"NeHepLxHT Cell:人正常干細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
D-283 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KALS1細(xì)胞、HCC1954 BL細(xì)胞、RA-FLSs細(xì)胞
FD-LSC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DI-TNC1細(xì)胞、DK-MG細(xì)胞、C127細(xì)胞
GM00346細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細(xì)胞、BT474細(xì)胞、HFL-1細(xì)胞
IOSE 29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-EBNA1細(xì)胞、F442A細(xì)胞、Hx147細(xì)胞
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
NeHepLxHT Cell:人正常干細(xì)胞系
因?yàn)榧?xì)胞生長(zhǎng)的時(shí)候肯定是要相互聯(lián)系,大部分的細(xì)胞都是要成片生長(zhǎng)的,尤其是對(duì)于貼壁細(xì)胞,單個(gè)細(xì)胞貼壁之后長(zhǎng)著長(zhǎng)著就長(zhǎng)到一片去了。但是如果是成片的細(xì)胞抱團(tuán)的話,傳代后細(xì)胞是不能貼壁的,這樣抱團(tuán)的細(xì)胞就會(huì)死亡。所以,消化傳代的時(shí)候一定要將細(xì)胞消化成單個(gè)單個(gè)的獨(dú)立狀態(tài),這個(gè)啊是非??季磕愕墓Ψ虻模〖?xì)胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個(gè),因?yàn)樗麤](méi)有受力點(diǎn)了。很難找到受力點(diǎn)讓你對(duì)他吹打的力分散開(kāi)細(xì)胞。所以必須要在細(xì)胞未脫落之前將其吹打開(kāi),受力點(diǎn)就是細(xì)胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴(yán)格控制好消化的程度啊,這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來(lái),又不能太過(guò),一吹就整片脫落,要單個(gè)單個(gè)地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長(zhǎng)狀態(tài)貼壁程度的細(xì)胞能夠都維持在好的受力點(diǎn)分散開(kāi)。這個(gè)是很重要的一點(diǎn)。尤其是對(duì)于某些細(xì)胞這一點(diǎn)就是他活去死的致命點(diǎn)。像Caco-2細(xì)胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點(diǎn)就是一定不能等到細(xì)胞長(zhǎng)滿的時(shí)候才去消化傳代。要在細(xì)胞長(zhǎng)到70%左右的時(shí)候就要傳代了,一旦發(fā)現(xiàn)細(xì)胞生長(zhǎng)中已經(jīng)有疊層生長(zhǎng)的時(shí)候就要立即進(jìn)行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時(shí)候洗瓶的問(wèn)題。對(duì)于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞,你在洗的時(shí)候如果是用無(wú)血清1640去洗細(xì)胞在隨即后的幾次中會(huì)比用DMEM洗的長(zhǎng)的要好。同樣,用1640培養(yǎng)的也有這個(gè)現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話,可以用PBS來(lái)洗,洗的效果和用無(wú)血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的,對(duì)于有些細(xì)胞會(huì)更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清,防止它對(duì)胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先,是很關(guān)鍵的一點(diǎn)。先補(bǔ)充這么多,還會(huì)后續(xù)更新。再補(bǔ)充一點(diǎn):傳代時(shí)PBS洗是很重要的一步,最近發(fā)現(xiàn),用PBS就可以把細(xì)胞消化開(kāi)來(lái)。加入PBS放置10-15分鐘,有些需要更長(zhǎng)的時(shí)間,等到細(xì)胞一個(gè)個(gè)分離開(kāi)來(lái)的時(shí)候,就可以直接吹打下來(lái),但是和胰酶消化一樣,要控制好時(shí)間,不能時(shí)間太過(guò)了,要不然損傷細(xì)胞,細(xì)胞不容易成活,狀態(tài)容易不好。這個(gè)方法對(duì)于某些細(xì)胞是很管用的。有些細(xì)胞用胰酶消化不容易消化成單個(gè)的時(shí)候,或者臨時(shí)沒(méi)有胰酶了,可以選用此方法。不過(guò)一定要試試,看是否適合你的細(xì)胞。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:5-1:10傳代,每周換液2-3次
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散;3)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長(zhǎng)不宜超過(guò)72小時(shí));2)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請(qǐng)將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請(qǐng)優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng);3)如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請(qǐng)及時(shí)做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
SW839細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC-2細(xì)胞、Kit 225 K6細(xì)胞、SNU182細(xì)胞
526mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-E1(C4)細(xì)胞、RPMI7951細(xì)胞、HD11細(xì)胞
Bac1 2F5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63Ag8.653細(xì)胞、PanC1細(xì)胞、Hu-P-T4細(xì)胞
EBC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCMEC細(xì)胞、Institute for Medical Research-32細(xì)胞、NCI-H650細(xì)胞
SNU-216細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC97-L細(xì)胞、JVM-3細(xì)胞、M-NFS-60細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
NeHepLxHT Cell:人正常干細(xì)胞系
