa細胞、EAC-E2G8細胞
MC3T3-E1 Subclone 24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1666_DA細胞、526mel細胞、Lung cancer-1/squamous細胞
NCIH2085細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs840T細胞、Mino細胞、IEC6細胞
BOWES細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T 24細胞、MDA 435細胞、3T3-A31細胞
MDA-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJ-RH30細胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞、NCIH820細胞
C3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCC-SUP細胞、GAK細胞、CII細胞
COLO 320F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G-402細胞、IAR-20細胞、Immortalized Human Hepatocytes細胞
HCC-9204細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNGHOS細胞、Sp2/0-Ag-14細胞、FTC-133細胞
HBVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-27細胞、Kelly細胞、OCI AML4細胞
Evsa-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-9S1細胞、C42細胞、NCI-H1703細胞
DHL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Normal Rat Kidney細胞、PL11細胞、Fu97細胞
Kit 225 K6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1385細胞、251 MG細胞、VMM5細胞
H-2126細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A253細胞、VCaP細胞、Be Wo細胞
Hepatoma-22細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI.H522細胞、Colo320細胞、B-104細胞
A-172細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Mel 2細胞、HPAF-2細胞、KALS-1細胞
UPCISCC154細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FTC133細胞、SK-N-BE(1)n細胞、138 MG細胞
LTEPsm細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H596細胞、ONS76細胞、LC-1/sq細胞
D407 RPE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H508細胞、SuDHL 10細胞、GM05384細胞
A375SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PBMC細胞、MKN-7細胞、SLMT1細胞
H1650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2171細胞、PLB-985細胞、HCCLM6細胞
MDA435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC-3細胞、MFE280細胞、JEG3細胞
SMA560細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit 225 K6細胞、CEM/0細胞、PECAPJ34細胞
EA hy 926細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00637B細胞、SUDHL-6細胞、HS-68細胞
HCC-827細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-7B細胞、NCI-H1341細胞、SW 527細胞
TCam-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMES-1細胞、NB-9細胞、HFF細胞
HM1900細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 636.T細胞、RFL6細胞、Immortal Pig Intestinal-2I細胞
S91細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM192細胞、Walker-256細胞、MDAMB134細胞
RINm5F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMO1細胞、U138MG細胞、SKHEP-1細胞
Super Tube Cell:狗腎細胞系
PLB-985細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H676細胞、CAL 12細胞、KMH2細胞
Lewis Lung Cancer細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Embryonic Bovine Tracheal cells細胞、HEL-1細胞、Caki-1細胞
AtT 20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HN13細胞、A549/ATCC細胞、MCF7/WT細胞
SKUT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-498細胞、Kit225細胞、Ra #1細胞
RBVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI AML2細胞、HDLM2細胞、HBZY 1細胞
NK-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WPMY1細胞、CAL-62細胞、MDA-MB-361細胞
LTEPsm細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H596細胞、ONS76細胞、LC-1/sq細胞
HL-60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-813細胞、CX-1細胞、KNS62細胞
MKN 28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AG06814-N細胞、RPMI #1846細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞
U-373MG ATCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-Sf21-AE細胞、A2780-CP細胞、HK-2 [Human kidney]細胞
HBE 135-E6/E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHL-124細胞、SCC 9細胞、HPMC細胞
MESSA Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PASMCS細胞、EB-3細胞、293 Ad5細胞
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