貼壁細(xì)胞消化傳代時(shí)通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時(shí),棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對(duì)細(xì)胞施加胰酶選擇,因?yàn)榭偸琴N壁不牢的細(xì)胞先脫落,對(duì)腫瘤細(xì)胞來(lái)說(shuō),這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡(jiǎn)單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對(duì)于較難消化的細(xì)胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對(duì)細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點(diǎn),直接加酶消化應(yīng)該不會(huì)有什么問(wèn)題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細(xì)胞脫落。不過(guò)有人說(shuō)EDTA對(duì)細(xì)胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡(jiǎn)單、省事;效果很好并且不損失細(xì)胞!
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣
SK UT 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU216細(xì)胞、HD11細(xì)胞、MN60細(xì)胞
U-2 OS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL 1-0細(xì)胞、HSAS3細(xì)胞、MMQ細(xì)胞
SUM-52-PE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 175 VII細(xì)胞、HN13細(xì)胞、HuH1細(xì)胞
PNT1/A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1599細(xì)胞、Hs729T細(xì)胞、NRK-49F細(xì)胞
BEL7402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細(xì)胞、2PK3細(xì)胞、Potorous tridactylus Kidney 2細(xì)胞
CWR22R-V1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLE-SRA-01/04細(xì)胞、NG-108-15細(xì)胞、CAL12T細(xì)胞
KU 19-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bovine Turbinate細(xì)胞、NCIH2141細(xì)胞、Caco-2BBe細(xì)胞
NeHepLxHT Cell:人正常干細(xì)胞系
HCT-116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGW-I-nu細(xì)胞、HS 1.Tes細(xì)胞、HCET細(xì)胞
HB611細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR8/SVneo細(xì)胞、Human Kidney-2細(xì)胞、HCFB(HCF)細(xì)胞
NCI-1155細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM05372細(xì)胞、MCF7-GFP細(xì)胞、102PT細(xì)胞
P30-OHK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA468細(xì)胞、KU812-F細(xì)胞、H441細(xì)胞
H1836細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1581細(xì)胞、MUGCHOR1細(xì)胞、GM00215A細(xì)胞
HIT T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 8細(xì)胞、DH82細(xì)胞、TCMK-1細(xì)胞
SK-N-BE(1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AZ-521細(xì)胞、NOR-10細(xì)胞、RAMOS2G64C10細(xì)胞
C3H-10T1/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUTZ-3細(xì)胞、ATN1細(xì)胞、Hs 281.T細(xì)胞
MLE-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA361細(xì)胞、Sp 2817細(xì)胞、TMK1細(xì)胞
Panc3_27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG13細(xì)胞、Hs 746.T細(xì)胞、SVG p12細(xì)胞
CCRF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC9706細(xì)胞、SP2/0 Ag-14細(xì)胞、EA hy 926細(xì)胞
OVCA420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H 9細(xì)胞、MGH-U1細(xì)胞、CEM-CCRF細(xì)胞
SRA01/04 (HLE)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMO-1細(xì)胞、SBC3細(xì)胞、3-LL細(xì)胞
A431/P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2135細(xì)胞、MCF12F細(xì)胞、LMTK-細(xì)胞
EL4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK.2細(xì)胞、SK-MEL3細(xì)胞、SV40-HCEC細(xì)胞
MPC-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-886細(xì)胞、NCIH1703細(xì)胞、MOLM-14細(xì)胞
SCC25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-940細(xì)胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細(xì)胞、P3-Jiyoye細(xì)胞
NCIH1299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1650_CO細(xì)胞、JS1細(xì)胞、Swiss 3T6細(xì)胞
PC-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CWR-22rv1細(xì)胞、V79-GalK1細(xì)胞、JJN3細(xì)胞
MeWo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly3細(xì)胞、HBVSMC細(xì)胞、OPM-2細(xì)胞
Farage OL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:F-36P細(xì)胞、SK-RC 52細(xì)胞、SK-MEL5細(xì)胞
YD38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AG06814-J細(xì)胞、OVCAR-8/ADR細(xì)胞、143B細(xì)胞
SK-RC-42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LoMeT-ccRcc細(xì)胞、U87細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細(xì)胞
MSTO-211細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC2細(xì)胞、TFK1細(xì)胞、SK.MEL.2細(xì)胞
GM03190A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-253細(xì)胞、Fu97細(xì)胞、TEC細(xì)胞
AC16 [Human hybrid]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU86.86細(xì)胞、L2細(xì)胞、L23/P細(xì)胞
EJ 138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IEC18細(xì)胞、MV(4;11)細(xì)胞、MSCs(mUCMSCs)細(xì)胞
NUGC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP C4-2細(xì)胞、HBE 135-E6/E7細(xì)胞、H1703細(xì)胞
Astrocyte type I clone細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-1細(xì)胞、H2.35細(xì)胞、SHI1細(xì)胞
T-ALL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS(4;11)細(xì)胞、HFE-145細(xì)胞、SKMel-5細(xì)胞
KP4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS653細(xì)胞、F9細(xì)胞、VP229細(xì)胞
Karpas422細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 12細(xì)胞、Hepa 1-6細(xì)胞、W133細(xì)胞
U-hth74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEL-526細(xì)胞、HuT-78細(xì)胞、P3HR1細(xì)胞
H1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGW-nu-1細(xì)胞、SVEC 4-10細(xì)胞、SK Mel 1細(xì)胞
HNE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RINm5F細(xì)胞、TE-14細(xì)胞、AX-Mel細(xì)胞
MNNG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:I90細(xì)胞、Clone 929細(xì)胞、SW 839細(xì)胞
KRC/Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMM5細(xì)胞、GT1-1細(xì)胞、P31/FUJ細(xì)胞
Monomac-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2228細(xì)胞、Panc 10.05細(xì)胞、SUM190細(xì)胞
MDBK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC10細(xì)胞、U-hth74細(xì)胞、HBZY1細(xì)胞
CT26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-EMC-SS細(xì)胞、GM03569B細(xì)胞、H-526細(xì)胞
RIN-m細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLM-13細(xì)胞、DMS 53細(xì)胞、BMU-S1細(xì)胞
MDBK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC10細(xì)胞、U-hth74細(xì)胞、HBZY1細(xì)胞
RBL 2H3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2023細(xì)胞、UPCI-SCC-90細(xì)胞、C4-2細(xì)胞
NeHepLxHT Cell:人正常干細(xì)胞系
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tsup-1細(xì)胞、P3X63Ag8細(xì)胞、HTori-3.1細(xì)胞
MC116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs839.T細(xì)胞、SCaBER細(xì)胞、IHHA-1細(xì)胞
A-875細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA-433細(xì)胞、Helacyton gartleri細(xì)胞、MIA Paca2細(xì)胞
IOSE 80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2330細(xì)胞、NALM-6細(xì)胞、FHC細(xì)胞
MDA157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mink Lung細(xì)胞、T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞、UCLA NPA-87-1細(xì)胞
S.B.細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL7402細(xì)胞、HEK-293-EBNA細(xì)胞、DU 145細(xì)胞
RKOAS451細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T2(174 x CEM.T2)細(xì)胞、H-2141細(xì)胞、H-820細(xì)胞
AG06814-M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774 A.1細(xì)胞、SNU-761細(xì)胞、Walker/LLC-WRC256細(xì)胞
MC-116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SBC3細(xì)胞、NPA87-1細(xì)胞、H-510細(xì)胞
MPVECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 239A細(xì)胞、PL-9細(xì)胞、Hs819.T細(xì)胞
NCIH1092細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC-JF細(xì)胞、D283細(xì)胞、SK-OV-433細(xì)胞
KMB17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Verda reno細(xì)胞、NCI-H157細(xì)胞、MC/CAR細(xì)胞
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